普城沙雷氏菌ACCC 02146产灵菌红素调控基因的鉴定

【目的】鉴定影响普城沙雷氏菌ACCC 02146产灵菌红素能力的基因,构建ACCC 02146的转座子突变体文库,为进一步Biodata mining研究普城沙雷氏菌ACCC 02146灵菌红素合成机制奠定基础。【方法】采用平板划线法从菌种保藏中心购买菌株和实验室保藏菌株中获得15株产灵菌红素的菌株。采Z-IETD-FMK分子量用16S rRNA基因测序法鉴定各菌株,邻接建树将其分类,并比较不同类别菌株灵菌红素合成基因簇启动子序列差异,观察各菌株产色能力。对16S rDNA序列和灵菌红素合成基因簇启动子序列均有异于其他菌株的普城沙雷氏菌ACCC 02146合成灵菌红素的调控基因展开研究。构建ACCC 02146的转座子突变体文库,筛选出产色能力明显改变的克隆子并鉴定出对应的转座子插入突变基因。【结果】该突变体文库中有74个突变体表现出产灵菌红素能力的变化。其中25个突变体转座子插入发生在pigA、pigB、pigC、pigD和pigH等5个灵菌红素合成簇基因上,49个突变体转座子插入基因为灵菌红素合成基因簇之外的基因。在鉴定到的产色能力改变的突变体中,麦芽糖O-乙酰基转移酶基因突更多变菌株有6个,二氢乳清酸脱氢酶基因突变菌株有4个,MarR家族转录因子SlyA基因突变体有3个,winged helix家族的双组分转录调控因子RstA基因突变体有3个,H-醌氧化还原酶亚基I基因突变菌株有3个,NADH-醌氧化还原酶G链基因突变菌株有3个,肽基脯氨酰异构酶B基因突变菌株有3个,其他突变基因对应的克隆子数量为1~2个。【结论】在沙雷氏菌中,除了灵菌红素合成簇基因调控灵菌红素合成,推测灵菌红素合成簇外编码相关酶、转录调控因子和一些结构蛋白的基因通过直接或间接途径在不同程度上调控了灵菌红素的合成。

牡荆苷对糖尿病肾病大鼠炎症因子及氧化应激反应的影响

目的 探究牡荆苷对糖尿病肾病(DNutrient addition bioassayN)大鼠炎症因子及氧化应激反应的影响。方法 随机将60只SD大鼠分为空白组、模型组、依那普利组、牡荆苷高、中、低剂量组,每组10只。单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导DN大鼠模型,造模成功后,依那普利组给予马来酸依那普利片(10 mg/kg)灌NVP-TNKS656胃,牡荆苷高、中、低组给予浓度为4、2、1 mg/ml的牡荆苷溶液(10 ml/kg)灌胃,空白组与模型组给予相等剂量0.9%NaCl溶液灌胃,各组灌胃1次/d,连续干预8 w。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)等指标及肾组织GSH-Px、MAD、SOD指标,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾组织病理改变。结果 与空白组相比,模型组血清IL-6、hs-CRP、TNF-α水平均明显升高(P<0.01),血清及肾脏GSH-Px、SOD水平明显降低(P<0.01),MDA水平明显升高(P<0.01)。与模型组相比,依那普利组、牡荆苷中、高剂量组血清IL-6、hs-CRP、TNF-α水平明显降低(P<0.01),血清、肾脏GSH-Px、SOD水平明显升高(P<0.01),MDA水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。与依那普利组相比,牡荆苷高剂量组血清hs-CRP、TNF-α、MDA水平显著降低(P<0.01,P<0.05),血清GSH-Px、SOD水平显著升高(P<0.01)、血清IL-6及肾脏MDA、SOD、GSH-Px水平无显著差异(P>0.05)。肾病理组织显示:模型组肾小球充血,基底膜增厚,肾间质大量炎性细胞浸润;牡荆苷高剂量组肾小球无系膜基质扩张selleck抑制剂,肾小管及肾间质形态基本正常;牡荆苷中剂量组肾小球、肾小管结构也有一定改善。结论 牡荆苷可降低DN大鼠的炎症因子及氧化应激反应,具有保护肾功能的作用。

