本试验旨在解析补饲开食料对早期断奶牦牛犊牛胸腺和脾脏部分免疫功能的调节机制。选取出生日龄和体重相近、健康的大通牦牛犊牛(公)20头,随机等分为2组,即对照组(CON组)和试验组(SS组)。CON组犊牛饲喂代乳粉和苜蓿干草,SS组犊牛在CON组的基础上补饲开食料,2组每天代乳粉饲喂量相同,CON组饲喂的苜蓿干草和SS组饲喂的苜蓿干草+开食料的干物质量相同。当牦牛LY2157299供应商犊牛固体物质的干物质采食量达到1 kg/d时,2组牦牛犊牛各屠宰5头,采取胸腺、脾脏组织进行转录组学测序与比较分析。预试期为30 d,正式试验期100 d。结果表明:1)与CON组相比,补饲开食料显著提高了早期断奶牦牛犊牛的平均日增重和干物质采食量(P<0.05),显著降低了料重比(P<0.05),改善了牦牛犊牛的生长性能。2)胸腺的转录组学测序与定量medicinal mushrooms验证表明,SS组与CON组胸腺组织对比有2 004个差异基因,其中有793个是上调基因,1 211个是下调基因;GO功能富集分析结果显示,差异表达基因(DEGs)注释到796条GO条目,其中生物过程(BP)类别414条,细胞组成(CC)类别100条,分子功能(MF)类别282条;京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析结果显示,SS组与CON组胸腺组织共富集到差异信号通路38个,补饲开食料主要通过下调磷脂酰肌醇-3-激酶和蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路和上调核因子-κB(NF-κB)信号通路增强牦牛犊牛胸腺的免疫功能。3)脾脏的转录组学测序与定量验证表明,SS组和CON组脾脏组织对比有772个差异基因,其中有389个是上调基因,383个是下调基因;GO功能富集分析结果显示,DEGs注释到582条GO条目,其中BP类别331条,CC类别201条,MF类别50条;KEGG分析结果显示,SS组与CON组脾脏组织共富集到13条差异信号通路,补饲开食料主要通过上调补体和凝血级联、抗原处理和呈递路径增强脾脏的免疫机能。4)牦牛犊牛胸腺和脾脏组织实时荧光定量PCR结果与测序结果一致,表明测序结果准确。综上所述,补饲开食料能增加早期断奶牦牛犊牛的营养摄入水平,提高NN2211体内实验剂量其生长性能;补饲开食料主要通过下调PI3K-Akt信号通路和上调NF-κB信号通路来启动免疫反应,增强胸腺的部分免疫机能;补饲开食料通过上调抗原处理和呈递、补体和凝血级联等信号通路来增强脾脏的细胞免疫,加强机体对炎症的抵御能力。
AtPK1介导的乙烯调控棉花纤维发育机制的研究
棉花是世界上重要的纤维作物,如何提高棉纤维的生产水平,是我国棉纤维生产面临的主要问题之一。发掘棉纤维调控基因、掌握基因调控机制对棉花遗传改良和指导棉花生产具有重要意义。在棉花中,乙烯是棉纤维发育过程中重要的激素调节剂。外源施加适量乙烯促进了纤维的生长,但通过改变内源乙烯来研究棉纤维发育的报道较少。拟南芥酪蛋白激酶PK1及其等位突变基因PK1~(D128N)能够分别造成拟南芥乙烯含量下降或乙烯三重反应,而影响植物体内的乙烯的含量,调控植物的生长发育。为了创制棉花内源乙烯含量发生改变的稳定遗传材料,本研究进行了以下研究并更多得出一些乙烯影响纤维发育的分子调控网络。主要研究结果如下:1.PK和PK1~(D128N)分别与GhACS-1和GhACS2在体内体外互作通过酵母筛库,以BD-PK1为诱饵,在陆地棉纤维组织c DNA库中筛选到了两个靶蛋白GhACS-1和GhACS2。克隆这两个基因的全长c DNA后,通过酵母双杂交和BEmpagliflozin溶解度iFC技术验证了PK和PK1~(D128N)分别与GhACS-1和GhACS2在体内外能够互作。2.GhACS-1和GhACS2基因正向调控纤维发育利用VIGS技术在陆地棉中沉默GhACS-1和GhACS2基因,电镜扫描观察1DPA胚珠,发现沉默后的棉花胚珠上纤维的起始要比阴性对照的慢,统计成熟纤维的长度后发现,沉默的GhACS-1或GhACS2基因的棉花纤维显著要比对照棉花上的纤维短(p-value<0.01)。