目的:探讨血清中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)、血小板淋巴细胞比值(PLR)及血浆胞裂蛋白9(SEPT9)在结直肠癌(CRC)诊断、治疗和预后中的价值。方法:将158例CRC患者作为CRC组,另选取同期fetal immunity体检健康者187名作为对照组,比较2组血清NLR、PLR水平及SEPT9表达,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估NLR、PLR及SEPT9对结直确认细节肠癌的诊断效能,同时比较治疗后CRC组不同疗效患者的血清NLR、PLR水平及SEPT9表达。结果:CRC组NLR、PLR水平及SEPT9表达均明显高于对照组(P<0.05)。血清NLR、PLR水平及SEPT9三者对CRC患者的AUC分别为0.728、0.696和0.505,联合检测的AUC为0.781,灵敏度分别为69.0%、74.7%和53.2%,特异度分别为80.7%、69.0%和82.9%,三者联合检测的灵敏度和特异度分别为76.5%和84.3%,均高于单独检测。CRC治疗后无效患者的NLR、PLR水平及SEPT9阳性率均明显高于治疗总有效者(P<0.05)。结论:血清NLR、diABZI STING agonist使用方法PLR及SEPT9对结直肠癌有较高的诊断效能,联合诊断效能最高,且对预后评估也有一定的指导作用,检测血清NLR、PLR及SEPT9表达,可作为结直肠癌的诊断、治疗和预后的重要辅助指标。
复方蒲蠊提取物对溃疡性结肠炎大鼠菌群的干预作用
为了研究复方蒲蠊提取物(PL1、PL2)对溃疡性结肠炎bioorthogonal reactions(UC)大鼠肠道菌群的影响,本试验采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)联合醋酸建立UC模型,正常对照组和模型组分别灌肠给予生理盐水,阳性对照组灌肠给予康复新液,PL1低、中、高剂量组和PL2Navitoclax采购低、中、高剂量组分别灌肠给予不同浓度的PL1和PL2。采用疾病活动指数(DAI)、病理MCC950研究购买组织学评分(HS)和结肠黏膜损伤指数(CMDI)来评估康复新液、PL1和PL2对UC的治疗作用;收集结肠粪便,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测各组大鼠粪便样本中主要菌种数量的变化。结果显示,与模型组相比,给予康复新液、PL1和PL2能够降低大鼠的DAI(P<0.01)、CMDI(P>0.05)、结肠指数(P<0.05或P<0.01)和HS总评分(P<0.05或P<0.01),显著增加结肠长度(P<0.05或P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与正常对照组相比,模型组双歧杆菌和乳杆菌极显著减少(P<0.01),大肠埃希菌、肠球菌、拟杆菌和硫酸盐还原菌极显著增多(P<0.01);与模型组相比,给予康复新液、PL1和PL2后大鼠粪便样品中双歧杆菌和乳杆菌极显著增多(P<0.01),大肠埃希菌、拟杆菌、肠球菌和硫酸盐还原菌显著减少(P<0.05或P<0.01)。结果表明,复方蒲蠊提取物对UC大鼠有一定的治疗作用,可能与调节UC大鼠肠道菌群的组成,维持有益菌和致病菌的平衡有关。
血清SAA、PCT及IL-1β联合检测在白内障术后眼内炎临床诊断中的应用
目的 分析血清淀粉样蛋白A(SAA)、降钙素原(PCT)及白介素-1β(IL-1β)联合检测在白内障术后临床诊断中的应用效果。方法 选择2020年5月至2023年1月于枣阳市第一人民医院行手LY294002术治疗的白内障患者152例,另选取同期于本院行体检的健康人群136名为对照组。比较两组血清SAA、PCT及IL-1β水平;观察组根据术后感染情况分未感染组及未感染组,比较两组一般资料及血清SAA、PCT及IL-1β水平。采用二元Logistic回归分析影响白内障术后眼内炎感染的危险因素。比较SAA、PCT及IL-1β三指标单独检测和联合检测对眼内炎的检测阳性率。采用Pearson相关性分析血清SAA、PCT及IL-1β之间的关系。结果 观察组血清SAA、PCT及IL-1β水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组30例,未感染组122例。