Author: admin

目的氢醌(HQ)是苯在体内的主要活性代谢产物之一获悉更多,常用作苯体外研究的替代物,已被证明具有细胞毒性,会促进细胞凋亡和自噬。本研究旨在探讨内质网应激(ERS)在HQ诱导的人淋巴母细胞(TK6)自噬和凋亡中的作用,以及激活转录因子6(ATF-6)是否以及如何参与ERS介导的自噬和凋亡。材料和方法在课题组前期研究的基础上,用20μM HQ处理细selleck胞24 h,建立细胞毒性模型。通过Western blot,流式细胞术,CCK-8和透射电镜等技术分析细胞ERS、自噬和凋亡情况。4-苯基丁酸(4-PBA)抑制ERS后检测细胞自噬和凋亡变化,探讨ERS与自噬和凋亡的关系。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制活性氧(ROS)后分析细胞ERS、自噬和凋亡变化,探讨ROS是否通过ERS影响细胞自噬和凋亡。通过慢病毒转染敲低ATF6和通过AA147激活ATF6后观察mTOR蛋白表达以及细胞自噬和凋亡的变化。通过雷帕霉素(Rap)抑制mTOR和通过MHY1485激活mTOR后观察细胞自噬和凋亡的变化。结果 HQ处理后细胞ERS、自噬和凋亡增加,而ATF6和PI3K-Akt-mTOR表达被抑制。抑制ENext Generation SequencingRS后,细胞自噬和凋亡减弱,ATF6和PI3K-Akt-mTOR的表达出现回升。抑制ROS的生成后,细胞ERS、自噬和凋亡减弱,ATF6和PI3K-Akt-mTOR的表达也出现回升。敲低ATF6后,mTOR表达进一步降低,细胞的自噬和凋亡程度进一步增强。激活ATF6后,mTOR表达回升,细胞的自噬和凋亡程度降低。抑制mTOR后,细胞自噬和凋亡程度进一步增加;激活mTOR后,细胞自噬和凋亡程度降低。结论通过上述实验,我们的研究证明了HQ急性染毒TK6细胞后,ROS介导的ERS抑制ATF6的表达,进而阻止mTOR通路的活化,促进细胞自噬和凋亡。尽管具体机制还需要更加深入的研究,但ATF6也可能成为治疗急性苯中毒的新的方向。

目的 观察干扰素联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的疗效及安全性。方法 选取2018年7月—2019年7月就诊于龙岩市第二医院的慢性乙型肝炎患者88例，采用随机数字表法分为联合干扰素组(n=44)和单一治疗组(n=44)。单一治疗组患者单独采用替诺福韦治疗，联合干扰素组在单一治疗组的基础上增加干扰素治疗，持续治疗72周。比较2组患者的临床疗效、HBV DNA转阴率，治疗前后HbeAg定量水平、消失率及血清转换率、肝脏硬度值、胶原代谢指标及不良反应。结果 联PLX4032合干扰素组治疗总有效率为95.45%,显著高于单一治疗组的77.27%(χ~2=6.175,P=0.012)。联合干扰素组HBV DNA转阴率为81.82%(36/44),显著高于单一治疗组的43.18%(19/44)(χ~2=14.012,P<0.001)。治疗72周后，2组患者HbeAg定量水平均降低，且联合干扰素组更低(P<0.01);2组HbeAg消失率与血清转换率均升高(P<0.01),但2组患者HbeAg消失率及血清转换率比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗72周后，2组患者肝脏硬度值降低，且联合干扰素组更低(P<0.01);2组患者胶原代谢指标均明显降低，且联合干扰素组较单一治疗组患者降低更明显(P<0.01)。单一治疗组与联合干扰素组患者不良反应总发生率比较差异无统计学意义(13.64%vs. 20.45%,χ~2=0.723,P=0.395)。结论 干扰素联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的效果显著，可提高HBV DNA转阴率，ABT-199临床试验降低HbeAg定量水平，改善肝纤维化与胶原代谢水平，且不medicinal food会增加不良反应，建议临床广泛应用。