表明GhACS-1或GhACS2可能正向调控纤维的生长发育。3.转PK1和PK1~(D128N)基因棉花影响纤维伸长期过程中乙烯含量的下降和积累为了研究PK1和PK1~(D128N)是否能够在棉花中异源表达影响乙烯的生物合成。使用纤维特异启动子RDL1驱动PK1和PK1~(D128N)基因,分别转入陆地棉ZM24。qRT-PCR和半定量的方法检测了这两个目的基因在各自转基因棉花中5、10、15、20和25DPA时期的表达量,发现PK1和PK1~(D128N)基因主要在5-15DPA即纤维伸长期表达。Western Blot也检测到在OE-PK1~(D128N)棉纤维中有较多的蛋白积累。检测了棉纤维5和15DPA时期ACC含量和乙烯的释放量,OE-PK1棉花中5DPA时期,ACC和乙烯含量相对于ZM24棉花减少,而OE-PK1~(D128N)棉花在5DPA时期ACC含量和乙烯都极显著高于lichen symbiosis对照ZM24棉花,在15DPA时,虽然ACC含量显著少于ZM24,但其乙烯的释放量为对照棉花ZM24乙烯释放量的4倍。4.转PK1和PK1~(D128N)基因棉花响应乙烯生物合成抑制剂和乙烯前体物质对三种棉花材料进行不同浓度的ACC和AVG处理,发现OE-PK1和ZM24棉花胚珠纤维在乙烯前体物质ACC处理下,纤维发育得到促进作用,而现OE-PK1~(D128N)棉花胚珠纤维则因为本身能产生过度的乙烯而受到ACC的抑制作用。相反,使用乙烯生物合成抑制剂AVG对转基因材料胚珠进行离体培养处理,发现OE-PK1和ZM24棉花胚珠由于自身的低乙烯释放量水平,在AVG处理下,纤维的发育更加受到抑制作用,而OE-PK1~(D128N)棉花纤维所释放的过量乙烯被AVG抑制,其乙烯释放量因此降到一个适宜的浓度,对纤维发育具有促进作用。这些结果说明,PK1和PK1~(D128N)基因确实影响了棉纤维中内源乙烯的释放量。5.RNA-Seq发掘响应乙烯变化的基因及其功能分析为了发掘内源乙烯含量下降或者上调后,棉纤维中响应乙烯变化的基因,对15DPA时期的棉纤维进行RNA-Seq。差异表达基因分析发现在乙烯含量下调后,有4319个基因差异表达,其中1621和2698个基因在OE-PK1棉花中上调和下调,GO富集分析发现这些基因与植物次生壁细胞生物合成,过氧化物酶活性以及木质部发育相关;而在OE-PK1~(D128N)中,分别有1698上调和4698个下调基因,这些基因主要富集在微管发育,驱动蛋白,鼠李糖半乳糖醛酸I侧链代谢过程,纤维素合酶,阿拉伯糖生物合成过程等通路。通过韦恩图分析,分别找到了对低(或高)浓度乙烯敏感而对高(或低)浓度乙烯不敏感的基因791(或2841)个,这些基因主要富集在“类黄酮生物合成”和“植物激素信号转导”和“苯丙素生物合成”和“果糖和甘露糖代谢”途径,也发掘到了分别有237和230个基因表达趋势与乙烯的浓度呈正相关或负相关,正相关基因主要富集纤维素合酶活性和种子毛分化的次生细胞壁生物发生,而负相关基因主要富集在“角质生物合成”、“血红素结合”和“氧化还原酶活性”等通路。
党参多糖通过LncRNA CCHE1对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响
目的 研究党参多糖(Codonopsis pilVX-445体内实验剂量osula polysaccharide, CPP)对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 采用不同浓度CPP(10、20和40μmol/L)体外处理MCF-7细胞,将CCHE1小干扰RNA(si-CCHE1)及其阴性对照(si-con)、CCHE1过表达载体(pcDNA-CCHEManagement of immune-related hepatitis1)及其阴性对照(GW-572016体外pcDNA-con)分别转染MCF-7细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白3(cleaved-Caspase-3)的表达水平,qRT-PCR检测CCHE1表达水平。