两组性别、年龄、既往疾病史、饮酒史、手术时长比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组吸烟史、术中出血量、玻璃体溢出、血清SAA、PCT及IL-1β水平Transmembrane Transporters抑制剂比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经二元Logistic回归分析可知,有吸烟史、术中出血量高、有玻璃体溢出、血清SAA、PCT及IL-1β水平异常均是影响白内障术后眼内炎感染的危险因素(P<0.05)。SAA、PCT及IL-1β单一检测阳性率分别为78.28%、71.05%及69.73%,三者联合检测阳性率为92.76%(P<0.05)。术后3d血清SAA、PCT分别与IL-1β水平均呈正相关(r=0.743、0.682,P<0.05),血清SAA水平与PCT水平呈正相关(r=0.638,P<0.05)。结论 白内障术后眼内炎中血清SAA、PCTFluorescence Polarization及IL-1β水平显著上升,三指标是影响白内障术后眼内炎感染的主要危险因素,三指标联合检测在白内障术后眼内炎临床诊断价值高,可为临床后续治疗及预后风险提供参考依据。
母乳喂养在早产儿坏死性小肠结肠炎中的预防作用
目的 分析母乳喂养在早产儿坏死性小肠结肠炎预防中预防作用分析。方法 2016年1月—2021年10月期间选取扬州大学医学院附属连云港市妇幼保健院坏死性小肠结肠炎早产儿62例,依照喂养方式不同分为对照组与观察组,各31例。对照组实施配方奶喂养,观察组实施母乳喂养,对比两组早产儿干预前、干预1个月后生长发育情况、肠道菌群情况,干预2、3、4周坏死性小肠结肠炎发生率。结果干预前,对照组与观察组早产儿体质量(1.74±0.32)kg vs(1.78±0.30)kg、身长(40.21±3.12)cm vs(41.01±2.98)cm、头围(26.89±2.12)cm vs(27.01±2.14)cm等生长发育情况对比,差异无统计学意义(t=0.508、1.032、0.222,P>0.05);干预1个月后,观察组体质量(3.22±0.30)kg、身长(56.99±3.10)cm、头围(38.78±2.80)cm优于对照组(2.35±0.26)kg、(50.43±3.02)cm、(34.67±2.78)cm,差异有统计学意义(t=12.202、8.439、5.800,P<0.05)。干预前,对照组与观察组细菌总数(103.00±13.00)×10~3/L vs(103.00±14.00)×10~3/L、杆菌总数(91.00±9.00)×10~3/L vs(90.00±10.00)×10~3/L、球菌总数(12.00±2.00)×10~3/L vs(12.00±3.00)×10~3/L对比,差异无统计学意义(t=0.000、0.414、0.000,P>0.05);干预1个月后,观察组肠道菌群情况[(253.00±11.00)×10~3/L、(237.00±12.00)×10~3/L、(16.SAG体内00±1.00)×10~3/L]均优于对照组[(192.00±10.00)×10~3/L、(177.00±11Th1 immune response.00)×10~3/L、(14.00±1.00)×10~3/L],差异有统计学意义(t=22.846、20.522、7.874,P<0.05)。干预2、3、4周后,观察组坏死性小肠结肠炎发生率(6.45MDV3100%、3.23%、0.00%)明显低于对照组(32.26%、29.03%、25.81%),差异有统计学意义(χ~2=6.613、7.630、7.032,P<0.05)。结论 对早产儿采用母乳喂养,可有效预防/降低坏死性小肠结肠炎发生风险,改善患儿生长发育情况与肠道菌群。
基于ceRNA调节网络结直肠癌预后关键基因的筛选与分析
目的 本研究利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分别构建结肠癌和直肠癌的lncRNA-Medicare Health Outcomes SurveymiRNA-mRNA的ceRNA调控网络,寻找网络中与患者总体生存率相关的基因,为结直肠癌提供新型预后分子标志物。方法 在TCGA数据库分别下载结肠癌和直肠癌的原始转录组测序数据和临床数据,利用R 4.0.4软件的edgeR程序包进行差异基因的分析。根据差异基因靶向调控关系,构建lncRNA-miRNA-mRNA调节网络。利用Cytoscape 3.7.1软件绘制网络调节图。结合患者的临床资料,利用Survival程序包寻找调控网络中与患者总体生存率相关的基因。