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核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)是调控基因转录的重要因子，参与炎症反应及心肌纤维化等多种疾病的病理过程，中医药激活NF-κB通路且通过控制不同基因参与氧化应激、炎症此网站、内皮功能障碍和细胞凋亡等过程而调控糖尿病心肌病。目前，靶向作用于NF-κB信号通路传导途径治疗糖尿病心肌病的中药单体、中成药、中药复方的相关研究存在以下问题：(1)相关研究多针对中药提取物，单味中药、复方及中药制剂的作用研究较少；(2)这些研究一般只针对NF-κB这一个通路，并未就通路间相互复杂联系进行交叉研究，明确各通路之间相互作用是阐明中药作用机制的重点；(3)大部分研究以体外细胞实验和动物实验为主，缺乏临床研究来进一步验证和支持。今后，应逐步拓宽研究对象范围，不仅包含中药单体，还应涉及单味中药、中药复方及中药制剂，也应涵盖GDC-0973小鼠多种剂型，突出中药区别于西药的特色；同时也要注重信号通Medium Recycling路之间的关联，明确中药作用于疾病的完整作用机制；还应着重于从分子学、细胞学、生物学等多角度多学科对这一通路的调控作用进行更深入的实验和临床研究。

ADAMTS(A Disintegrin and Metalloproteinase with Thrombospondin type ISymbiont interaction motifs)是一类Ceralasertib核磁含I型血小板反应蛋白模体的解整合素金属蛋白酶,目前在人类中已发现19个家族成员。ADAMTSs家族成员的主要作用是切割或修饰组织微环境中的细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)成分,在器官发育、组织形态发生、炎症、肿瘤等多种病理生理过程中发挥重要作用。ADAMTS18于2002年被首Navitoclax体内实验剂量次发现命名,一直被定义为“孤儿ADAMTS蛋白”,即不知功能和底物的ADAMTS家族成员。随着生物技术的发展和Adamts18基因敲除(Adamts18~(-/-))小鼠的建立,包括我们课题组在内的一些国内外研究团队发现:ADAMTS18主要表达于胚胎发育早期,通过切割修饰ECM分子,决定众多器官的早期形态发生。ADAMTS18在人胚胎肾脏中高表达,提示其可能在肾脏发育过程中发挥作用。课题组前期研究发现,ADAMTS18在肺、下颌下腺、泪腺等上皮分支类器官的发育和形态发生中发挥重要作用。肾脏属于典型的上皮分支类器官,但ADAMTS18对哺乳动物肾脏发育的确切影响及其内在机制仍不清楚。本论文将对这一科学问题展开研究。研究方法:(1)目前尚缺乏抗ADAMTS18特异性抗体,为此采用q RT-PCR实验方法检测Adamts18 mRNA在肾脏发育不同阶段的表达水平;通过RNA原位杂交技术检测Adamts18在肾脏中的表达部位及细胞类型。(2)通过血液和尿液生化检测及蛋白质组学分析,探究ADAMTS18对小鼠肾功能的影响。(3)通过透射电镜、HE染色、过碘酸希夫糖原染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)和六胺银染色(Periodic Acid-Silver Metheramine,PASM)等方法,探究ADAMTS18缺失对小鼠肾脏组织形态结构的影响。(4)通过q RT-PCR及免疫组化等方法探究ADAMTS18影响肾脏发育的分子机制。(5)通过马松(Masson)染色和免疫印迹(Western blot)方法探究ADAMTS18缺失在小鼠自发性肾纤维化中的作用。研究结果:(1)从E13.5-出生后14天(P14),是肾单位形成的关键期(肾单位由肾小体和肾小管构成;而肾小体又由肾小球和肾小囊组成)。这个时期,Adamst18 mRNA在肾脏中广泛表达,主要的细胞类型包括:输尿管芽顶端上皮细胞和集合管上皮细胞。在出生后2周,Adamst18 mRNA的数量急剧减少;出生6周后,Adamst18 mRNA在肾脏中几乎检测不到。(2)与野生型(Adamts18~(+/+))小鼠相比,Adamts18~(-/-)小鼠尿液中出现蛋白尿,且尿液中可溶性E-cadherin显著增加。(3)透射电镜结果显示Adamts18~(-/-)小鼠肾小球中上皮细胞和内皮细胞排列紊乱,细胞内皮细胞从基底膜剥脱,部分基底膜变薄、撕裂,足细胞足突减少和微绒毛化等。(4)Adamts18~(-/-)小鼠肾小球滤过膜成分Lama5和Lamb2较Adamts18~(+/+)小鼠表达显著性降低。(5)不同年龄Adamts18~(-/-)小鼠并未发现自发性肾纤维化形成。研究结论:ADAMTS18是一个与早期肾单位形成相关的阶段特异性基因,通过对肾小球滤过屏障细胞外基质成分的重塑,影响肾小球滤过屏障的形成。