结果 10、20和40μmol/L CPP处理的MCF-7细胞增殖抑制率、凋亡率和cleaved-Caspase-3表达水平呈剂量依赖性增加,CCHE1表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.01)。下调CCHE1表达后的MCF-7细胞增殖抑制率、凋亡率和cleaved-Caspase-3表达水平增加(P<0.01)。上调CCHE1表达可逆转CPP对MCF-7细胞增殖抑制率、凋亡率和cleaved-Caspase-3表达水平的影响(P<0.01)。结论 党参多糖通过下调CCHE1表达抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡。
以帽状腱膜下血肿为首发表现的慢性髓系白血病一例并文献复习
目的 提高allergen immunotherapy临床医师对以帽状腱膜下巨大血肿合并眶内血肿为首发表现的慢性髓系白血病慢性期(CMLCP)的认识水平。方法 报道1例以帽状腱膜下巨大血肿合并眶内血肿为首发表现的CML患者的诊疗情况,并以“帽状腱膜下血肿”“慢性髓系白血病”(中英文)为检索词,对PubMed、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、CNKI进行检索,对检索到的相关文献进selleck激酶抑制剂行复习。结果 该例患者为14岁男性,头颅MRI示帽状腱膜下巨大血肿合并眶内血肿,经骨髓象分析诊断为CML-CP,于超声引导下行头皮血肿穿刺抽液术并加压包扎,同时予白细胞分离单采术、羟基脲、阿糖胞苷、酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼等治疗后好转,定期随访2年Baf-A1体内实验剂量,病情稳定,生命质量尚可。检索文献后收集到2例以帽状腱膜下血肿为首发表现的CML病例,1例头颅CT检查未见异常,1例头颅CT检查提示帽状腱膜下血肿;1例行头皮血肿穿刺抽液术并加压包扎,1例行帽状腱膜下血肿切开引流术,术后情况均良好。结论 对于帽状腱膜下血肿合并眶内血肿的CML-CP患者应尽早处理血肿,同时予化学治疗、白细胞分离单采术治疗等,并应尽早给予酪氨酸激酶抑制剂治疗以助其获得良好的预后。
基于糖脂代谢基因探讨茯苓多糖干预乳腺癌细胞增殖的分子机制
目的 筛选乳腺癌中关于糖脂代谢的基因并研究茯苓多糖对其基因表达的影响。方法 选取GEO数据库中包含乳腺https://www.selleck.cn/products/elexacaftor.html癌患者及匹配癌旁组织的2个基因数据集,取差异基因交集。应用DAVID6.8数据库对交集差异表达基因进行基因本体功能分析,在生物学过程中选取糖脂代谢相关基因,构建蛋白相互作用网络。采用CCK8法筛neurology (drugs and medicines)选茯苓多糖对乳腺癌细胞MCF-7的最佳给药浓度。RT-qPCR检测对照组与经茯苓多糖处理组MCF-7细胞中糖脂代谢相关基因的表达。结果 利用GEO2R分析数据后共取到交集差异基因27个。GO功能分析显示,生物学功能主要涉及糖异生、糖代谢过程、脂质代谢过程、脂质储存、脂肪酸代谢过程,共选取到7个糖脂相关基因(PCK1、RBP4、CD36、LEP、LPL、CAV1、ACACB)。RT-qPCR结果显示7个基因在细胞内表达水平经茯苓多糖干预后较对照组均明显变化。结论 研究表明PCK1、RBP4、CD36、LEP、LPL、CAV1、ACACB这些基因是乳腺癌糖脂代谢的关键基因,茯苓多糖能干预其在乳腺癌3-MA价格细胞中的表达。
影响乳腺癌根治术后患者发生肺部感染的相关因素及其血清指标变化
