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目的：探讨细胞色素P450 1B1(cytochrome P450 1B1,CYP1B1)及其抑制剂对小鼠心肌细胞铁死亡的影响及其潜在的分子机制。方法：首先，对正常和心力衰竭小鼠行RNA测序检测差异表达的基因，使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)检测比较去氧肾上腺素(phenylephrine,PE)刺激组和正常组原代心肌细胞中CYP1B1的表达情况，通过丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、Fe~(2+)测定分析两组铁死亡指标；然后，使用不同浓度的CYP1B1抑制剂α-萘确认细节黄酮预处理心肌细胞后再行PE刺激，与对照组、PE组比较铁死亡指标，并行q PCR检测比较各组心力衰竭标志物的基因表达VX-765小鼠水平；最后，通过Western Blot和免疫荧光测定铁死亡相关蛋白核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factconventional cytogenetic techniqueor 2,Nrf2)的表达。结果：PE刺激增加了原代心肌细胞的CYP1B1表达水平和铁死亡指标，而CYP1B1抑制剂α-萘黄酮能逆转这种改变，并回调了Nrf2的表达，缓解了心力衰竭基因标志物的上调。结论：CYP1B1抑制剂在心力衰竭的细胞模型中缓解了心肌细胞铁死亡，这种保护作用可能通过Nrf2实现，提示CYP1B1可能作为心力衰竭的潜在治疗靶标之一。

目的 探讨程序性死亡受体1(programmed death receptor 1,PD-1)基因单核苷酸多态性与肝细胞癌血液学分子标志物的关联性研究。方法 选择2021年1-12月南通大学附属医院介入放射科收治的165例新发肝癌患者作为入组对象，提取基因组DNA，采用Panel高通量数据分析进行PD-1基因分型，分析各基因型与肝癌血液学分子标志物的关联性。结果 AFP的不同分组情况，在rs10204525、rs2227982、rs36084323基因分型情况，各位点突变基因型在AFP不同分组上差异无统计学意义（P>0.05PI3K/Akt/mTOR抑制剂）;PIVKA-Ⅱ不同分组上，对于rs2227982分组，野生型CC、杂合突变型CT、纯合突变型TT、突变型CT+TT在PIVKA-Ⅱ（-）与PIVKA-Ⅱ（+）比较，差异无统计学意义（P> 0.05），而对rs2227982分组，其中杂合突变型AG(34例vs19例)、纯合突Oral bioaccessibility变型AA在PIVKA-Ⅱ（-）与PIVKA-Ⅱ（+）（30例vs15例）比较差异有统计学意义（χ2=3.125,7.158P<0.05）;rs10204525、rs36084323分组，CT、TT、CT+TT与PIVKA-Ⅱ指标无明显关联（P>0.05）。结论 PD-1基因rs360确认细节84323位点单核苷酸多态性与异常凝血酶原指标之间存在一定关联。

传统发酵食品selleck LGK-974中微生物群落复杂，代谢途径多样，其中具有脱羧酶活性的微生物可代谢游离氨基酸形成潜在的危害因子—生物胺(biogenic amines,BAs)。BAs是一类具有生理活性的低分子碱性含氮化合物，主要由氨基酸脱羧酶脱羧产生。BAs根据其含https://www.selleck.cn/products/MK-2206.html氨量可分为单胺、二胺和多胺，根据其化学结构又可分为脂肪类胺、芳香类胺和杂环类胺，其主要形成途径包括微生物脱羧作用以及醛、酮氨基化和转胺作用。传统发酵食品中含有脱羧酶活性的乳酸菌、假单胞菌和肠杆菌等微生物是主要产胺菌。少量的BAs可以调节人体正常生理功能，但摄入过多则会导致中毒，甚至死亡。因此，传统发酵食品中的BAs问题一直备受关immune cell clusters注。解析微生物多样性与BAs形成之间的关系，有利于探明发酵食品中BAs形成途径和机制，可以有效控制BAs的产生与积累，以期为提高传统发酵食品安全性及品质提供参考，保证食品安全。本文重点综述了发酵蔬菜、发酵豆制品、发酵乳制品、发酵肉制品以及发酵水产品等传统发酵食品中微生物多样性与BAs形成之间的相关性，明确了各种发酵食品中的主要产胺菌株，解析BAs形成机制，以期为提高传统发酵食品安全性及品质提供参考。