目的 探讨酒精性肝纤维化的核因子(NF)-κB信号通路与性别差异的关系。方法 将7～8周龄的C57BL/6 N小鼠随机分为：雄性正常组、雄性模型组，雌性正常组和雌neuro genetics性模型组各20只。正常组采用对照液体饲料喂养8周，模型组采用酒精液体饲料喂养8周，联合31.5%乙醇灌胃(每周两次，5 g/kg)建立酒精性肝纤维化模型。8周末处死小鼠，检测各组小鼠血清学谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)的活性，雌二醇(E_2)和睾酮(T)的水平，天狼星红染色检测各组小鼠纤维化情况，HE染色观察肝组织病理学变https://www.selleck.cn/products/PD-0325901.html化，免疫组织化学法检测NF-κB-P65和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性面积率，免疫印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、磷酸化核因子κB-P65(p-NF-κB-P65)、核因子κB抑制因子α(IκBα)、磷酸化核因子κB抑制因子α(p-IκBα)的表达水平。结果 雄性模型组ALT,AST酶活性和T的水平升高，E_2的水平降低，胶原纤维增加，HE染色坏死积分升高，NF-κB-P65和α-SMA的阳性面积率增加，collagenⅠ,TNF-α、p-NF-κB-P65、p-IκBα的表达增加，IκBα的表达降低。结论 酒精更容易导致雄性小鼠肝纤维化，这可能与加强IκBα磷酸Microbiology抑制剂化释放NF-κB,促使磷酸化NF-κB-p65增多，进一步激活NF-κB信号通路有关。

目的 观察醒脑开窍针刺法联合通窍化栓汤对脑梗死患者氧化应激反应、脑血流动力学的影响。方法 收集北京中医药大学孙思邈医院2020年4月—2022年4月收治的脑梗死患者80例，随机分为对照组40例寻找更多，醒脑开窍针刺法、治疗组40例，醒脑开窍针刺法+通窍化栓汤，两组均进行基础治疗，评估治疗效果，测量治疗前及治疗后患者脑内血流动力学、脑损伤标志物及氧化应激指标水平Continuous antibiotic prophylaxis (CAP)，对比日常生活自理能力及神经损伤情况。结果 治疗后治疗组大脑(前动脉、中动脉、后动脉)平均血流速度、总有效率、血清超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、日常生活能力量表(Activityof Daily LivingScale, ADL)评分显著高于对照组，丙二醛(malondialdehyde, MDA)、神经元selleck NMR特异性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)、星形胶质源性蛋白(Soluble protein-100β,S100β)、美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale, NIHSS)评分显著低于对照组(P<0.05)。结论 给予脑梗死患者醒脑开窍针刺法联合通窍化栓汤治疗可显著改善其脑血流动力学及氧化应激反应，恢复患者生活自理能力。

目的:本研究旨在探讨2型糖尿病患者肾损伤指标与动态动脉硬化指数(Ambulatory arterial stiffness index,AASI)的相关性。方法:收集2017年9月-2022年9月就Hepatic fuel storage诊于新疆医科大学第一附属医院且完善肾脏穿刺组织学检查患者1671例,严格纳排后最终选择出85例患有2型糖尿病患者,依据病理结果分为糖尿病肾病(Diabetic Kidney Disease,DKD)和非糖尿病肾病(Non-Diabetic KQ-VD-Ophidney Disease,NDKD)组,回顾性搜集研究对象相关指标,所有指标用SPSS27.0进行统计学分析。结果:1.入组的85例糖尿病合并肾损伤患者中,DKD组患者占41.2%(35/85),DKD组患者糖尿病病程、血肌酐、24小时蛋白定量、ACR、24小时尿微量白蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、AASI高于NDKD组,血红蛋白、BMI、血细胞比容、eGFR、甘油三酯、血尿素氮低于NDKD组,且差异均存在统计学意义(P<0.05)。2.DKD组患者AASI值大于NDKD组(0.53±0.14vs0.45±0.15)差异存在统计学意义(P<0.05),多元线性回归分析结果提示:BMI、空腹血糖是AASI的影响因素。3.2型糖尿病患者肾损伤指标与AASI无明显相关关更多系(P>0.05)。4.ROC曲线分析:曲线下面积为0.661,AASI的截断点为0.515,即当AASI≥0.515时,2型糖尿病合并肾损伤患者为DKD的可能性较高。结论:DKD组患者动脉硬化程度较NDKD组患者重,2型糖尿病患者肾损伤指标与AASI无明显相关关系。