超声引导腰方肌前路阻滞联合全麻对腹腔镜结直肠癌患者术后恢复作用研究

目的 探讨分析超声引导腰肌前路阻滞联合全麻在腹腔结直肠癌根治术中的应用价值。方法 回顾性分析2019年6月至2022年6月本院收治的58例结直肠癌患者,研究人员根据患者选择的麻selleck Lapatinib醉方式不maternally-acquired immunity同将58例患者分为两组,其中观察组30例,行超声引导腰方肌前路阻滞联合全身麻醉,对照组28例,行单纯全身麻醉。结果 观察组患者的苏醒时间、开始下床活动时间、肛门开始排气时间、住院时间均明显优于对照组患者(P<0.05);手术治疗后3 d,观察组患者的IL-6、IL-8指标水平均明显小于对照组患者,IL-10指标水平显著大于对照组患者(P<0.05);手术治疗3 d,观察组患者E、AOPP指标水平均小于对照组,但CAT指标水平略大于对照组患者(P<0.05);手术治疗后1 d、观察组患者PT、APTT、FIB指标水平均大于对照组患者,而D-二聚体水平小于对照组患者(P<0.05)。结论 对结直肠癌患者行腹腔镜手术治疗时,应用超声引导RepSox价格腰方肌前路阻滞联合全麻方式,可有效减轻别人术后炎症反应及氧化应激反应、术后病人恢复更快,安全性较高,适合临床选择应用。

失眠群体对情绪信息的注意偏向

失眠是一种常见的睡眠障碍,常常伴随焦虑或抑郁等负面情绪。失眠认知领域的主流模型认为注意偏向在失眠的发生维持中起关键作用。同时,研究发现焦虑抑郁群体往往存在对负性情绪刺激的注意偏向。以往研究较多关注失眠群体对睡眠相关刺激的注意偏向,单纯的失眠群体是否存在负性注意偏向是不清楚的。研究一般性负性情绪的注意偏向有助于厘清负性情绪注意偏向是否在失眠的病理机制中发挥作用。因此,本研究首先对失眠伴随和不伴随情绪障碍的群体进行分离,并进一步探讨不伴随情绪障碍的单纯失眠个体是否存在负性情绪刺激的注意偏向。实验一探讨了失眠与焦虑和抑郁的伴随关系分布特征。我们在医院神经内科门诊部采集了214名群体数据,包括失眠严重程度指数量表(ISI)、广泛性焦虑障碍量表,以及抑郁症筛查量表。结果发现,失眠程度ISI>14的Immunochromatographic assay中重度失眠群体95人,其中68%有中重度焦虑或抑郁症状;8≦ISI≦14的轻度失眠群体71人,其中70%有中重度焦虑或抑郁;ISI≤7的无失眠群体48人,其中44%有中重度焦虑或抑郁。可以看出无失眠组焦虑抑郁的比例下降,提示失眠与焦虑抑郁存在一定关联。但是失眠的程度不影响焦虑抑郁的比例,提示失眠与焦虑抑郁存在分离的机制。实验二探讨了无焦虑和抑郁的失眠中重度群体对一般性正负情绪刺激是否存在注意偏向。我们采用一种创新的视觉搜索范式,包Belnacasan细胞培养括竞争情绪(同时存在生气面孔和开心面孔)和非竞争情绪(只存在一种生气或开心面孔)两种条件,并采用客观的眼动注视指标。结果发现,在竞争条件下,正常组第一眼跳落到开心面孔的概率比生气面孔高,而失眠组第一眼跳落到生气面孔上的概率比开心面孔更高。在非竞争下失眠组和正常组无显著差异。结果提示排除了焦虑抑郁的情况下,单纯的失眠群体也存在对一般负性情绪刺激的注意偏向。总之,本研究表明失眠与焦虑抑郁存在一PF-6463922定关联但是又存在独立的机制。在排除了焦虑抑郁的情况下,单纯的失眠群体也存在对一般负性情绪刺激的注意偏向。这提示对负性情绪的注意偏向可能在失眠的病理机制中发挥作用。

