目的探讨干细胞因子(SCF)/c-GDC-0068化学结构KIT系统对Bx PC-3胰腺癌细胞侵袭能力的影响以及低氧诱导因子1α(HIF-1α)的作用。方法分别在正常氧分压条件下加入SCF以及低氧环境培Biogenic resource养Bx PC-3细胞,使用实时定量PCR和Western blPUN30119临床试验ot法检测HIF-1αmRNA和蛋白水平的变化;设计并合成HIF-1α特异性的小干涉RNA(si HIF-1α),转染Bx PC-3细胞,实时定量PCR和Western blot法分别检测SCF和下调HIF-1α水平后对基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9和尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)表达的影响,TranswellTM检测SCF和下调HIF-1α水平后对Bx PC-3细胞侵袭能力的影响。结果 SCF和低氧刺激均可以上调HIF-1α的蛋白表达;si HIF-1α可以高效、特异性抑制Bx PC-3细胞中HIF-1α的蛋白表达;SCF能够促进MMP2、MMP9和u PA的表达,而敲低HIF-1α后下调上述基因的表达;SCF作用后Bx PC-3细胞的侵袭能力增强,而敲低HIF-1α后促进Bx PC-3细胞的侵袭。结论 SCF/c-KIT系统可以通过HIF-1α上调MMP2、MMP9和u PA的表达,从而增强Bx PC-3细胞的侵袭能力,而敲低HIF-1α可抑制其作用。
BC047440通过ERK1/2-β-catenin信号通路调控肝癌干细胞分化的分子机制研究
目的:探讨BC047440与ERK1/2-β-catenin信号通路之间的关系及其对肝癌干细胞(liver cancer stem cells, LCSCs)分化的调控作用。方法:shRNA慢病毒技术抑制LCSCs中BC047440的表达,实验用LCSCs分为BC0474selleck GDC-097340抑制组(sLCSCs),空白组(LCSCs)。在指定时间点,利用ELISA分别检测两组细胞ALB和AFP表达变化,肝细胞合成代谢功能采用糖原染色实验和吲哚菁绿摄取实验检测,电镜检测两组细胞超微结构形态学变化,各组细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、β-catenin蛋白表达情况采用Western blot检测。通过激酶特异抑制剂PD98059抑制sLCSCs中ERK1/2的活性后,观察β-catenin、ALB和AFP表达变化。结果:shRNA慢病毒处理可以抑制LCSCs中BC047440SB203580试剂表达,同时抑制BC047440表达后,LCSCs向成熟细胞分化导致干细胞特性减弱。进一步分medium Mn steel子机制的研究证实,shRNA抑制BC0474407后,p-ERK1/2表达上升、β-catenin表达下降,进一步抑制sLCSCs中ERK1/2的活性后,可上调β-catenin表达,部分恢复LCSCs干细胞特性。结论:BC047440可参与调控LCSCs分化,该分化过程可能通过ERK1/2-β-catenin信号通路实现。
运动调控FGF21表达改善脂代谢紊乱的研究进展
脂代谢紊乱是导致慢性代selleckchem 3-MA谢疾病发生的主要原因之一。运动作为最经济有效的物理疗法,可通过调节成纤维细胞生长因子21 (fibroblast growth factor 21, FGF21)的表达发挥改善脂代谢紊乱的作用。现有研究表明,脂代谢紊乱会造成机体FGF21表达异常,其血清循环水平显著增加但靶组织受体表达降低,导致FGF21抵抗。