背景及目的:近年来,我国乳腺癌发病率呈逐年上升趋势,据相关数据统计,我国乳腺癌的发病率已位居女性癌症的首位。乳腺癌的发生发展是一个多种因素相互调控的过程。乳腺癌组织中浸润的多种免疫细胞和基质细胞及各种细胞分泌的细胞因子都参与其中。肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)作为乳腺癌微环境中的重要组分,通过分泌细胞因子来介导其与肿瘤细胞之间的相互作用,在乳腺癌细胞增殖迁移、逃避免疫反应及产生耐药性等方面起到促进作用。巨噬细胞迁移抑制因子(Macrophage migration-inhibitory factors,MIF)是一种促瘤细胞因子,在肿瘤组织中高表达。研究发现TAMs可以分泌MIF,二者均与肿瘤的不良进展相关。然而,TAMs分dilation pathologic泌的MIF在乳腺癌中的作用尚未见相关报道。因此TAMs是否通过分泌MIF促进乳腺癌的进展值得深入研究。本课题旨在研究M2巨噬细胞来源的MIF对乳腺癌细胞的影响,并探究MIF影响乳腺癌的具体机制,从而为乳腺癌的临床治疗提供一个新的靶点。方法:利用PMA诱导THP-1细胞分化为M0巨噬细胞、IL更多-4和IL-13将M0巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞;Western-blot检测M1巨噬细胞和M2巨噬细胞表型标志物的表达和M2型巨噬细胞中MIF的蛋白表达情况;ELISA法检测M2型巨噬细胞上清液中MIF的分泌量;沉默或过表达M2型巨噬细胞中的MIF,使用Western-blot和ELISA验证转染效果;收集经过不同处理后的M2型巨噬细胞的上清液制备条件培养基,用于培养乳腺癌细胞BT-549和MCF-7,CCK-8实验检测乳腺癌细胞的增殖,划痕实验和transwell实验用于检测细胞迁移;利用共培养小室将转染MIF的M2型巨噬细胞与BT-549或MCF-7细胞共培养,Western-blot检测BT-549和MCF-7细胞中E-cadherin、Vimentin、P-ERK1/2、FBXW7(F框/WD-40域蛋白7)的表达;向乳腺癌细胞中加入ERK通道阻断剂U0126,然后将其与过表达MIF的M2型巨噬细胞共培养,Western-blot检测BT-549和MCF-7细胞中FBXW7、P-ERK1/2、E-cadherin、Vimentin的表达,CCK-8检测细胞增殖,划痕实验和transwell实验检测细胞迁移。结果:M2型巨噬细胞比M0型巨噬细胞分泌MIF增多。当与M2型巨噬细胞共培养后,BT-549和MCF-7细胞的增殖和迁移增加,细胞中EMT相关蛋白E-caErdafitinibdherin表达减少,Vimentin表达增加。当沉默M2型巨噬细胞中的MIF后,其促进BT-549和MCF-7细胞增殖迁移和EMT的能力被抑制;而过表达MIF的M2型巨噬细胞进一步促进BT-549和MCF-7细胞的增殖迁移和EMT。沉默MIF后乳腺癌细胞中FBXW7的表达升高,过表达MIF后FBXW7的表达下降,而P-ERK1/2的变化与FBXW7相反。ERK阻断剂可逆转MIF对FBXW7的抑制作用,恢复乳腺癌细胞中FBXW7的表达,并抑制乳腺癌细胞增殖迁移及EMT。结论:M2型极化的巨噬细胞分泌MIF增多;MIF通过激活乳腺癌细胞中ERK信号通路抑制FBXW7的表达,促进乳腺癌的增殖和迁移。