80只30日龄的新西兰肉兔随机分为4组：空白组(0%霉变玉米+15%正常玉米),低剂量组(5%霉变玉米+10%正常玉米)、中剂量组(10%霉变玉米+5%正常玉米)和高剂量组(15%霉变玉米+0%正常玉米),20只/组。于试验的第42天心脏采血、摘取肾脏。ELISA法检测饲料中AFimmune geneB1、ZEN、DON的含量；HE染色观察肾组织病理学变化；生化试剂盒检测血清中BUN、Cr、UA的水平及肾组织中MDA、NO、T-AOC、CAT、GSH-P3-MA采购x的含量；qPCR检测PI3K、HO-1、Nrf2、NQO-1 mRNA的表达水平。结果显示，空白组与低剂量组霉菌毒素未超标，中剂量组AFB1超标，高剂量组AFB1、ZEN超标。HE染色可见中、高剂量组肾小球呈分叶状，肾小管上皮细胞脱落，并伴有空泡变性。与空白组相比，中、高剂量组肾指数显著下降(P<0.05或P<0.01);中、高剂量组血清中BUN、UA、Cr水平及肾组织中MDA、NO水平显著升高(P<0.05或PSTM2457<0.01);中、高剂量组肾组织中CAT、GSH-Px、T-AOC含量及PI3K、Nrf2、NQO-1、HO-1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结果表明，霉菌毒素抑制了PI3K/Nrf2信号通路，降低了肾脏的抗氧化能力，导致肾脏氧化损伤。

目的 探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide, H_2S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenatselleckchem GSK2118436ion, H/R)损伤的影响，并阐明其相关作用机制。方法 H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细胞活力，荧光探针技术分别检测H_2S和活性氧(ROS)含量，生化试剂盒检测超氧化D-Lin-MC3-DMA配制物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率；Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶(cystathione-gamma-lyase, CSE)、细胞凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Cyt c和Bcl-2)表达及信号通路相关蛋白(ERK1/2、Phospho-ERK1/2)活性。结果 与对照(Control)组相比，缺氧/复氧(H/R)组细胞活力、内源性H_2S含量CSE蛋白表达、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均明显降低；细胞凋亡率、MDA和ROS含量、Cyt c及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高；同时，磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)活性明显降低。与H/R比较，H/R+NaHS(外源性H_2S供体)逆转了H/R对上述指标的影响。另外，Multi-functional biomaterialsPD98059(ERK1/2抑制剂)减弱了NaHS对磷酸化ERK1/2的作用。结论 肾小球系膜细胞H/R损伤与内源性CSE/H_2S系统下调有关；外源性H_2S通过上调ERK1/2通路抑制氧化应激和细胞凋亡，减轻肾小球系膜细胞H/R损伤。