目的 分Talazoparib化学结构析乳腺癌患者行根治术后发生肺部感染的危险因素,以及其血清因子的变化Bio-organic fertilizer情况,为制定针对性措施、改善患者预后提供参考。方法 回顾性分析2019年3月至2022年2月期间于成都市双流区第一人民医院·四川大学华西空港医院行乳腺癌根治术的213例患者的临床资料,并根据患者术后是否发生肺部感染分为发生肺部感染组(42例)和未发生肺部感染组(171例)。统计两组患者的临床资料,血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、C-反应蛋白(CRP)及糖蛋白抗原153(CA153)、糖蛋白抗原125(CA125)、特异性组织多肽抗原(TPS)水平,并进行单因素分析;将其中差异有统计学意义的因素行多因素Logistic回归分析,筛选乳腺癌根治术后患者发生肺部感染的危险因素。结果 单因素分析结果显示,发生肺部感染组中引流时间≥30 d、住院时间≥20 d、有吸烟史的患者占比及血清CA153、CA125、TPS、IL-17、IL-23、CRP水平均显著高于未发生肺部感染组(均P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,引流时间≥30 d、住院时间≥20 d、有吸烟史均为乳腺癌患者行根治术后发生肺部感染的危险因素(OR=3.971、2.452、2.145,均PBMS-354825半抑制浓度 <0.05)。结论 乳腺癌根治术后发生肺部感染的患者血清肿瘤标志物与炎症因子水平均异常升高,建议患者术后早期给予针对性抗感染及辅助放化疗治疗;同时,引流时间≥30 d、住院时间≥20 d、有吸烟史均为乳腺癌患者行根治术后发生肺部感染的危险因素,临床应早期识别以上因素并及时实施相关干预措施,降低患者肺部感染发生率,进而达到改善患者预后的目的。
鸡血多肽亚铁螯合物的制备工艺优化及结构表征
为了提高鸡血的产品附加值,制备易被人体消化吸收的铁补充剂,在单因素试验的基础上,采用响应面试验对鸡血多HPV infection肽和FeCl_2·4H_2O的螯合工艺进行优化,并通过紫BMN 673配制外光谱、荧光光谱、扫描电镜、红外光谱等表征分析,比较鸡3-MA试剂血多肽与FeCl_2·4H_2O螯合前后的结构变化。结果表明:最佳螯合参数为鸡血多肽与铁的质量比6.3∶1.0,螯合时间30 min, pH值5.1,在此条件下螯合率达到73.27%;紫外光谱和荧光光谱分析结果表明,螯合反应产生了区别于多肽的新型螯合物;氨基酸组成分析结果表明,鸡血多肽与亚铁螯合后,螯合物中天冬氨酸、组氨酸、谷氨酸含量显著增加;扫描电镜结果显示,鸡血多肽为表面光滑的片状结构,鸡血多肽亚铁螯合物为表面粗糙的颗粒结构;红外光谱分析结果表明,鸡血多肽中的羧基、酰胺基参与了螯合反应。
胰岛素持续泵入治疗中老年糖尿病患者的疗效及安全性分析
目的 分析中老年糖尿病患者胰岛素持续泵入治疗的疗效及安全性。方法 选择202Barasertib试剂0年5月至2021年2月本院收治的中老年糖尿病患者100例,随机分为研究组和对照组各50例,研究组采用胰岛素持续泵入,常规组采用胰岛素皮下注射,比较两组患者治疗前后的腰臀比(Waist-hip ratio, WHR)、体质量指数(Body mmicrobiota manipulationass index, BMI)、生活质量和血糖控制情况,血糖达标时间、胰岛素用量、低血糖发生率。结果 治疗后两组患者的WHR、BMI均低于治疗前(P<0.05),SF-36评分均高于治疗前(P<0.05),研究组患者的WHR、BMI均低于常规组(P<0.05),SF-36评分高于常规组(P<0.05);两组患者治疗后的FPG、2hPG、HbA1c均低于治疗前(P<0.05),研究组FPG、2hPG、HbA1c均低于常规组(P<0.05);研究组患者的血糖达标时间短于常规组(P<0.05),胰岛素用量少于常规组(P<0.05);治疗后,两组患者的低血糖发获悉更多生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 中老年糖尿病患者胰岛素持续泵入治疗较胰岛素皮下注射治疗,可获得更好的效果,且安全性有保证。
肌钙蛋白T、抗心肌抗体联合心肌酶检测在小儿暴发性心肌炎诊断中的临床意义