系统性红斑狼疮患者血栓性事件与血浆血小板来源的细胞外微囊泡水平的关联性

[目的]探讨血小板来源的细胞外微囊泡(PEV)与系统性红斑狼疮(SLE)血栓性事件的关联性。[方法]采用横断面研究方法,纳入2019年1月—2022年Stem Cell Culture4月于开滦总医院风湿免疫科就诊的SLE患者144例。收集入选患者的一般情况、实验室数据以及血栓性事件资料,采用流式细胞术检测血浆PEV。比较合并和未合并血栓性事件的SLE患者之间血浆PEV水平,并进一步将144例SLE患者分为高水平PEV组(PEV≥300.48个/μL)和低水平PEV组(PEV<300.48个/μL),比较不同PEV水平组间血栓性事件发生情况和凝血指标间的差异,采用Spearman相关分析血浆PEV与凝血指标的相关性,多因素Logistic回归分析血浆PEV与血栓性事件的关联性。[结果]合并血栓性事件的SLE患者血浆PEV水平高于无血栓性事件的SLE患者[306.65(150.98,342.75)个/μL比227.04(178.23,281.36)个/μL,P<0.01]。与低水平PEV组比较,高水平PEV组血栓性事件发生率更高(38.29%比2IDN-6556化学结构0.61%,P<0.05)。Spearman相关分析显示,PEV与SLE患者血浆纤维蛋白原、D-二聚体水平呈正相关(r=0.799、0.6044,P=0.001、0.027)。多因素Logistic回归分析发现,外周血PEV与SLE患者总血栓性事件、动脉血栓性事件显著相关(OR=1.78、2.23,P<0.001、0.019),但与静脉血栓性事件的相关性未有统计学差异(P>0.05)。[结论]合并血栓性事件的SLE患者血浆PEV水平增高,与高凝状态和Cell Cycle抑制剂血栓性事件相关,可能是SLE患者动脉血栓性事件的有效标志物。

高尿酸血症与老年特发性膜性肾病患者预后的关系

目的 分析老年(年龄>60岁)特发性膜性肾病(IMN)患者发生高尿酸血症的影响因素,探讨高尿酸血症对老年IMN患者预后的影响。方法 2011年1月—2018年4月中国人民解放军总医院诊治老年IMN患者336例,其中发生高尿酸血症者80例为高尿酸血症组,血尿酸水平正常者256例为尿酸正常组。比较2组体质量指数、肾脏病病程、合并症(高血压、糖尿病)、慢性肾脏病分期及入院时血压、血红蛋白、空腹血糖、血肌酐、血白蛋白、血尿酸、血清尿素和总胆固醇等临床资料。2组均行经皮肾穿刺活检组织病理检查,记录Ehrenreich-Churg分期、肾小球球性硬化评分、肾小球节段硬化/球囊粘连评分、肾小管萎缩/间质纤维化评分、肾间质炎症细胞浸润评分、肾小管间质评分、肾血管病变评分及补体C3沉积情况。采用多因素logistic回归分析老年IMN患者发生高尿酸血症的影响因素。2组均采用肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)抑制剂、糖皮质激素和钙调磷酸酶抑制剂治疗,高尿酸血症患者给予降尿酸治疗,随访6~24个月,记录末次随访时总缓解率。采用多因素Cox回归分析老年IMN患者治疗后未缓解的影响因素。结果 (1)高尿酸血症组体质量指数[(26.52±3.83)kg/m~2]及血清尿素[(6.52(5.38,8.69)mmol/L]、总胆固醇[(6.90±2.34)mmol/L]水平均高于尿酸正常组[(25.11±4.53)kg/m~2、5.52(4.39,7.24)mmol/L、(6.21±2.07)mmol/L](P<0.05),肾脏病病程、高血压及糖尿病比率、慢性肾脏病分期、肾病综合征发生率,入院时收缩压、舒张压、血红蛋白、空腹血糖、血肌酐、血白蛋白、估算肾小球滤过率、磷脂酶A2受体抗体阳性率、24 h尿蛋白定量、胱抑素C、N-乙酰葡萄糖苷酶、IgA、IgG、IgM、补体C3、补体C4、LXH254小鼠三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇水平与尿酸正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)高尿酸血症组肾间质炎症细胞浸润评分0分比率(6.3%)低于尿酸正常组(16.8%)(χ~2=5.537,P=0.019),肾间质炎症细胞浸润评分1分(86.2%)、补体C3沉积强度++(20.0%)比率均高于尿酸正常组(74.2%、10.6%)(χ~2=4.995,P=0.025;χ~2=4.881,P=0.027),治疗方案、Ehrenreich-Churg分期、肾小球球性硬化评分、肾小球节段硬化/球囊粘连评分、肾小管萎缩/间质纤维化评分、肾小管间质评分、肾血管病变评分及肾间质炎症细胞浸润评分2分和3分、补体C3沉积强度0和+比率与尿酸正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)体质量指数(OR=1.076,95%CI:1.003~1.048,P=0.04medical marijuana5)、血清尿素(OR=3.424,95%CI:1.275~9.195,P=0.015)是老年IMN患者发生高尿酸血症的影响因素。(4)随访至2018年4月,失访221例,余115例(高尿酸血症组27例、尿酸正常组88例)随访8(6,17)个月,高尿酸血症组总缓解率(59.3%)低于尿酸正常组(81.8%)(χ~2=5.852,P=0.016)。(5)血清总胆固醇(HR=0.781,95%CI:0.612~0.996,P=0.047)、补体C3沉积强度(HR=0.259,95%CI:0.075~0.892,P=0.032)是老年IMN患者治疗后未缓解的影响因素。结论 体质量指数和血清尿素水平升高的老年IMN患者易发生高尿酸血症,高尿酸血症可影响老年IMBelnacasan细胞培养N患者预后,血清总胆固醇水平和补体C3沉积强度升高时预后不良的风险增大。