结果 在结肠癌的ceRNA网络中,共涉及29个miRNA、128个lncRNA和53个mRNA,有9个lncRNA(AC002511.1、AL590483.1、AP004609.1、GAS6-AS1、HOTAIR、ITCH-IT1、KCNQ1OT1、LINC00491、PVT1),4个mRNA(FJX1、SERPINE1、TPM2、ULBP2),4个miRNA(miR-145、miR-193b、miR-216a、miR-375)与患者预后相关(P<0.05)。而在直肠癌的ceRNA网络中,共包括19个miRNA、23个lncRNA以及66个m RNA。只有1个mRNA(SALL4)和1个miRNA(miR-107)D-Lin-MC3-DMA IC50与患者预后相selleck合成关(P<0.05)。结论 成功构建了结肠癌和直肠癌的ceRNA调控网络,并分别寻找到了潜在的预后关键基因。
新生儿坏死性小肠结肠炎临床特征及病情严重程度的影响因素分析
目的:通过收集坏死性小肠结肠炎(NEC)患儿临床资料,分析早产儿、足月儿NECⅡ期和Ⅲ期的临床特征,明确病情严重程度的影响因素,同时分析影响Ⅲ期NEC患儿死亡的危险因素。方法:选取2017年1月1日至2022年8月31日兰州大学第二医院NICU收治的110例NEC患儿为研究对象,收集入immediate memory组患儿的临床资料,包括(1)一般情况:性别、胎龄、出生体重、出生窒息、妊娠胎数、受孕方式、分娩方式、胎膜早破、宫内窘迫、胎盘情况、脐带情况、孕母并发症;(2)起病情况:发病日龄、起病前输血、首发症状、病原体培养、诊断NEC24h内实验室检查(WBC、RBC、PLT、HGB、CRP、PCT、TBIL、DBIL、IBIL、总蛋白、白蛋白、ALP、LDH)、NEC确诊前合并症(新生儿高胆红素血症、化脓性脑膜炎、颅内出血、肺动脉高压、败血症、感染性休克、腹膜炎、肺炎、贫血、新生儿呼吸窘迫综合征、动脉导管未闭、支气管肺发育不良、呼吸衰竭、酸中毒、电解质紊乱);(3)治疗情况:手术治疗、吸氧时间、呼吸机辅助通气(包括无创和有创)时间、禁食时间、肠外营养时间、抗生素治疗时间、住院时间、住院费用、出院结局。应用SPSS26.0软件进行统计学分析,先分析NEC患儿总体临床特征;将NEC新生儿(n=110)分为早产组(n=78)和足月组(n=32),分别分析NEC患儿病情严重程度的独立危险因素,联合ROC曲线评估预测价值;再分析影响Ⅲ期NEC患儿死亡的危险因素。结果:(1)总体临床特征:NEC全年散发,春季、夏季、秋季、冬季分别有25例(22.7%)、41例(37.3%)、28例(25.5%)、16例(14.5%)患儿。首发症状中腹胀(n=97)最多,其余依次是便血(n=64)、呕吐(n=61)、腹腔积液(n=43)、发热(n=38)、呼吸暂停(n=10)、肠穿孔(n=7)。共检出16种病原体,37例(33.6%)患儿共54份标本病原体培养阳性,肺炎克雷伯杆菌在痰培养和血培养中阳性率最高。(2)早产组和足月组临床特征:早产组出生窒息、剖宫产、宫内窘迫、起病前输血率、发病日龄显著高于足月组,而TBIL、IBIL、总蛋白、白蛋白水平显著低于足月组(P<0.05)。(3)早产儿NEC病情严重程度的影响因素:单因素分析发现,GA、BW、胎盘异常、发病日龄、腹腔积液、发热、病原体阳性、WBC异常、RBC、HGB、TBIL、IBIL、总蛋白、白蛋白Z-IETD-FMK供应商、败血症、肺炎、贫血、NRDS、BPD、呼吸衰竭在Ⅱ期组和Ⅲ期组之间的差异具有统计学意义(P<0.05),这些指标与早产儿NEC病情严重程度有关;多因素Logistic回归分析发现,腹腔积液是早产儿NselleckEC病情严重程度的独立危险因素。ROC曲线里腹腔积液的AUC值为0.765,在早产儿NEC病情严重程度中具有预测价值。(4)足月儿NEC病情严重程度的影响因素:单因素分析发现,WBC异常和CRP水平在Ⅱ期组和Ⅲ期组之间的差异具有统计学意义(P<0.05),这些指标与足月儿NEC病情严重程度有关;多因素Logistic回归分析未发现足月儿病情严重程度的独立危险因素(P>0.05)。(5)Ⅲ期NEC患儿出院结局:单因素分析发现,感染性休克、酸中毒与Ⅲ期NEC患儿发生死亡有关(P<0.05);多因素Logistic回归分析未发现Ⅲ期NEC患儿死亡的独立危险因素(P>0.05)。结论:(1)腹胀是NEC患儿最常见的首发症状,临床医生应高度重视患儿腹部情况。(2)腹腔积液是早产儿NEC病情严重程度的独立危险因素,并且在早产儿NEC病情严重程度中具有预测价值。(3)如果NECⅢA期患儿及时手术治疗,也许能挽救生命。