目的：获得岗梅全长转录组数据库https://www.selleck.cn/products/INCB18424.html，为深入挖掘岗梅功能基因奠定基础。方法：采用基于PacBio Sequel平台的单分子实时测序技术获取岗梅的根、茎、叶样品的转录组数据，并利用非冗余蛋白（NR）、核苷酸序列（NT）、SwissProt蛋白序列数据库、京都基因与基因组百科全书（KEGG）、真核生物相邻类的聚簇（KOG）、蛋白家族（Pfam）、基因本体（GO）进行注释，分析selleckchem MRTX849并鉴定编码三萜皂苷生物合成的关键酶的转录本。结果：全长转录组共获得89 629个转录本，其中81 313个在公共数据库进行了注释。KEEG代谢通路富集分析表明，623个转录本参与岗梅中三萜皂苷合成相关的3条代谢通路，其中263个转录本编码了三萜皂苷生物合成途径的21个关键酶。此外，还预测了2471个转录因子、40 421个简单重复序列位点、22 119个长链非编码RNA (lncRNA)和29 131个mRNA。结论：丰富了岗Device-associated infections梅的转录组数据，并为鉴定参与三萜皂苷和其他次生代谢物生物合成的候选基因提供参考，促进其分子生物学和基因组学的研究。

目的 探讨胎盘早剥的高危因素及漏诊原因、防范措施。方法 回顾性分SCH772984析2015年1月—2021年12月收治的单胎妊娠胎盘早剥362例的临床资料，按照明确诊断时间将其分为漏诊组(187例)和确诊组(175例),比较2组相关资料，并对胎盘早剥漏诊因素进行分析。结果 本次研究Co-infection risk assessment期间，胎盘早剥发生率0.85%(362/42 632),漏诊率51.66%(187/362)。漏诊组和确诊组胎盘早剥分级构成比比较差异有统计学意义(P<0.01)。漏诊组孕妇平均年龄、阴道出血、持续性腹痛和血性羊水、超声异常、胎心监测异常发生率及剖宫产率低于确诊组，平均分娩孕周和临产率大于或高于确诊组(P<0.05,P<0.01)。漏诊组产妇子宫收缩乏力和产后出血发生率低于确诊组，新生儿1和5 min Apgar评分高于BMS-907351 IC50确诊组(P<0.01)。结论 临产及不典型子宫收缩、阴道出血为胎盘早剥漏诊的主要原因，持续胎心监测有助于早期诊断胎盘早剥。

目的：探FG-4592分子式究情绪训练联合抗抑郁药物对伴有精神病症状的重度抑郁患者自杀风险的干预效果。方法：选取茂Water microbiological analysis名市第三人民医院2019年4月至2022年12月纳入的80例伴有精神病症状的重度抑郁患者，采用随机数字表法将其分为观察组和对照组，其中对照组40例患者采用抗抑郁药物治疗和防自杀护理干预，观察组40例患者采用情绪训练联合抗抑郁药物治疗。评估两组负性情绪、自杀意念强度、实施自杀的可能性和自杀的准备程度。结果：治疗后观察组汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、自杀意念自评量表(SIOSS)和BECK自杀意念问卷中文版(BSI-CV)评分均低于对照组(P<0.05)。结论：情绪训练联合抗抑郁药物治疗伴有精神病症状的重度抑郁患者，能够有效改善患者的抑VE-822供应商郁负性情绪，降低其自杀意念强度、实施自杀的可能性和自杀的准备程度。

目的 分析超分子水杨酸联合强脉冲光治疗玫瑰痤疮的临床效果。方法 选取2020年1月至2023年1月Transjugular liver biopsy三门峡市中心医院收治的玫瑰痤疮患者86例为研究对象。按照随机数字表法分为单一组和联合组，每组43例。单一组予以强脉冲光治疗，联合组在单一组基础上联合超分子水杨酸治疗。比较两组疗效、症状积分、皮肤屏障功能(红斑面积、表皮水含量、油脂量、经皮水分流失量)、不良反应发生率及复发率。结果 联合组治疗总有效率(95.35%,41/43Pidnarulex)高于单一组(81Fer-1配制.40%,35/43),差异有统计学意义(χ~2=4.074,P=0.044<0.05)。治疗前，两组丘疹、红斑、毛细血管扩张积分比较差异未见统计学意义(P>0.05);治疗后，联合组丘疹、红斑、毛细血管扩张积分均低于单一组(P<0.05)。治疗前，两组红斑面积、表皮水含量、油脂量、经皮水分流失量比较差异未见统计学意义(P>0.05);治疗后，联合组红斑面积、油脂量、经皮水分流失量均低于单一组，表皮水含量高于单一组(P<0.05)。治疗后，联合组不良反应发生率(6.98%,3/43)与单一组(11.63%,5/43)比较，差异未见统计学意义(χ~2=0.138,P=0.710>0.05)。联合组复发率(4.65%,2/43)与单一组(9.30%,4/43)比较，差异未见统计学意义(χ~2=0.179,P=0.672>0.05)。结论 超分子水杨酸联合强脉冲光治疗玫瑰痤疮患者，效果确切，能够改善临床症状，促进皮肤屏障功能恢复，且安全性和预后效果良好。