目的：分析子宫内膜癌患者超声血流参数和肿瘤病理分期及预后相关性。方法：选择2018年1月—2019年12月在天津第五中心医院生态城医院以及天津港口医院就诊治疗的子宫内膜癌患者60例以及同时间段在以上医院就诊治疗的子宫内膜增生患者60例的数据资料进行回顾性分析。对比子宫内膜癌和子宫内膜增生患者的超声检查常规特征情况、超声血流参数情况[血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期峰值流速(PSV)]。对比不同biocomposite ink宫颈癌国际妇产科联盟(FIGO)分期的子宫内膜癌患者的超声血流参数情况。对比不同预后的子宫内膜癌患者的超声血流参数情况。分析不同超声血流参数对子宫内膜癌患者预后的预测情况。结果：子宫内膜癌组患者的子宫内膜增厚程度、血流信号比例以及内膜回声不均匀比例均高于子PUN30119宫内膜增生组患者(均P<0.05)。子宫内膜癌组患者的PI、RI均低于子宫内膜增生组患者，PSV高于子宫内膜增生组患者(均P<0.05)。不同FIGO分期的子宫内膜癌患者PI、RI、PSV水平比较差异有统计学selleck意义(均P<0.05)。随访3年，子宫内膜癌患者死亡14例，死亡患者的PI、RI均低于子宫内膜增生患者，PSV高于存活患者(均P<0.05)。利用PI、RI、PSV对于子宫内膜癌患者的预后进行预测，最佳截断值分别为0.47、0.35、44.86cm/s,约登指数分别为61.80%、62.42%、67.39%。结论：子宫内膜癌患者的部分超声血流参数和肿瘤的病理分期与预后具有关联性，利用部分超声血流参数对患者的预后进行推测具有一定价值。

