尽管卵巢癌的治疗方法在过去几年中得到了显著的改善,但是let-7 biogenesis该疾病仍然是一个影响着女性健康的主要问题。据统计,每年全球约有22,000名女性死于卵巢癌。开发治疗卵巢癌方法的难点主要在于肿瘤固有的动态性和复杂性,缺乏可以复制体内肿瘤生理结构的体外模型。传统的二维细胞培养模型虽然操作简单,但是在模拟肿瘤微环境和准确预测患者对治疗的反应方面存在局限性。异种移植(PDX)模型能维持亲本肿瘤的生物学和病理生理学特征,但是价格昂贵、周期长的特点限制了PDX模型的广泛使用。近年来发展的基于患者来源肿瘤类器官模型(PTO)是一种体外三维模型,可以更好地模拟原始肿瘤组织的结构和功能用于药物MG132 IC50筛选,实现个性化精准医疗。肿瘤微环境(TME)中除了肿瘤上皮细胞以外,还存在肿瘤相关成纤维细胞(CAF)、免疫细胞等。CAF不仅起到重塑肿瘤细胞外基质的作用,还能分泌生长因子和细胞因子来促进肿瘤细胞的生长和转移。免疫细胞,如T细胞、自然杀伤(NK)细胞和巨噬细胞,可以调节肿瘤对治疗的反应。研究最多的PTO只包含肿瘤上皮细胞,无法反映出TME中细胞的多样性和复杂性。利用CAF、免疫细胞与肿瘤模型共培养的模型可以深入了解TME中复杂的相互作用,有助于准确地开发治疗的新方法。开发PTO共培养模型的挑战在于不同细胞共培养条件的确定以及相互作用标志物的鉴定。在此背景下,我们从患者来源的卵巢癌组织出发在体外成功建立PTO,并且将CAF、NK细胞与肿瘤细胞共培养来研究TME中的相互作用。具体内容如下:第二章,结合体外三维培养技术,将从患者来源的原代肿瘤单细胞培养成PTO并建立卵巢癌PTO生物样本库。肿瘤PTO和正常卵巢类器官对比,我们发现了它们形态上的巨大差异。活死染色为PTO的活力提供了重要的洞察,PTO活力良好,大多数细胞存活。H&E染色证实了PTO具有亲本肿瘤高度相似的组织结构与形态。免疫组织化学对肿瘤相关标志物(Ki-67、E-cadherin、PAX8、p53和ca125)染色结果表明PTO与亲本组织表达高度相似。该结果证实了PTO保留了其原始病理特征和患者之间的异质性,是可靠的体外原PI3K/Akt/mTOR抑制剂发性肿瘤模型。第三章,免疫组化对CAF生物标志物α-SMA染色用于肿瘤组织中的CAF的鉴定。利用粘附性差异进行CAF与肿瘤细胞的分离,并通过免疫荧光对α-SMA染色对CAF进行鉴定。在Transwell模型中进行肿瘤细胞与CAF的共培养,发现CAF能促进PTO的生长,并且在共培养上清液中细胞因子IL-6和TGF-β1含量显著提高。将NK细胞加入共培养环境,发现CAF能降低NK细胞介导肿瘤杀伤的有效性。本文建立的PTO为卵巢肿瘤生物学的基础研究提供了可靠的体外三维模型,为细胞免疫治疗和药物筛选提供了思路。