慢病毒介导沉默信息调节因子1基因表达增高的骨髓间充质干细胞模型建立

目的：利用携载大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs），构建SIRT1基因表达增高的BMSCs模型。方法：设计合成大鼠SIRT1基因序列，包装成Alisertib可感染的慢病毒，用不同感染复数（MOI）的慢病毒感染大鼠BMSCs，筛选出适宜的MOI值后，在经慢病毒感染D-Lin-MC3-DMA抑制剂的BMSCs中通过RT-PCR检测SIRT1基因mRNA含量，通过细胞免疫组化检测慢病毒感染的BMSCs中SIRT1蛋白的表达情况。结果：成功构建LV-SIRT1慢病毒，病毒滴度为1×1thermal disinfection0~9 TU/mL，其感染大鼠BMSCs后，与对照组相比，SIRT1基因mRNA的相对表达量增高4.71倍，过表达效率为471%(P<0.05)，且从细胞免疫组化结果中可见，慢病毒过表达组的染色较深，SIRT1蛋白表达高。结论：成功构建SIRT1基因表达增高的BMSCs模型，为骨科相关疾病的研究提供了细胞模型基础。