背景及目的:结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是消化系统常见的恶性肿瘤,2020年,结直肠癌发病率Puromycin为10.0%,约193万例,是全球癌症相关死亡率的第二大原因。临床上5-FU是治疗结直肠癌患者的一线化疗药物,据调查统计:结直肠癌患者长期使用含5-FU辅助化疗药物后,约50%的晚期患者对5-FU及其代谢物耐药。5-FU发挥抗癌作用的疗效仅有10%-17%,细胞内5-FU暴露浓度降低是造成疗效下降且肿瘤细胞获得化学抗性的原因之一。因此,需开发多种联合治疗方案,提高其治疗效果并降低其毒性。基于课题组前期文献调研,五味子乙素与抗肿瘤药物联用,具有增效减毒的作用。本课题研究五味子乙素增加5-FU在结直肠癌细胞内的暴露水平,协同5-FU抗结直肠癌作用的机制。方法:首先,采用CCK-8实验考察5-FU、五味子乙素及两药联用对结直肠癌细胞系(Caco-2、HT-29、SW480)、原代结直肠癌细胞增殖的影响;Tunel细胞凋亡实验研究5-FU、五味子乙素及两药联用对HCT116细胞凋亡的影响。其次,为研究五味子乙素增加5-FU在结直肠癌细胞内的暴露水平。采用Bioelectricity generationRT-PCR实验研究五味子乙素对ABC家族外排转运体的影响;采用非靶向代谢组学实验定量五味子乙素处理的HCT116细胞内代谢小分子及ABC外排转运体内源性底物变化;采用Western blot实验验证五味子乙素对ABC外排转运体表达的影响。进一步研究五味子乙素对ABCC2、ABCC5和ABCC11转运体的影响,采用腺病毒转染实验使ABCC2、ABCC5和ABCC11蛋白高表达;Western blot实验研究五味子乙素对过表达ABCC2、ABCC5和ABCC11蛋白的影响、CCK-8实验考察五味子乙素联合5-FU对过表达ABCC5和ABCC11细胞增殖的影响及过表达ABCC5和ABCC11细胞内5-FU的浓度变化。然后,建立并验证一种直接、灵敏、有效的LC-MS/MS测定HCT116细胞内五味子乙素浓度检测方法,探讨五味子乙素在细胞中的浓度空间分布。前处理方法:经样品/含内标的甲醇(1:3)沉淀蛋白后进样分析。色谱条件:Atlantis(?)T3-C18色谱柱(2.1*100 mm,3μm);流动相:水(含0.2%甲酸)-甲醇,梯度洗脱程序为:0 min,0%B;0-0.5 min,0%-90%B;0.51-53 min,100%B。流速为0.4 m L/min,进样量为5μL。质谱条件:ESI离子源,正离子模式下进行检测,多反应监测模式(MRM)。最后,采用转录组学实验研究五味子乙素抑制结直肠癌细胞ABCC2、ABCC5和ABCC11转运体靶点的探索,研究Sch.B抑制ABC转运体的分子机制。结果:首先,CCK-8实验结果发现,与对照组或单独给药组相比,五味子乙素联用5-FU显著抑制结直肠癌细胞系(Caco-2、HT-29、SW480)和原代结直肠癌细胞的增殖;Tunel细胞凋亡实验结果表明了五味子乙素增强了5-FU促进HCT116细胞凋亡的作用Galunisertib半抑制浓度。其次,通过研究五味子乙素增加5-FU在结直肠癌细胞内的暴露水平,RT-PCR实验结果发现五味子乙素抑制ABCC2、ABCC5和ABCC11蛋白mRNA的表达;非靶向代谢组学结果发现五味子乙素抑制ABCC11蛋白的表达,进而抑制白三烯代谢物的外排,使白三烯代谢物在胞内的蓄积;进一步研究五味子乙素对ABCC2、ABCC5和ABCC11转运体的影响,RT-PCR和Western blot实验结果验证ABCC2、ABCC5和ABCC11蛋白的高表达;CCK-8实验发现5-FU合用五味子乙素可抑制表达ABCC5和ABCC11细胞的增殖;LC-MS/MS定量细胞内5-FU浓度水平结果显示,五味子乙素抑制ABCC11的表达,使胞内5-FU浓度蓄积。然后,针对LC-MS/MS建立的五味子乙素测定方法结果表明,五味子乙素在20-1000 ng/m L范围内线性关系良好,方法学验证都符合要求。最后,转录组实验结果发现在Sch.B药物处理后,分别有ABCC2、ABCC5和ABCC11等20个基因和CCN2、PLPPR3等26个基因显著下调和上调;GO富集分析显示谷胱甘肽跨膜转运和白三烯B4代谢过程被显著抑制且下调;对差异表达基因进行GO level2和KEGG通路富集显示:差异表达的基因在转运体通路中被富集且转运体的活性被显著抑制。结论:5-FU联合五味子乙素可显著抑制结直肠癌细胞系(Caco-2、HT-29、SW480)和原代结直肠癌细胞的增殖并且促进凋亡。其次,研究五味子乙素增加5-FU在结直肠癌细胞内的暴露水平结果表明五味子乙素显著抑制ABCC2、ABCC5和ABCC11蛋白mRNA的表达,五味子乙素抑制ABCC11蛋白的外排作用,使其特异性的内源性底物白三烯代谢物外排作用减弱,造成胞内白三烯代谢物蓄积。进一步研究五味子乙素对ABCC2、ABCC5和ABCC11转运体的影响发现五味子乙素显著抑制ABCC2、ABCC5和ABCC11蛋白的高表达,抑制ABCC5和ABCC11蛋白表达增强5-FU抑制HCT116细胞的增殖及抑制5-FU药物流出细胞,提高其在细胞内的暴露浓度,增强抗结直肠癌作用。然后,建立了一种简便、快速、灵敏的UHPLC-MS/MS测定细胞中五味子乙素浓度的方法。发现五味子乙素在细胞核的空间分布表现时间上的差异,这可能有助于研究Sch.B对癌细胞的作用。最后,通过转录组学实验研究五味子乙素抑制结直肠癌细胞ABCC2、ABCC5和ABCC11转运体靶点的探索结果表明HCT116细胞内共有260和73个基因被上调和下调。Sch.B处理后,分别有20和26个差异表达基因被显著下调和上调;Sch.B通过抑制转运体通路的活性,抑制ABCC2、ABCC5和ABCC11转运体的功能,抑制其介导谷胱甘肽跨膜转运和白三烯B4代谢过程。

目的 探讨甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)在胶质瘤患者中的表达，及其与临床病理特征和预后的相关性。方VP-16生产商法 纳入癌症基因组图谱(TCGA)数据库中胶质瘤的数据和GTEx数据集中正常脑组织数据，分析MeCP2基因在胶质瘤和正常脑组织的表达差异，分析MeCP2水平与胶质瘤患者临床病理特征和预后的相关性；采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析影响患者预后的相关因素，通过差异表达基因进Autoimmune recurrence行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析，探讨MeCP2参与调控的分子信号通路，应用CIBERSORT数据库进行肿瘤免疫细胞浸润分析。结果 MeCP2在胶质瘤中的表达高于正常脑组织，MeCP2表达水平随胶质瘤病理分级升高而降低，MeCP2高表达水平AMG510试剂与低龄(≤60岁)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变型和1p/19q共缺失均相关(P<0.001或P<0.01)。生存分析显示，MeCP2低表达的患者预后较差(P<0.001)。多因素Cox回归分析显示，年龄、WHO分级和IDH突变型是胶质瘤患者生存的独立影响因素，但MeCP2表达水平不是。GO功能富集分析和KEGG通路富集分析显示，MeCP2相关的差异表达基因在细胞因子和趋化因子信号通路显著富集。肿瘤免疫细胞浸润分析表明，MeCP2低表达组有更多的免疫细胞浸润和更高的免疫评分。结论 MeCP2参与调控细胞因子或趋化因子信号通路，并且与免疫细胞浸润密切相关。