火针对膝骨性关节炎模型大鼠血清TNF-α及软骨组织p38的影响
目的 观察火针对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及软骨组织p38的影响,探讨火针对KOA起效的机制。方法 抽签法将15只SD大鼠均分至3组(5只/组),分别标为空白组、模型组与火针组。除空白组大鼠外,其余动物均建立KOA模型。火针组采用毫火针点刺治疗,隔日1次,治疗2周。ELISA法分析大鼠血清TNF-α含量,膝关节软骨组织内p38 mRNA表达水平用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测。结果 模型组大鼠血清TNCompound C生产商F-α含量相较于空白组升高明显(P<0.01),膝关节软骨组织p38 mRNA相对表达量亦有增加,差异具统计学意义(P<0.05);与Novel PHA biosynthesis模型组相比,火针组血清TNF-α明显降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),p38 mRNA表达减少,差异同具有统计学意义(P<0.05)。结论火针Baricitinib molecular weight可通过降低外周血内TNF-α的含量,抑制软骨组织内p38的基因表达对膝骨性关节炎起治疗作用。
基于网络药理学与实验验证探讨连翘苷治疗脓毒症的作用及机制
目的:探讨连翘苷治疗脓毒症的作用机制。方法:利用网络药理学预测连翘苷治疗脓毒症的潜在靶点,构建“连翘苷-共同靶点-疾病”可视化网络图,确立连翘苷治疗脓毒症的蛋白互作关系网络(PPI);并对潜在靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,了解连翘苷治疗脓毒症可能的生物进程及通路。通过分子对接检验连翘苷与核心基因的结合活性。通过腹腔注射脂多糖(LPS)复制脓毒症大鼠模型,给与连翘苷进行干预,通过反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测连翘苷抗脓毒症作用。结果:网络药理学分析表明,连翘苷治疗脓毒症的核心基因为SRC、AKT1、RHOA、CASP3和HSP90AA1等,GO富集分析结果表明连翘苷主要通过影响蛋白水解、细胞迁移的正调节、凋亡过程的负调节等生物进程;发挥丝氨酸型内肽酶活性、酶结合、相同的蛋白质结合等分子功能;以及细胞外泌体、细胞外区域、质膜等细胞组分,进而发挥抗脓毒症的作用,其作用可能与PI3K-AKT信号通路、IL-17信号通路、Rap1信号通路、糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、脂质和动脉粥样硬化等通路相关。分子对接结果显示,连翘苷与以上核心靶点均有良好的结合活性。动物实验结果显示,与正常对照组比Z-IETD-FMK研究购买较,模型对照组大鼠肺组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、SRC、RHOA、CASP3、HSP90AA1 mRNA表MK-2206半抑制浓度达均immunocompetence handicap显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,连翘苷10 、20、40 mg/kg组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、SRC、RHOA、CASP3、HSP90AA1 mRNA表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:运用网络药理学预测了连翘苷治疗脓毒症的核心靶点及信号通路,并通过体内实验进行相关验证,为深入探讨连翘苷治疗脓毒症的作用机制提供参考依据。
枳壳黄酮类化合物提取、功效分析及产品研发