核仁素通过调控胸苷激酶1影响淋巴瘤增殖的研究

目的:探讨核仁素通过胸苷激酶1(TK1)参与淋巴瘤增殖调控的机制。方法:选取弥漫性大B细胞淋巴瘤患者23例,纳入初治组14例,复发/难治组9例,检测患者血清TK1以及外周血单个核细胞中C23蛋白。以Burkitt淋巴瘤细胞株CA46为研究对象,通过慢病毒介导的转染方法,获得RNAi核仁素基因表达下调的细胞模型C购买MRTX849A46-NCL-KD及阴性对照组细胞模型CA46-NCL-KNC;采用细胞增殖法(MTS法)分别检测CA46-NCL-KD、CA46-NCL-KNC和CA46对阿霉素的增殖半数抑制率(IC_(50))。通过Q-PCR和Western blot分别检测CA46-NCL-KD、CA46-NCL-KNC细胞NCL mRNA和蛋白表达水平,用流式细胞术对CA46-NCL-KD、CA46-NCL-KNC和CA46细胞进行细胞周期检测,用酶免疫点印记化学发光法分析CA46-NCL-KD、CA46-NCL-KNC细胞TK1蛋白的表达情况。结果:初治组患者血清TK1水平为0.43(0.30-1.01)pmol/L,低于复发/难治组患者的10.56(2.19-14.99)pmol/L(P<0.01),且初治组患者外周血单个核细胞NCL蛋白相对表达量明显低于复发/难治组。CA46-NCL-KD对阿霉素的IC_(50)为(0.147±0Sentinel lymph node biopsy.02)μg/ml,明显低于CA46-NCL-KNC的(0.301±0.04)μg/ml以及CA46的(0.338±0.05)μg/ml(P<0.05);与CA46-NCL-K确认细节NC相比,CA46-NCL-KD中NCL mRNA和蛋白水平表达下降,细胞周期中的G_0/G_1期比例升高,S期及G_2/M期比例下降,TK1蛋白表达下降。结论:在弥漫大B细胞淋巴瘤细胞以及淋巴瘤细胞株CA46细胞中NCL表达升高,提示细胞对药物敏感度降低,NCL可能通过影响TK1表达参与淋巴瘤细胞增殖的调控,从而影响淋巴瘤细胞对药物的敏感性。

白藜芦醇可减轻高糖诱导的心肌细胞肥大:基于促进SSIIRRTT1表达维持线粒体稳态

目的 探讨白藜芦醇是否通过促进沉默信息调节因子2同源体1(SIRT1)表达调控线粒体稳态,减轻高糖诱导的H9c2心肌细胞肥大。方法 将对数生长的H9c2心肌细胞随机分为4组:正常糖浓度组(NG组)、高糖组(HG组)、高糖+白藜芦醇组(HG+RES组)、高糖+白藜芦醇+SIRT1基因干扰组(HG+RES+si-SIRT1组)。Dinaciclib抑制剂各组细胞培养72 h后,检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,检测细胞活性氧(ROS)水平,计算细胞相对面积,检测心房利钠因子(ANF)和脑钠肽(BNP)mRNA表达,SIRT1蛋白、线粒体融合相关蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)和线粒体融合蛋白2(MFN2)、线粒体分裂相关蛋白线粒体动力相关蛋白1(DRP1)和线粒体分裂蛋白1(FIS1)以及线粒体自噬相关蛋白BNIP3L和LC3的表达。结果 与NG组相比,HG组心肌细胞SOD活力降低(P<0.01),MDA含量和ROS水平升高,细胞相对面积增加,ANF和BNP mRN购买CB-839A表达增加,SIRT1、OPA1、MFN2和BNIP3L蛋白表达降低,LC3-II/LC3-I比值降低,DRP1和FIS1蛋白表达增genomic medicine高(P<0.01);与HG组相比,HG+RES组SOD活力升高,MDA含量和ROS水平降低,细胞相对面积减少,ANF和BNP mRNA表达下降,SIRT1、OPA1、MFN2和BNIP3L蛋白表达增高,LC3-II/LC3-I比值增高,DRP1和FIS1蛋白表达降低(P<0.05);与HG+RES组相比,HG+RES+si-SIRT1组SOD活力降低,MDA含量和ROS水平升高,细胞相对面积增加,ANF和BNP mRNA表达增加,SIRT1、OPA1、MFN2、BNIP3L蛋白表达降低,LC3-II/LC3-I比值降低,DRP1和FIS1蛋白表达增高(P<0.05)。结论 白藜芦醇可通过减少ROS积累减轻氧化应激损伤抑制高糖诱导的H9c2心肌细胞肥大,其机制可能与促进SIRT1蛋白表达、调节线粒体融合分裂平衡、促进BNIP3L介导的线粒体自噬从而调控线粒体稳态相关。