RNA乙酰转移酶Kre33利用乙酰辅酶A作为乙酰基供体,催化多种生物体内的RNA形成N4-乙酰胞嘧啶核苷(ac4C)修饰,进而调控生物体内RNA乙酰化水平,影响其生长发育。迄今为止,灰葡萄孢(Botrytis cinerea)RNA乙酰转移酶BcKre33的功能与致病机制尚未见研究报道。本试验应用生物信息学技术,对灰葡萄孢Kre33进行了同源分析,明确了灰葡萄孢RNA乙酰转移酶Kre33的编码基因为BcKre33;利用同源重组技术,构建了灰葡萄孢BcKre33基因敲除突变体ΔBcKre33;对ΔBcKre33突变体的表型和致病力进行分析,明确灰葡萄孢BcKre33基因在其生长发育和致病过程中的功能;对ΔBcKre33突变体的胞壁降解酶活性和产酸能力进行分析,探讨BcKre33基因调控病菌致病力的机制。利用Dot Blot技术检测BcKre33调控的RNA乙酰化修饰,明确灰葡萄孢RNA乙酰转移酶BcKre33对RNA乙酰化修饰水平的影响。利用RNA-Seq对灰葡萄孢B05.10和ΔBcKre33突变体进行转录组测序,分析BcKre33基因的调控机制。研究结果为阐明灰葡萄孢BcKre33基因调控病菌ectopic hepatocellular carcinoma生长、发育和致病力的机制奠定基础。主要结果如下:1.灰葡萄孢RNA乙酰转移酶BcKre33的生物信息学鉴定。通过生物信息学的方法,对灰葡萄孢、禾谷镰孢、尖孢镰孢、稻瘟病菌、酿酒酵母、粗糙脉孢菌、黄曲霉、构巢曲霉8种真PI3K/Akt/mTOR抑制剂菌的RNA乙酰转移酶Kre33进行系统发育分析和保守结构域分析,发现真菌中RNA乙酰转移酶Kre33保守性强,同源关系近,均含有保守的TmcA-N、Helicase、GNAT、tRNA-bind结构域。确定了灰葡萄孢RNA乙酰转移酶Kre33的编码基因为BcKre33。2.灰葡萄孢BcKre33基因在病菌生长发育和致病过程中的功能研究。利用同源重组技术,构建了灰葡萄孢BcKre33基因的敲除载体;通过PEG介导的原PF-07321332纯度生质体转化,获得了BcKre33基因的敲除转化子;对转化子进行纯化和分子鉴定,获得了BcKre33基因的敲除突变体ΔBcKre33-1、ΔBcKre33-2和ΔBcKre33-3。对ΔBcKre33突变体的表型和致病力进行分析,发现ΔBcKre33突变体的生长速率减慢,不产生菌核,菌丝较细,分生孢子的量和大小明显降低,侵染垫的数量和大小降低,对番茄果实和烟草叶片的致病力减弱。表明BcKre33基因正调控灰葡萄孢的生长、发育和致病力。3.灰葡萄孢BcKre33基因调控致病力的机制分析。通过测定ΔBcKre33突变体的胞内、胞外胞壁降解酶活性、相关基因表达以及产酸能力,发现ΔBcKre33突变体胞内、胞外的果胶酶和纤维素酶活性、胞壁降解酶相关基因的表达量、产酸能力均显著降低。明确了BcKre33基因正调控灰葡萄孢的胞壁降解酶活性以及产酸能力。4.灰葡萄孢BcKre33基因在响应胁迫中的功能研究。通过测定灰葡萄孢ΔBcKre33突变体对胁迫的敏感性,发现ΔBcKre33突变体对渗透胁迫中NaCl、KCl、山梨醇以及检验细胞壁完整性的刚果红、氟康唑和SDS胁迫的敏感性显著增强,对于H2O2和甲萘醌的氧化胁迫的敏感性显著降低。表明灰葡萄孢BcKre33基因参与病菌对渗透胁迫、氧化胁迫的响应和细胞完整性的调控。5.灰葡萄孢RNA乙酰转移酶BcKre33对RNA乙酰化水平的调控功能分析。对野生型和ΔBcKre33突变体的RNA乙酰化水平进行分析,结果发现ΔBcKre33突变体中ac4C RNA乙酰化修饰水平降低。由此推测RNA乙酰转移酶BcKre33正调控ac4C RNA乙酰化修饰。6.灰葡萄孢BcKre33基因调控机制分析。利用转录组数据分析BcKre33基因调控的差异表达基因,发现ΔBcKre33突变体中共产生1991个显著上调表达的基因和2189个显著下调表达的基因,其转录水平显著下调的基因在GO分析中显示主要存在于生物过程(Biological Process)、分子功能(Molecular Function)和细胞组成(Cellular Components)中的核糖体的生物合成、细胞壁的形成、分生孢子的形成与发育、rRNA的加工、成熟和代谢以及跨膜运输过程。差异表达基因的KEGG分析发现,下调表达基因所编码的蛋白大多参与半乳糖代谢、糖酵解、精氨酸、脯氨酸和半胱氨酸的代谢以及tRNA和核糖体的合成过程。初步确定了 RNA乙酰转移酶BcKre33通过正调控这些基因的转录进而影响灰葡萄孢的生长发育和致病力。