运动调控FGF21的表达,并通过逆转FGF21-AND轴功能障碍,上调PI3K/Akt信号通路表达改善胰岛素抵抗;抑制TNsurgical pathologyF-α、MCP-1、IL-1β等炎症因子表达,下调核因子κB蛋白信号通路表达减轻炎症反应;提高线粒体柠檬酸合成酶活性,上调AMPK信号通路及PGC-1α表达增加能量消耗;介导脂质重塑并调控WAT”褐变”,上调AMPK/ULK1信号通路表达增加脂解等改善脂质代谢紊乱。运动量的累积是造成FGF21表达发生适应性改变的关键因素,selleck NMR大强度(80%~85%VO2max)的急性运动刺激或长周期(≥12周)的运动干预可有效地促进FGF21的表达。该文以脂代谢紊乱与FGF21的关系为切入点,对运动调控FGF21改善脂代谢紊乱的生物学机制进行分析,并梳理不同运动调控FGF21表达的差异,旨在为FGF21介导下改善脂代谢紊乱的运动干预方案提供指导意见。
散养和圈养撒坝猪粪菌移植对小鼠生长性能、养分表观消化率和肠道形态结构的影响
本试验旨在探究散养和圈养撒坝猪粪菌移植(FMT)对昆明小鼠生长性能、养分表观消化率、脂代谢以及肠道形态结构的影响。试验选取健康成年散养和圈养撒坝猪各10头作为FMT供体,制备粪菌液;然后选取30只健康雄性昆明小鼠作为FMT受体,随机分为5个组,每组6只。5组小鼠分别灌胃生理盐水(CON组)、散养撒坝猪低剂量FMT菌液(SY-L组)、散养撒坝猪中剂量FMT菌液(SY-M组)、散养撒坝猪高剂量FMT菌液(SY-H组)和圈养撒坝猪中剂量FMT更多菌液(JY-M组),连续灌胃14 d。试验期28 d。结果表明:1)与CON组相比,各FMT组平均日增重(ADG)提高、料重比(F/G)降低,其中SY-M组差异显著(P<0.05);与JY-M组相比,SY-M组ADG显著提高(P<0.05),F/G显著降低(P<0.05)。2)与CON组相比,各FMT散养组粗蛋白质和粗脂肪表观消化率显著提高(P<0.05);与JY-M组相比,SY-M组粗蛋白质表观消化率提高了10.32%(P<0.05)。3)与CON组相比,各FMT组血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量降低,其中SY-M组差异显著(P<0.05);SY-M组与JY-M组上述指标之间差异不显著(P>0.05)。4)与CON组相比,各FMT组回肠绒毛高度/隐窝深度值提高,其中SY-M组差异显著(P<CP-456773供应商0.05);SY-M组与JY-M组回肠绒毛高度/隐窝深度值之间差异不显著(P>0.05)。综上所述,散养和圈养撒坝猪粪菌液移植可adoptive cancer immunotherapy促进小鼠肠黏膜发育,提高养分表观消化率,增强脂代谢能力,降低F/G,从而提高生长性能;其中,散养撒坝猪中剂量粪菌液移植效果较优。
非增殖期与增殖期糖尿病视网膜病变患者睑板腺功能比较研究
目的psychopathological assessment 比较非增殖期糖尿病视网膜病变(NPDR)与增殖期糖尿病视网膜病变(PDR)患者的基础泪液分泌(Schirmer)试验、泪膜破裂时间(BUT)、睑板腺形态及缺失情况。方法 选取自2018年3月至2022年3月于衡水市人民医院眼科就诊的100例2型糖尿病视网膜病变患者为研购买BAY 73-4506究对象。按视网膜病selleck NMR变不同程度将患者分为NPDR组(n=55)与PDR组(n=45)。比较两组患者的眼表疾病指数评分、Schirmer试验结果、BUT、睑缘与睑板腺开口状态及缺失情况。结果 NPDR组患者眼表疾病指数评分、睑缘及睑板腺评分低于PDR组,Schirmer试验结果、BUT高于PDR组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者睑板腺缺失情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 与PDR患者比较,NPDR患者干眼症状较轻,Schirmer试验结果较高,BUT较长,睑缘和睑板腺形态较好。