目的 探讨肌钙蛋白T、抗心肌抗体联合心肌酶检测在小儿暴发性心肌炎诊断中的临床意义。方法 回顾性分析本院2019年1月至2021年10月于本院就诊的92例心肌炎患儿的临床资料,其中暴发性心肌炎43例,非暴发性心肌炎49例,另选取同期健康体检患儿40例作为对照组。对比3组受试儿童血清肌钙蛋白T(troponin T,cTnT)、抗心肌抗体(anti-myocardial antibody, AHA)、及心肌酶[肌酸激酶(creselleckatine kinase, CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme, CK-MB)、a-羟丁酸脱氢酶(A-hydroxybutyrate dehydrogenase, a-HBD)]水平。应用受试者工作曲线(receiver operating curve, ROC)分析上述血清指标对小儿暴发性心肌炎的诊断价值。结果 同对照组对比,暴发性心肌炎与非暴发性心肌炎患者的血清cTnT、心肌酶表达水平及AHA阳性检出率均更高;与非寻找更多暴发性心肌炎患者对比,暴发性心肌炎患者上述血清指标水平及AHA阳性检出率均更高(P<0.05)。血清cTnT、AHA、心肌酶联合对暴发性心肌炎诊断的灵敏度、特异性、曲线下面积(AUC)分别为97.37%、83.67%、0.899。联合诊断的灵敏度高于单独预测(χ~2=10.965,P=0.001;χ~2=7.242,P=0.007;χ~2=9.685,P=0.002),特异性与单独预测对比差异均无统计学意义(χ~2=0.333,P=0.564;χ~2=0.000,P=Immunochemicals1.000;χ~2=0.079,P=0.779),AUC高于单独预测(Z=2.215,P=0.027;Z=1.908,P=0.047;Z=2.293,P=0.022)。结论 血清cTnT、AHA及心肌酶在小儿暴发性心肌炎患者中血清水平升高,上述指标均对暴发性心肌炎有一定诊断价值,且联合诊断价值更高。
激活mTORC2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺模型小鼠多巴胺能神经元和行为学的影响
目的 探讨激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2Digital PCR Systems)/Akt信号通路对6-羟基多巴胺(6-OHDA)模型小鼠多巴胺能神经元和行为学的影响及可能的机制。方法 将36只体重20~25 g 3月龄Nestin-CreER~(TM)::MK-2206半抑制浓度ROSA26-LacZ雄性C57BL/6J小鼠分为NS+玉米油组、6-OHDA+玉米油组、6-OHDA+PP242组、6-OHDA+A-443654组,并在小鼠右侧纹状体注射6-OHDA制备帕金森病(PD)小鼠模型以及每日腹腔注射mTORC2/Akt信号通路激动剂A-443654或抑制剂PP242。通过ELISA测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1βselleck NVP-TNKS656)的水平;免疫组织化学和免疫荧光染色考察黑质(SN)-纹状体小胶质细胞、脑室周围神经前体细胞(NPCs)和多巴胺能神经元数目,Western blotting检测中脑水管mTORC2/Akt信号通路各相关蛋白Rictor, p-Akt和DNA损伤反应调节1(REDD1)的表达并通过免疫共沉淀验证它们之间的相互作用,最后观察各组小鼠行为学的变化。结果 6-OHDA模型小鼠伴随小胶质细胞的激活和炎症因子的增加,黑质多巴胺能阳性神经元数目明显下降,小鼠的运动功能发生障碍,但NPCs数目较对照组小鼠明显增加,mTORC2/Akt信号通路相关蛋白表达也明显上调,在激动剂A-443654处理后随着相关蛋白的表达进一步上调,上述各指标均有明显改善,而抑制剂PP242处理组则呈现与激动剂A-443654完全相反的情况。结论 A-443654通过上调mTORC2/Akt信号通路关键蛋白促进NPCs的增殖,增加新生多巴胺能神经元的数目并减少小胶质细胞的激活和炎症反应最终导致PD模型小鼠黑质-纹状体多巴胺能神经元和小鼠行为学的改善。