小鼠肠缺血再灌注时肠黏膜肥大细胞与肠道菌群的关系

目的评价小鼠肠缺血再灌注时肠黏膜肥大细胞与肠道菌群的关系。方法健康雄性C57BL/6小鼠48只,9~12周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(Sham组)、假手术+肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠组(Sham+CS组)、肠缺血再灌注组(I/R组)购买Docetaxel和肠缺血再灌注+色甘酸钠组(I/R+CS组)。采用夹闭肠系膜上动脉45 min再灌注4 h的方法制备肠缺血再灌注损伤模型。Sham+CS组和I/R+CS组于模型制备前2周腹腔注射色甘酸钠50 mg/kg,1次/d。再灌注结束后处死小鼠,取小肠组织,HE染色后光镜下观察肠黏膜病理学结果,采用Chiu评分法评估肠组织损伤程度。采用免疫组化SP染色法检测肥大细胞类胰蛋白酶的表达水平,并行肥大细胞计数。取肠内容物,采用1%琼脂糖凝胶电泳检测肠道菌群的细菌总量,并用16S rDNA测序法测定小鼠粪便中肠道细菌的多样性(Chao1指数和Shannon指数)和相对丰度。结果与Sham组比较,I/R组肠组织Chiu评分和肥大细胞计数升高,类胰蛋白酶表达上调,肠道细菌总量升高,Chao1指数和Shannon指数降低,拟杆菌门、变形菌门、拟杆菌科和肠杆菌科相对丰度增加,厚壁菌门、乳酸菌科和双歧杆菌科的相对丰度减少(P0.05或0.01),Sham+CS组上述指标差异无统计学意义(P0.05);与I/R组比较,I/R+CS组肠组织Chiu评分和肥大细胞计数降低,类胰蛋白酶表达下调,肠道细菌总量降La Selva Biological Station低,Chao1指数和Shawww.selleck.cn/products/z-ietd-fmknnon指数升高,拟杆菌门、变形菌门、拟杆菌科和肠杆菌科的相对丰度减少,厚壁菌门、乳酸菌科和双歧杆菌科的相对丰度增加(P0.05或0.01)。结论肠黏膜肥大细胞激活可导致肠道菌群失调,降低益生菌数量,增加潜在致病菌数量,从而参与小鼠肠缺血再灌注损伤的病理生理机制。