基于ctDNA的分子残留病灶检测对非小细胞肺癌根治术后生存的预测效能
目的 探讨基于循环肿瘤DNA(ctDNA)的分子残留病灶(MRD)检测对非小细胞肺癌(NSCLC)患者根治术后近远期生存的预测效能。方法 选取重庆医科大学附属第一医院胸外科行根治术治疗的114例NSCLC患者为研究对象,于术后1周采集患者静脉血,采用液态活检和二代测序技术检测ctDNA MRD。统计患者术后MRD阳性率,并分析其与临床病理特征的关系。记录患者术后1年、5年生存情况,采用Kaplan-Meier生存曲线比较MRD阳性和阴性患者的近远期生存率,采用Cox回归模型分析NSCLC根治术后近远期生存的影响因素,分析MRD检测对NSbacteriophage geneticsCLC根治术后近远期生存的预测效能。结果 NSCLC患者术后MRD阳性率为36.84%,低/未分化、肿瘤直径>3 cm、纵隔淋巴结转移、TNM分期ⅢA期的NSCLC患者MRD阳性率分别高于高/中分化、肿瘤直径≤3 cm、无纵隔淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。NSCLC患者术后1ABT-199体内实验剂量年、5年生存率分别为83.33%、52.63%,MRD阳性患者近远期生存率均低于MRD阴性患者(P<0.001)。低/未分化、肿瘤直径>3 cm、TNM分期ⅢA期、术后MRD阳性均是影响NSCLC根治术后患者近远期生存的危险因素(P<0.05),而纵隔淋巴结转移是影响NSCLC根治术后患者远期生存的危险因素(P<0.05)。术后MRD预测NSCLC患者根治术后近期生存的灵敏度、特异度、准确度分别为73.68%、89.47%、76.32%,www.selleck.cn/products/Etopophos预测远期生存的灵敏度、特异度、准确度分别为95.00%、72.22%、84.21%。结论 NSCLC患者MRD阳性率与肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤大小等有关,是影响NSCLC根治术后近远期生存的危险因素,且对近远期生存预测具有重要价值。
老年白血病病人Survivin基因mRNA表达及其与预后的关系研究
目的:分析并评价老年白血病病人Survstarch biopolymerivin基因表达及其与预后的相关性。方法:对我院自2010年12月至2013年6月收治的38例各时期急性白血病病人、7例慢性淋巴细胞白血病病人的白血病细胞的Survivin基因表达水平进行分析,同时以14例健康体检者作为对照组。结果:ALL组与ANLL组病人Survivin基因阳性表达率均显著高于对照组阳性表达率,差异有统计学意义(χ2=5.87、6.79,P<0.05),但ALL组与https://www.selleck.cn/products/sbe-b-cd.htmlANLL组相比差异无统计学意义(P>0.05)。ALL组及ANLL组Survivin/β-actin半定量结果均显著高于对照组(F=7.76,q=4.59、5.53、P均<0.05),差异均有统计学意义。但在慢性淋巴细胞白血病病人的白血病细胞中未检测到Survivin基因表达。初治组与复发组白血病细胞Survivin基因阳性表达率均显著高于对照组(χ2=12.58、10.19,P<0.05);白细胞selleckchem BMS-907351计数正常组Survivin基因表达阳性率为44.44%(4/9),显著低于白细胞计数异常组Survivin基因表达阳性率86.21%(25/29),两组相比差异有统计学意义(χ2=10.07,P<0.05)。结论:老年急性白血病的发病与进展同Survivin基因mRNA的高水平表达具有密切的相关性。
肺部罕见肿瘤的研究进展