目的:探讨USPs家族成员USP3在胆管癌中的作用,USP3可以通过促进胆管癌细胞的糖酵解激活Wnt/MYC途径,并通过与MYC结合抑制其泛素化水平,最终促进胆管癌的增殖和侵袭性转移。以证实USP3可能是胆管癌的潜在预后标志物,并能够调节癌细胞的生存和侵袭性,有望成为治疗胆管癌的一个新的分子靶点。方法:选取2015年7月至2022年5月在海南医genetic ancestry学院第一附属医院采集临床样本,共采集45对胆管癌组织和相应的正常组织。所有的手术标本都被冷冻并储存在-80℃下进行进一步的RNA和蛋白质分析,并嵌入蜡块中进行后续的IHC实验。统计学分析:使用Graph Pad Prism 8.0(Graph Pad Software,La Jolla,CA,USA)分析并呈现数据。使用SPPS-341体内实验剂量SS软件构建Kaplan-Meier生存曲线。通过t检验分析两组之间的统计差异,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1)USP3高表达的胆管癌患者预后较差,两种胆管癌细胞中USP3的表达均高于正常胆管上皮细胞。2)敲除USP3表达可显著抑制胆管癌细胞的增殖能力和侵袭与迁移能力。3)敲除USP3后,肿瘤代谢中的糖酵解途径发生了显著改变,胆管癌细胞的葡萄糖摄取显著降低。此外,胆管癌细胞中的乳酸浓度和ATP浓度亦显著降低。因此,降低USP3的表达水平可以显著降低肿瘤细胞的糖酵解能力,GLUT1、HK2、PDM2和LDHA靶基因的表达下调。4)裸鼠成瘤实验,与对照组相比,USP3基因敲除后癌细胞的增殖能力显著降低,皮下成瘤实验显示肿瘤体积和肿瘤重量均显著减少。实验组的增殖相关指数Ki67、PCNA、GLUT1、HK2、PKM2和LDHA显著降低。5)USP3过度表达,MYC的泛素化水平显著增加,而USP3敲低或过度表达后MYC m RNA没有显著变化。USP3显著激活了Wnt/MYC信号通路的活性,促进了Cyclin D1、c-Myc、VEGF和Survivin的m RNA表达。6)敲除MYC或添加MYC抑制剂逆转了USP3过表达诱导的胆管癌细胞增殖和侵袭性转移。,USP3的过表达可以促进细胞内葡萄糖摄取和乳酸生成,并促进细胞内糖酵解,该过程可以通过敲除MYC或添加抑制剂来逆转。类似地,观察到细胞内产生的ATP也有相同的趋势,其主要代谢相关靶基因GLUT1、HK2、PKM2和LDHA的m RNA水平在USP3过表达后IACS-010759上调,而在MYC敲除或添加抑制剂后下调。结论:USP3高表达的胆管癌患者预后较差,降低USP3表达可显著抑制肿瘤细胞的增殖能力和侵袭与迁移能力。敲除USP3基因后,胆管癌细胞的葡萄糖摄取显著降低,表明USP3促进肿瘤细胞的糖酵解,提高能量生产,上调肿瘤内代谢GLUT1、HK2、PDM2和LDHA靶基因的表达,从而促进肿瘤生长。

[目的]慢性肾病(Chronic kidney disease,CKD)、非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholic steatoheGNE-140半抑制浓度patitis,NASH)等代谢综合疾病人数呈上升态势,但是目前临床用药十分有限。凋亡信号调节激酶1(Apoptosis Signal Regulating Kin ase 1,ASK1)是MAPK信号通路中受应激因素激活的MAP3K激酶,并引发下游的炎症、凋亡等生物效应。本研究拟使用ASK1抑制剂CS17919探究其在慢性肾病和非酒精性脂肪肝中的药效作用。[方法]通过高通量筛选得到本次研究的ASK1抑制剂CS17919。体外率selleck AY-22989先完成ASK1酶学抑制活性实验后,细胞实验使用油酸(OA)和棕榈酸(PA)分别对L02进行刺激,然后添加CS17919进行共培养,CTG法检测其对细胞的保护作用,同时转录组学检测其对相关基因的调控。进—步实验将CS17919与多种细胞系共培养验证细胞毒性。体外细胞验证后,在酶学层面和体内验证CS17919的代谢稳定性,并通过药代数据确定药效模型的给药方式和剂量。体内药效部分采用3种动物模型进行验证,分别为高脂饲料结合CCL4的NASH模型、输尿管结扎肾间质纤维化(UUO)模型、STZ诱导新生小鼠糖尿病肾病(DKD)模型,通过血液生化指标、组织病理学等与临床相关的指标评价药效。[结果]体外ASK1激酶活性抑制确定其半抑制浓度(IC50)为22.24nM,且其抑制活性与进入临床阶段的ASK1抑制剂Selonsertib(GS4997)相当。L02细胞在CS17919的保护下减弱了OA、PA的刺激作用,而不同浓度(1μM、3μM、10μM)CS17919对细胞的毒副作用均低于GS-4997。RNA-seq转录组学发现CS17919对压力因素或应激因子相关RNA的表达进行了调控。后续与人肾、肝、肺胚细胞共孵肓未见明显的活性抑制现象。CYP1及CYP2酶抑制活性IC50均大于10μM,CYP3A4提示存在低风险的药物相互作用。肝微粒体和血浆稳定性确定CS17919在体内能够稳定存在。体内药代动力学研究结果表明CS17919在50-80mg/kg剂量下吸收达到饱和,且确定肝脏和肾脏中药物分布较高可作为药效的靶器官。体内药效方面,CS17919改善了肾病模型中的血液尿素氮、肌酐水平,在糖尿病介导的肾小球损伤模型中改善了肾小球的硬化指数,提高了肾脏的滤过率功能。在非酒精性脂肪肝模型中CS17919治疗降低了肝损相关的转氨酶指标,同时改善了血脂水平,组织病理Normalized phylogenetic profiling (NPP)中可看到炎症和纤维化水平得到了显著的改善。[结论]CS17919作为新型的ASK1酶学研究证实其为特异性ASK1抑制剂,在细胞学层面可以降低外部病理因素带来的细胞损伤。进—步的体内研究发现其具有良好的代谢稳定性。在3种体内模型中CS17919均表现出了积极的治疗作用,表明CS17919在慢性肾病和非酒精性脂肪肝上具有积极的治疗前景。

