研究背景:瘢痕Canagliflozin疙瘩是一种肿瘤样病理性瘢痕,其形成与成纤维细胞异常增殖和细胞外基质(ECM)过度沉积有关。转化生长因子β诱导蛋白(TGFBI)作为一种促肿瘤的基因,在多种恶性肿瘤中被研究过,如乳腺癌、恶性黑色素瘤和骨肉瘤等。在这些疾病中,TGFBI具有促进肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭及转移的作用。同时,它作为一种结缔组织蛋白能通过促进细胞和ECM相互作用使ECM过度沉积。丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路是瘢痕疙瘩发病机制的经典通路,主要负责调控细胞增殖、迁移以及细胞分化等生物学行为。然而,TGFBI能否影响瘢痕疙瘩成纤维细胞的生物学行为和MAPK/ERK信号通路,目前还不能明确。研究目的:本研究旨在通过分析TGFBI在瘢痕疙瘩组织和细胞中的表达情况及能否影响细胞生物学行为和MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达情况,寻找治疗瘢痕疙瘩的新方法。研究方法:收取腹壁整形手术和包皮环切手术后切取的正常皮肤来提取正常皮肤成纤维细胞(NFs),并从手术切取的废弃瘢痕疙瘩组织中提取瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)。进行蛋白质印迹(WB)和实时荧光定量PCR(q PCR)实验检测NFs和KFs中TGFBI的表达情况。实验组以TGFBI靶向si RNA转染KFs,敲低KFs的TGFBI表达水平,而空载si RNA转染KFs作为对照组。根据cck8实验和克隆形成实验的结果,观察TGFBI敲低后KFs增殖能力的变化;p16 immunohistochemistry进行划痕实验和小室迁移实验测定TGFBI敲低后KFs的迁移能力;使用流式细胞术分析TGFBI敲低后对KFs细胞凋亡的影响。最后,通过WB实验评估细胞外基质胶原蛋白和细胞纤维化相关蛋白的表达水平,以及MAPK通路相关蛋白的表达情况。研究结果:1.相较于正常成纤维细胞,TGFBI的m RNA和蛋白表达水平在KFs中均明显升高;2.敲低TGFBI抑制了KFs的增殖和迁移,而对细胞凋亡有促进作用;3.敲低TGFBI降低了KFs的细胞外基质中I型胶原和细胞纤维化相关蛋白的表达水平;4.敲低TGFBI减少了MAPK/ERK相关蛋白的表达。结论:TGFBI促进了KFs的迁移、增殖、纤维化蛋白和细胞IDN-6556分子量外基质中I型胶原蛋白的表达,抑制了细胞凋亡;并且能够促进MAPK/ERK信号通路的相关蛋白表达。提示TGFBI可能是治疗瘢痕疙瘩疾病的潜在治疗靶点。