基于Nrf2/HO-1通路探讨二十五味鬼臼丸对宫颈炎大鼠的治疗作用及机制

目的 研究藏药二十五味鬼臼丸对苯酚胶浆致宫颈炎模型大鼠的治疗作用及机制。方法 将雌性SD大鼠48只随机分为对照组、模型组及二十五味鬼臼丸低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g·kg~(-1))组和抗宫炎片(0.47 g·kg~(-1))组,每组8只。除对照组外,其余literature and medicine5组建立25%苯酚胶浆致宫颈炎大鼠模型,各药物组分别以相应selleck NMR药物ig给药,每日1次,连续给药12 d后取材。观察大鼠外阴炎症程度评分、子宫指数、子宫解剖形态学改变;采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠子宫组织病理学改变;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测子宫组织中超氧化物歧化酶(SMLN8237试剂OD)、丙二醛(MDA)含量变化;采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测子宫组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、NADPH氧化酶4(Nox4)的m RNA和蛋白表达情况。结果 与对照组比较,模型组大鼠外阴炎症评分、子宫指数、子宫组织中MDA水平、Nox4的m RNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01),体质量、SOD活性、Nrf2、HO-1的m RNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01),子宫组织出现不同程度的病理变化;与模型组比较,二十五味鬼臼丸能明显降低外阴炎症评分、子宫指数、子宫组织中MDA水平、Nox4的m RNA和蛋白表达(P<0.05、0.01),升高体质量及子宫组织中SOD活性和Nrf2、HO-1的m RNA和蛋白表达(P<0.05、0.01),减轻子宫颈炎症损伤程度。结论 二十五味鬼臼丸可能通过抑制Nox4的表达,激活Nrf2/HO-1通路,发挥抗氧化作用,减轻炎症反应,从而抑制宫颈炎发展。

清解化攻方调控NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎小鼠模型胰腺组织的保护作用

目的 观察清解化攻方对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠模型的治疗作用,探索清解化攻方抗炎症反monoterpenoid biosynthesis应的作用机制。方法 将36只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白组,模型组,清解化攻方低、中、高剂量组,西药组(乌司他丁),每组6只,除空白组小鼠,余各组小鼠采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型,清解化攻方低、中、高剂量组在造模后分别予以清解化攻方1、2、4 g/kg灌胃,西药组在造模PD-0332991核磁后予以腹腔注射乌司他丁(5×104 U/kg),共干预7 d。采用苏木素-伊红染色观察胰腺组织病理改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α水平;RTqPCR检测胰腺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)mRNA表达水平;免疫组化检测胰腺组织NLRP3、TLR4、NF-κB的阳性表达率;Western Blot技术检测NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白的表达水平。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与空白组相比,模型组小鼠胰腺组织结构弥漫性破坏、胰腺小叶间隔局灶性扩张、腺泡萎缩和大量炎症细胞浸润,α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显升高(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显上升(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达均明显上调(P值均<0.05)。与模型组相比,清解化攻方各剂量组和西药组可见小鼠胰腺组织结构稍紧密、完整,胰腺腺泡细胞排列有序,伴少量炎症细胞浸润和胰腺小叶出血灶,α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显下降(购买VE-822P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显降低(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达水平均明显减弱(P值均<0.05)。结论 清解化攻方可能通过抑制NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的激活,减少炎症介质的释放,防止炎症级联反应增强,进而对SAP小鼠胰腺组织发挥保护作用。