肺癌的全球死亡率在所有恶性肿瘤中居首位,2016年我国癌症发病情况报道,肺癌发病人数82.8万,死亡人数6寻找更多5.7万。目前对肺部罕见肿瘤的认识和研究仍存在局限性。基于分子标志物的诊断标准,越来越多常见肿瘤的亚型被归类为“罕见”,这依赖于更加精确的基因检测。二代测序是发现罕见肿瘤基因靶点的有效手段,全基因组图谱能够在特定肿瘤类型的背景下检测到罕见突变基因或非典型变异,为新的治疗策略提供信息,selleck化学并改善罕见肿瘤患者的预后。患者衍生的肿瘤模型是肿瘤研究的关键工具,用于研究基因功能,筛选新药物的抗肿瘤作用,以及验证癌症生物学和治疗方法,这对于罕见肿瘤尤为重要。鉴于越来越多的药物针对肿瘤特异性背景下的基因组改变,临床试验的探索有助于拓宽基因组驱动肿瘤学应用的populational genetics潜力。本文对肺部罕见肿瘤的分子检测、临床试验、模型研究以及治疗应用方面的进展展开综述。
基质金属蛋白酶-9和骨桥蛋白在甲状腺癌和腺瘤组织中的表达及其临床意义
目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和骨桥蛋白(OPN)在甲状腺癌及腺瘤组织中的表达和临床意义。方法应用免疫组织化学法检测MMP-9和OPN在85例甲状腺癌组织、26例甲状腺瘤和15例正常甲状腺组织中的表达水平。结果 MMP-9在正常甲状腺、甲状腺瘤和甲状腺癌组织中的表达率分别为20.00%(3/15)、53.85%(14/26)和84.71%(72/85),两两比较差异有统计学意义(P<0.05),MMP-9表达水平与甲状腺癌美国肿瘤联合委员会(AJCC)分期、组织分化、颈部淋巴结转移、包膜浸润明显相关(P<0.0selleck抑制剂5);LY-188011配制OPN在正常甲状腺、甲状腺瘤和甲状腺癌组织中的表达率分别为13.33%(2/15)、46.15%(12/26)和74.12%(63/85),两两比较差异有统计学意义(P<0.05),Ospeech-language pathologistPN表达水平与甲状腺癌AJCC分期、颈部淋巴结转移、包膜浸润明显相关(P<0.05)。结论检测MMP-9和OPN有助于判断甲状腺癌浸润转移潜能。
靶向间皮素的CAR-T细胞构建及其对人胰腺癌细胞杀伤作用研究
目的通过构建靶向间皮素(mesothelin,MSLN)的CAR-T细胞,在体外验证其靶向杀伤PANC-1和Aspc-1胰腺癌细胞的能力以及猪苓多糖(PPS)、人参多糖(GPS)、黄芪多糖(APS)、香菇多糖(LNT)和灵芝多糖(GLP)等调节免疫药物对CAR-T细胞增殖及其杀伤肿瘤效应的影响。另外建立NOG高度免疫缺陷小鼠Aspc-1细胞移植瘤模型,观察靶向间皮素的CAR-T细胞在体内抑制Aspc-1细胞移植瘤的有效性,为后期深入研究提供依据。方法1.将含MSLN抗体scFv片段的CAR序列插入慢病毒质粒中,包被慢病毒。用酶切质粒电泳,检测目的基因正确性;利用倍比稀释后的慢病毒感染HEK293T细胞,然后利用细胞阳性率计算病毒滴度;按MOI值=100添加相应慢病毒体积,通过慢病毒感染的方式制备meso-CAR-T细胞(感染体系:2×105/mLT细胞、病毒、促感染试剂trans P);通过流式细胞术检测meso-CAR-T细胞的阳性率并进行分选;然后通过qPCR、Western blot先后验证分选后T细胞中CAR序列的表达,流式细胞术检测meso-CAR-T细胞的阳性率。2.通过qPCR、Western blot验证胰腺癌Aspc-1细胞和PANC-1细胞中表面抗原MSLN(rMSLN)的阳性表达,并用qPCR检测胰腺癌MIA细胞中rMSLN蛋白的相对表达;利用MIA和PANC-1细胞提供MSLN抗原刺激meso-CAR-T细胞,采用CCK-8法评估其扩增速度;然后采用LDH释放法、实时无标记细胞(RTCA)分析法和萤火虫荧光素酶法分别检测meso-CAR-T细胞、普通jurkat细胞对两种胰腺癌细胞的杀伤作用;采用CCK8、RTCA检测猪苓多糖(PPS)、人参多糖(GPS)、黄芪多糖(APS)、香菇多糖(LNT)和灵芝多糖(GLP)对CAR-T细胞杀伤胰腺癌Aspc-1细胞效率的影响。