磷脂作为细胞膜的天然成分，广泛用于构建人造细胞。天然磷脂的合成与纯化过程复杂，而化学合成的磷脂类似物在结构上与天然磷脂相似，也可用于构建人造细胞。本研究利用叠氮-炔点击反应合成了磷脂类似物bioimpedance analysis（磷脂类似物2），此磷脂类似物可https://www.selleck.cn/products/Everolimus(RAD001).html以形成囊泡，囊泡膜具有流动性，可模拟细胞膜结构。磷脂类似物囊泡具有包封性能，可包封小分子钙黄绿素和大分子罗丹明B异硫氰酸酯-葡聚糖。通过加入蜂毒素在膜上形成孔道，研究了钙黄绿素的泄露情况，模拟细胞内物质的跨膜MLN4924运输。蜂毒素浓度为1.0、2.0、3.0、4.0和5.0μg/mL时，钙黄绿素的跨膜扩散系数分别为0.33、0.46、0.70、1.37和1.91μm2/s。通过包封葡萄糖氧化酶（GOx）和辣根过氧化物酶（HRP），构建了能够模拟细胞内代谢反应的人造细胞，Amplex Red在GOx-HRP的作用下发生酶级联反应，生成试卤灵。本研究为自下而上合成人造细胞提供了新的组装基元。

