目的:研究PARP1在口腔潜在恶性疾患(Oral potential malignant disorder,OPMD)免疫微环境中的作用,并阐明其上下游调控的关键分子机制。方法:选取从中南大学湘雅医院招募的受试者20例,收集经影像学和组织病理学诊断的口腔鳞状细胞癌患者的肿瘤组织和癌旁组织标本,分为OSCC组和OPMD组。选取购于中国科学院细胞库正常口腔上皮细胞HNOEC和OSCC细胞CAL27、SCC9和SAS培养处理,用TLR9 siRNA转染CAL27和SCC9,将其分为对照(TLR9 si-NC)组和si-TLR9组。通过利用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、划痕试验、Transwell细胞侵袭试验、EdU试验测定细胞数量、评估细胞增殖率;利用Annexin VDibutyryl-cAMP说明书-FITC凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测细胞凋亡;利用流式细胞术检测细胞和组织中IFN-γ的含量、细胞中PD-L1的表达;从组织和细胞中提取RNA,利用qRT-PCR定量检测TLR9、PARP1和PD-L1的表达;提取组织细胞总蛋白,利用Western blot检测细胞中TLR9、PD-L1、PARP1、p-STAT3、STAT3的表达;利用免疫组化法监测TLR9、PARP1、PD-CL 318952使用方法L1和CD8+在临床样本或OPMD中的表达;利用IFN-γ定量ELISA试剂盒检测IFN-γ水平;利用免疫荧光检测CAL27和SCC9细胞中PARP1的表达;使用4周龄雄性小鼠进行体内试验。结果:TLR9和PD-L1在人OPMD组织和细胞中高表达,PARP1低表达。敲除TLR9显著抑制了OPMD细胞增殖、迁移和侵袭。将TLR9 siRNA转染的CAL27和SCC9细胞与人T淋巴细胞系H9共培养后,H9细胞增殖减少,细胞凋亡升高,IFN-γ水平受到抑制;然而,TLR9 siRNA逆转了这些作用。单独过表达TLR9后,PARP1水平被抑制,PD-L1和p-STAT3水平升高,OPMD细胞的生存能力、迁移能力和侵袭能力增强。单独过表达PARP1后,PARP1水平升高,Blue biotechnologyPD-L1和p-STAT3水平受到抑制,OPMD细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制。当PARP1和TLR9同时过表达时,OPMD细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,STAT3无明显变化。同时,干扰STAT3后,PD-L1的表达受到抑制。此外,体内实验进一步验证了PARP1过表达抑制TLR9对OPMD产生的影响。结论:TLR9激活通过PARP1/PD-L1信号通路诱导口腔潜在恶性疾患的免疫抑制和促进癌变的发生发展。