目的通过观察芪蛭益肾方对原发性膜性肾病高凝状态气虚血瘀证的疗效,进一步研究芪蛭益肾方对原发性膜性肾病高凝状态病变防治的安全性,对预防患者血栓栓塞的发生、提高预后水平、减少药物毒副作用及提高生命质量等有着重大作用,并提供理论依据于临床治疗及临床推广应用。方法1.选取2021年12月至2022年11月就诊于山西省中医药研究院肾病一科且符合中、西医纳入标准的90例门诊及住院部患者。选用随机对照的办法,将其分为对照Bacterial cell biology组及治疗组。2.两组予以基础治疗联合醋酸泼尼松龙片+环孢素软胶囊标准疗程治疗,嘱患者晨起口服醋酸泼尼松龙片0.5 mg/(kg·d),每日1次,进服环孢素软胶囊3mg/(kg·d),分早晚两次空腹进服。对照组选用双嘧达莫,治疗组在对照组基础上加服中药免煎剂芪蛭益肾方。观察时间均为12周。3.观察两组患者的24小时尿蛋白定量(24h UTP)、血浆白蛋白(ALB)水平、血脂水平(总胆固BI 10773醇(TCH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL))、凝血指标(活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB))、D-二聚体(DD)、血小板计数(PLT)及中医证候积分,进行统计学数据分析及安全性评价。结果1.本研究结束后,观察两组患者24h UTP、ALB、PLT、DD、凝血指标(APTT、FIB、PT)、血脂水平(TCH、TG、LDL)较治疗前均得到改善(P<0.05)且治疗组优于对照组(P<0.05),另外,治疗组中的24h UTP、TCH的下降水平显著优于对照组(P<0.01)。2.本次试验结束后,观察到治疗组及对照组的中医证候积分均有所下降(P<0.01),且治疗组在治疗后的证候积分优于对照组(P<0.05)。3.试验结束后,通过观察两组患者治疗前后的中医证候总有效率,将其进行对比,对照组为74.41%,治疗组为90.91%,治疗组明显优于对照组,具有显著统计学差异(P<0.01)。4.本次试验结束后,通过对治疗后的两组临床总有效率进行比较,对照组是72.09%,治疗组是93.18%,治疗组明显优于对照组(P<0.01)。5.本次试INCB28060细胞培养验研究结束后,对照组及治疗组患者的基本生命体征平稳,肝肾功能等安全指标未出现有明显异常,仅对照组中的2例患者在治疗初期有头晕及轻微头痛症状。结论1.芪蛭益肾方适用于治疗原发性膜性肾病高凝状态气虚血瘀证患者,不仅能够改善凝血功能,减轻激素的毒副作用,在治疗高凝状态的同时亦可降低蛋白尿,显著缓解临床症状。2.芪蛭益肾方在治疗原发性膜性肾病高凝状态气虚血瘀证患者中没有出现不良反应,说明其疗效确切,方法安全。