枳壳中有丰富的黄酮类化合物,且其具有降血脂、selleck VX-445抗疲劳等功效,药用价值很高。但是枳壳作为常用理气药多以饮片形式冲泡服用,活性物质溶出率低,限制了其更广阔的商业价值。同时枳壳品种众多,其中有着重要功效的黄酮类化合物的含量差异较大,限制了其作用的发挥。若能从枳壳中提取出高纯度黄酮并将其运用于抗肿瘤功能性食品的研究,将有重要的意义。本课题从重庆22个枳壳样本中筛选出优质品种,对其中的黄酮类化合物进行提取、纯化,并对其进行结构分析和活性研究,开发出一款枳壳黄酮保健饮料,为枳壳的综合利用与开发提供参考。1枳壳黄酮类化合物的提取和纯化工艺研究通过高效液相色谱检测法筛选出优Alpelisib供应商质枳壳样品。结合单因素实验和响应面实验,使用超声辅助法提取枳壳黄酮类化合物的最佳工艺条件为:超声时间20.39 min,液固比35:1(m L/g),酒精浓度79.36%,该条件下黄酮类化合物提取率为16.87%。实验从6种不同型号的大孔树脂中筛选出纯化枳壳黄酮类化合物性能最优的D101型树脂,其最佳纯化条件为:吸附时间4.5 h,解吸浓度90%,解吸液体积与树脂质量比为30:1,解吸时间2.5 h,解吸率为77.1%。各因素对枳壳黄酮类化合物纯化的影响主次顺序为:吸附时间>解吸液体积与树脂质量比>解吸附时间>解吸时乙醇浓度。枳壳黄酮类化合物的纯度由8.23%上升到63.5%,较未纯化前提升了7.7倍。2枳壳黄酮类化合物的自由基清除能力、抗肿瘤活性研究首先考察了枳壳黄酮类化合物对DPPH自由基的清除能力,IC_(50)值为232.6μg/m L。采用MTT(噻唑蓝)实验对枳壳黄酮类化合物进行体外抗肿瘤活性研究,结果显示枳壳黄酮类化合物对结直肠癌(HCT116,HCT-8)细胞,胃癌(CA133,SCC15)细胞均有一定的抑制作用,呈现浓度依赖性,其中对HCT116细胞的抑制效果最好,IC_(50)值为317.2μg/m L。以HCT116细胞为模型进行了克隆形成实验,并采用Annexin V-FITC/PI双染色法,发现随着黄酮浓度的提升,HCT116的体外增殖比例显著降低,且枳壳黄酮类化合物能诱导HCT116细胞的早期凋亡。3枳壳黄酮保健饮料的工艺研究通过响应面实验,确定了枳壳黄酮保健饮料的最优工艺。最佳配方为枳壳黄酮类化合物2.5%,蜂蜜7%,柠檬酸0.04%,复配稳定剂的最佳比例为卡拉胶0.02%,黄原胶0.05%,羧甲基纤维素0.01%。此时枳壳黄酮保健饮料的口味优良、质地均匀,稳定性好。以维生素C作阳性对照,验证了枳壳黄酮保健饮料对DPPH自由基的清除能力,同时进行理化指标和微生物的检测。研究表明,饮料的自由基清除能力与其中黄酮提取物的浓度呈正相关性。在黄酮类化合物的添加量为2.5%时,枳壳黄酮保健饮料对DPPH自由基清除率为84%。与传统水提法相比,超声波辅助乙醇法具备节省时间,步骤简单的优点。通过大孔树脂纯化,进一步提高了枳壳黄酮类化合物中的黄酮含量。在此基础上进行了抗肿瘤、自由基清除能力的试验,说明该提取方法没有损伤黄酮类化合物的活性。最Insulin biosimilars后研发出一款质地稳定,酸甜可口的枳壳黄酮保健饮料。
lncRNA MALAT1对哮喘小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响
目的:检测长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis Filter mediaassociated in lung denocarcinoma transcript 1,MALAT1)对哮喘小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响。方法:将 6~8 周龄雄性BALB/c小鼠随机分成对照组和哮喘组。用卵清蛋白诱导小鼠支气管哮喘模型,HE染色和PAS染色观察小鼠肺组织病理改变,流式细胞术检测小鼠脾细胞中的Th17细胞和Treg细胞,实时荧光定量PCR检测脾组织中的lncRNA MALAT1的表达水平。结果:与对照组相比,哮喘小鼠气道炎症变化明显,支气管周围存在明显炎症细胞浸润,管壁增厚,气道上皮细胞破坏或不规则。哮喘组小鼠脾组织中Th17细胞比例显著升高(P<0.01),Th17细胞的关键转录因子维甲酸相关孤儿核受体C(retinoic acid receptor related orphan C,Rorc)表达上调(P<0.05),而Treg细胞比例显著下降(P<0.01),其关键转录因子叉状头/翼状螺旋转录因子(forkhead/selleck GSK126winged helix R428小鼠transcriptional factor P3,Foxp3)表达下调(P<0.05);脾组织lncRNA MALAT1相对表达量显著上升(P<0.01),与Th17细胞比例呈正相关(r = 0.64,P<0.05),与Treg细胞呈负相关(r = -0.73,P<0.05);而且MALAT1的表达与Rorc表达呈正相关(r = 0.65,P<0.05),与Foxp3表达呈负相关(r = - 0.60,P<0.05)。结论:MALAT1与哮喘小鼠Th17/Treg细胞的失衡密切相关,靶向于MALAT1可能有助于改善哮喘小鼠Th17/Treg平衡。