肿瘤快速增长过程需要大量的营养供应,肿瘤细胞主要通过有氧糖酵解的代谢方式满足增加的能量需求。代谢过程中,肿瘤细胞将产生大量的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)以及乳酸等代谢产物。研究表明,肿瘤细胞独特的代谢方式以及代谢产物对肿瘤的发生、发展以及转移具有促进作用。因此,破坏肿瘤代谢产物平衡或直接阻断肿瘤代谢过程有望实现有效的肿瘤治疗。在本文中,我们设计并开发了四种复合纳米材料,通过破坏肿瘤细胞代谢产物ROS以及乳酸平衡或阻断肿瘤代谢原料供给实现胞内及肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)代谢平衡破环,从而实现肿瘤消融,具体研究内容如下:第一部分:为实现药物增强的细胞内ROS平衡破坏,设计并开发了一种负载索拉非尼(Sorafenib,SRF)的过此网站氧化铜(Copper peroxide,Cu O_2)纳米颗粒(Nanoparticles,NPs)。复合纳米颗粒通过与pH值无关的类芬顿反应、过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_2O_2)自供以及谷胱甘肽(Glutathione,GSH)耗竭的协同作用打破肿瘤细胞内ROS平衡,从而Dolutegravir浓度实现高效的肿瘤细胞杀伤。细胞内的GSH可以被SRF诱导的胱氨酸/谷氨酸反向转运体系统(Cystine/glutamate transporter,System xc~-)功能障碍和Cu~(2+)参与的氧化还原反应所耗尽,导致谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)失活并产生Cu~+。在抗氧化能力被破坏的情况下,Cu~+介导的类芬顿反应产生大量的羟基自由基(Hydroxyl radicals,·OH)将导致细胞凋亡和脂质过氧化物(Lipid peroxidation,LPO)累积诱导的铁死亡。此项工作证明,利用药物破坏肿瘤细胞抗氧化防御系统的策略,能有效提高细胞内ROS水平,达到高效的肿瘤细胞杀伤。第二部分:为实现光热增强的细胞内ROS平衡破坏,设计并开发了一种以硼碳(Boron-carbon,BC)纳米片(Nanosheets,NSs)为载体,搭载血红蛋白(Hemoglobin,Hb)的复合纳米片。该纳米片具有芬顿反应能力和近红外II区光响应性能。作为红细胞中的一种天然蛋白质,Hb中携带的Fe~(2+)可以诱导H_2O_2在酸性TME下发生芬顿反应产生有毒的·OH。BC NSs除了作为纳米载体递送Hb之外,还表现出优异的光热转换性能(在1064 nm激光照射下光热转化效率为47.8%)。在近红外II区光的作用下,局部升高的温度不仅能杀伤肿瘤细胞,还能加速芬顿反应增加·OH的产生,从而打破细胞内ROS平衡。体外和体内数据均显示,BC-PDA-Hb NSs可以通过协同光热治疗(Photothermal therapy,PTT)/化学动力(Chemodynamic therapy,CDT)实现有效的肿瘤消除,而对正常组织没有明显的毒副作用。此项工作证明可以通过PTT提高CDT的反应效率,从而提高细胞内ROS水平,进一步打破细胞内氧化还原平衡,实现高效的肿瘤消除。第三部分:为打破肿瘤微环境酸性产物平host response biomarkers衡,设计并开发了新型的聚丙烯酸(Polyacrylic acid,PAA)涂层、负载阿霉素(Doxorubicin,DOX)的层状双氢氧化物(Layered double hydroxides,LDH)NSs。其作为脱酸剂打破酸性代谢产物平衡,中和肿瘤微环境的乳酸,使肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)从促肿瘤的M2表型重新极化为抗肿瘤的M1表型,激活免疫系统。此外,复合纳米片降解释放出Fe~(3+)和DOX,前者可以被细胞内的GSH还原成Fe~(2+),破坏肿瘤细胞的抗氧化防御系统。后者可以直接损害肿瘤细胞,并进一步刺激H_2O_2产生。H_2O_2在Fe~(2+)介导的芬顿反应中转化为·OH,进一步打破细胞内ROS平衡。体内数据显示,经LDH-PAA@DOX NSs治疗后,可以实现肿瘤的明显消除。这项工作证明,在耗竭TME中肿瘤细胞代谢产物乳酸以及打破细胞内ROS平衡的共同作用下,能够有效逆转免疫抑制微环境,实现有效的肿瘤消除。第四部分:为阻断肿瘤代谢原料供应,直接抑制肿瘤代谢过程,设计并开发了一种围绕“纳米变形器”、“血管堵塞”以及“血管破坏”的搭载SRF的磷酸锰(Manganese diphosphate,MnPi)复合纳米颗粒。复合纳米颗粒通过完全破坏血管脉络阻断肿瘤能量获取途径以消除肿瘤。BSA-SRF-MnPi NPs显示出响应肿瘤部位过表达的H_2O_2原位变形能力,纳米颗粒的尺寸由100 nm左右变形至8μm左右,堵塞肿瘤已存在的血管。与此同时,释放的SRF能够进一步抑制新血管的生成。此纳米颗粒既能堵住已生成的血管,又能避免新血管的生成,全方位破坏了肿瘤部位的血管脉络,阻断了肿瘤的外部供给,使肿瘤“孤立无援”,最终饿死肿瘤细胞。体内数据显示,通过BSA-SRF-MnPi NPs治疗可以取得明显的疗效。这项工作证明,阻断肿瘤能量获得途径的肿瘤治疗策略,能够从根本上抑制肿瘤细胞代谢过程,从而实现有效的肿瘤消除。

目的 探讨重复经颅磁刺激(rTMS)联合抗抑郁药物治疗伴焦虑痛苦症状抑郁症患者的疗效和安全性。方法 伴焦虑痛苦症状的抑郁症患者84例，随机分为BIBW2992溶解度对照组与rTMS组，各42例。两组均予以抗抑郁药物治疗，此外，rTMS组予以rTMS治疗，对照组予以rTMS伪刺激selleckchem，两组均治疗4周。观察两组疗效和不良反应，比较两组治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分和血清脑源性神经营养因子hepatopancreaticobiliary surgery(BDNF)水平。结果 相比对照组(76.19%),rTMS组治疗总有效率(92.86%)更高(P<0.05)。治疗4周后，rTMS组HAMD评分、HAMA评分显著低于对照组(P<0.05),血清BDNF水平显著高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率无统计学差异(P>0.05),且均无严重不良反应。结论 对于伴焦虑痛苦症状抑郁症患者而言，rTMS联合抗抑郁药物治疗可提高疗效，有效缓解患者抑郁，改善焦虑症状，上调血清BDNF水平，且安全性良好。