3.将Aspc-1胰腺癌细胞按5×106/只的数量腹侧皮下注射到NOG高度免疫缺陷小鼠体内,小鼠成瘤后分别给予meso-CAR-T细胞、普通jurkat细胞和PBS三种治疗。通过肿瘤体积、重量测量评估meso-CAR-T细胞于体内对胰腺癌的抑制作用。然后剥离瘤体,通过免疫组化的方式检验T细胞对肿瘤的浸润;通过qPCR法检测小鼠眼球血中CAR-T细胞生存增殖情况。结果1.成功合成三代MSLN-CAR慢病毒重组质粒,经酶切后监测电泳条带,结果提示条带位置符合理论值;基因测序结果符合原设计序列,并成功包装慢病毒;qPCR、Western blot结果显示:CAR分子存在于慢病毒感染后的jurkat细胞中,meso-CAR-T细胞构建成功;流式细胞术测得分选后meso-CAR-T细胞阳性率可达55.8%。2.经Western blot验证胰腺癌Aspc-1细胞和PANC-1细胞表面MSLN抗原(rMSLN)蛋白均有表达,且Aspc-1细胞表面rMSLN蛋白表达量明显高于PANC-1细胞(p<0.05);qPCR检验结果显示MIA、PANC-1、Aspc-1细胞表面均有rMSLN蛋白表达,但MIA细胞表面目的蛋白相对表达量较低,而PANC-1、Aspc-1细胞表面rMSLN蛋白表达相对量较高,尤其是Aspc-1细胞表面目的蛋白的相对表达量是MIA细胞的70倍;CCK-8检测CAR-T细胞增殖结果提示,在靶抗原表达量较多的PANC-1细胞的刺激下D-Lin-MC3-DMA半抑制浓度meso-CAR-T细胞的增殖数量较MIA细胞组上升更快(p<0.05);LDH细胞毒性、RTCA以及萤火虫荧光素酶等Flow Cytometry体外实验检测均显示,meso-CAR-T细胞的抗肿瘤作用随效靶比的提高而增强。当效靶比为8:1时,meso-CAR-T细胞对PANC-1、Aspc-1两种胰腺癌细胞杀伤效率最高,杀伤率分别达到40.72%和23.15%,meso-CAR-T细胞对rMSLN蛋白高表达的Aspc-1细胞杀伤率明显高于蛋白低表达的PANC-1细胞;CCK8法测试结果显示,与对照组相比0.156mg/ml的GLP和0.625mg/ml的LNT对CAR-T细胞增殖有一定的促进作用;但是RTCA仪器检测结果显示,在效靶比4:1的情况下0.156mg/ml的GLP和0.625mg/ml的LNT对CAR-T细胞杀伤Aspc-1肿瘤细胞几乎没有影响。3.在体内实验中,与对照组相比,注射meso-CAR-T细胞的实验组小鼠皮下肿瘤组织并未受到抑制,剥离的三组小鼠肿瘤组织块在体积、重量方面没有显著差别(p>0.05);小鼠眼球取血经qPCR检测结果提示,三组小鼠全血内CAR-T基因扩增曲线呈水平趋势,小鼠全血内没有检测到CAR-T细胞;各组肿瘤组织靶向CD3阳性免疫组化结果显示,实验组T细胞阳性表达低于空白组和对照组。结论通过慢病毒转染,成功构建了能稳定表达三代CAR序列的meso-CAR-T细胞。在体外实验中,与普通jurkat细胞组相比,meso-CAR-T细胞能有效杀伤rMSLN阳性的PANC-1、Aspc-1两种胰腺癌细胞,杀伤效率与效靶比呈正相关,且癌细胞表面rMSLN阳性蛋白表达量越高的细胞杀伤效率越高。另外0.156mg/ml的GLP和0.625mgCrizotinib/ml的LNT对CAR-T细胞增殖有一定的刺激作用,虽然对CAR-T细胞杀伤Aspc-1肿瘤细胞几乎没有影响,但是在临床应用中可用来调节患者机体增强免疫力。体内实验表明以jurkat细胞为载体构建的meso-CAR-T细胞对Aspc-1皮下移植瘤的生长无抑制作用,且小鼠全血经qPCR检测、肿瘤组织免疫组化染色都表明CAR-T细胞被小鼠自身代谢,无法抑制肿瘤增殖。