目的:既往有研究证实:血管紧张素II(Angiotensin II,AngⅡ)可能通过上调骨膜蛋白(Periostin,POSTN)表达抑制胆固醇逆转运(Cholesterol reverse transport,RCT)而促进动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)进程。本研究旨在探究在AngⅡ介导的Apo E~(-/-)小鼠AS模型中,Periostin对RCT的调节作用机制,并提供实验依据,为AS防治提供新的潜在靶点。方法:(1)选取6-8周龄遗传背景为C57BL/6J的Apo E~(-/-)雄性小鼠一共50只,随机分组为普通饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+AngⅡ组(HFD+AngⅡ组)、periostin沉默组(HFD+Periostin-mus-769+AngⅡ组)、periostin过表达组(HFD+Periostin-mus+AngⅡ组),每组10只,于SPF级动物房饲养12周。(2)饲养12周后,对HFD+AngⅡ组小鼠尾静脉注射生理盐水作为对照,HFD+Periostin-mus-769+AngⅡ组小鼠尾静脉注射Periostin-mus-769重组慢病毒以抑制periostin表达,HFD+Periostin-mus+AngⅡ组小鼠尾静脉注射selleck合成Periostin-mus重组慢病毒以增强periostin的表达,24-48h后,以上3组小鼠颈后皮下植入微量泵持续泵注AngⅡ,研究periostin对AngⅡ介导的Apo E~(-/-)小鼠AS病变的影响,并进一步探究periostin影响AS的作用机制;(3)尾静脉注射生理盐水或慢病毒、皮下埋入微量泵,继续饲养4周后,处死小鼠,留取血液标本冻存于-20℃冰箱中,主动脉组织送于山西医科大学第二医院病理科行病理切片及油红O染色,肝脏组织保存于液氮罐中用于下一步Western-blotting及RT-PCR使用;(4)对主动脉组织油红O染色进行观察,评估动脉粥样硬化斑块的形成及血管病变状态;(5)全自动生化分析仪检测小鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,评估血脂异常程度;(6)应用Western-blotting及RT-PCR检测各组小鼠肝脏组Smoothened Agonist分子量织中相关蛋白及m RNA表达情况。结果:1.小鼠造模结果:小鼠主动脉切片油红O染色显示,HFD组较ND组而言,主动脉内形成明显斑块,其内大量脂质形成,内膜明显增厚并突向管腔,脂质沉积程度显著大于ND组(P<0.05),AS模型造模成功。2.各组小鼠中血清血脂相关指标比较:2.1 HFD组与ND组相比,TC值、TG值、LDL-C值升高,HDL-C值降低(P<0.05),表明高脂饮食可引起Apo E~(-/-)小鼠血脂代谢紊乱。2.2 HFD+AngⅡ组与HFD组相比,TC值、TG值、LDL-C值升高,HDL-C值降低(P<0.05),表明AngⅡ可加重AS小鼠血脂代谢异常,促进AS进程。2.3 HFD+Periostin-mus-769+AngⅡ组与HFD+AngⅡ组相比,TC值、TG值、LDL-C值降低,HDL-C值升高(P<0.05),表明尾静脉注射Periostin-mus-769重组慢病毒即沉默AS小鼠体内periostin基因表达可减弱AS小鼠血脂代谢异常程度。2.4 HFD+Periostin-mus+AngⅡ组与HFD+AngⅡ组相比,TC值、TG值、LDL-C值升高,HDL-C值降低(P<0.05),表明尾静脉注射Periostin-mus重组慢病毒即过表达AS小鼠体内periostin基因表达可加重AS小鼠血脂代谢异常程度。3.各组小鼠肝脏组织中相关蛋白及m RNA表达情况比较:3.1 HFD组与ND组比较,肝脏组织RCT相关因子ABCA1、ABCG1表达减少;HFD+AngⅡ组与HFD组比较:periostin表达增多,RCT相关因子ABCA1、ABCG1表达减少,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。可见高脂饮食抑制RCT进程,皮下埋入微量泵泵入AngⅡ进一步抑制RCT进程,表明在Apo E~(-/-)小鼠中,AngⅡ可通过抑制RCT从而促进AS发生发展。3.2 HFD+Periostin-mus-769+AngⅡ组与HFD+AngⅡ组相比,periostin表达减少,TIGAR、CYP27A1表达增多,RCT相关因子ABCA1、ABCG1表达增多,RCT进程受到促进,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。表明沉默periostin,促进TIGAR、CYP27A1表达,进而促进RCT进程。3.3 HFD+Periostin-mus+AngⅡ组与HFD+AngⅡ组相比,periostin表达增多,TIGAR、CYP27AHepatic angiosarcoma1表达减少,RCT相关因子ABCA1、ABCG1表达减少,RCT进程受到抑制,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。表明过表达periostin,抑制TIGAR、CYP27A1表达,进而抑制RCT进程。结论:AngⅡ通过上调periostin的表达抑制RCT进程促进AS进展,在AngⅡ诱导的Apo E~(-/-)小鼠AS模型中,沉默periostin,上调了TIGAR、CYP27A1及RCT相关效应因子ABCA1、ABCG1表达,过表达periostin,抑制TIGAR、CYP27A1及RCT相关效应因子ABCA1、ABCG1表达,表明periostin可能通过TIGAR/CYP27A1途径调节RCT,从而影响AS的发生发展。