目的 通过蛋白质组学方法探讨消癌解毒方促进肝癌小鼠肿瘤细胞铁死亡,抑制移植瘤生长的作用机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为模型组、消癌解毒方低剂量组、消癌DS-3201作用解毒方高剂量组、消癌解毒方联合铁死亡抑制剂组、铁死selleck化学亡抑制剂组、顺铂组。构建H22小鼠移植瘤模型,消癌解毒方低、高剂量组予消癌解毒方灌胃,剂量分别为(10、20 g·kg~(-1)·d~(-1));铁死亡抑制剂组予Liproxstatin-1腹腔注射,剂量为10 mg·kg~(-1)·d~(-1);顺铂组予顺铂腹腔注射,剂量为10 mg·kg~(-1)·d~(-1);消癌解毒方联合铁死亡抑制剂组予消癌解毒方(20 g·kg~(-1)infectious period·d~(-1))灌胃以及Liproxstatin-1(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔注射,模型组灌胃等量生理盐水。连续给药11 d后剥取瘤体计算抑瘤率;HE染色检测病理变化;透射电镜观察线粒体结构变化;流式细胞术检测瘤体组织活性氧(ROS)水平;制备血清以TMT肽段标记结合LC-MS/MS寻找差异蛋白表达谱、应用IPA软件进行分析;生化检测血清铁离子、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HMOX1)、胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的蛋白表达水平。结果 消癌解毒方低、高剂量及顺铂能抑制瘤体生长,抑瘤率分别为36.12%、51.63%、57.43%,铁死亡抑制剂促进了瘤体的生长,抑瘤率为-45.56%,消癌解毒方联合铁死亡抑制剂组瘤体较铁死亡抑制剂组缩小,抑瘤率为18.11%;HE染色显示消癌解毒方高剂量组、顺铂组瘤体组织出现凋亡细胞及大量空泡蓄积;透射电镜结果显示,消癌解毒方低、高剂量组出现一定程度的线粒体萎缩及膜密度增加;流式结果显示:消癌解毒方干预后ROS水平明显升高(P<0.01);蛋白质组学检测显示,消癌解毒方高剂量组与模型组相比差异蛋白共129个,其中下调蛋白62个,上调蛋白67个,差异表达涉及脂质代谢等方面;生化检测结果显示,消癌解毒方干预可升高小鼠血清铁离子、MDA含量,降低GSH含量;Western blot结果显示,消癌解毒方高剂量组干预后Nrf2、HMOX1蛋白表达水平增高,SLC7A11、GPX4蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论 消癌解毒方可调控Nrf2/HMOX1信号通路,调节氧化应激,升高脂质过氧化水平,促进肝癌细胞铁死亡,可能是其抑制移植瘤生长的作用机制之一。

目的 通过整理夏荔芪胶囊治疗前列腺增生(本虚标Chinese herb medicines实证)的研究文献，对其进行临床综合评价，明确其优势和特点及临床精准定位，为决策部门提供参考。方法 采用定性与定量相结合的评价方法，从安全性、有效性、经济性、创新性、适宜性、可及性、中医药特色的“6+1”维度构建评价体系，通过专家对准则层、指标层赋予权重，运用多准则决策分析模型、SCH772984中成药临床证据和价值评估软件对各维度进行计算后进一步转化为A～D4个等级。结果 基于现有研究，(1)夏荔芪胶囊说明书对不良反应的说明、国家药品不良反应监测中心自发呈报系统、临床安全性系统评价与Meta分析等多源数据表明，该药品不良反应主要有胃部不适、腹胀、腹泻等，未观察到严重不良反应。风险可控，安全性好，安全性评为A级。(2)临床有效性系统评价与Meta分析表明，夏荔芪胶囊单用或联合常规治疗后，对国际前列腺评分、最大尿流率等的改善均优于对照组或单用常规治疗组。有效性较好，临床意义较大，有效性评为B级。(3FUT-175体内实验剂量)对夏荔芪胶囊联合常规治疗vs常规治疗进行成本-效果分析，说明其相对经济性。证据报告比较充分、结果较明确，经济性评为B级。(4)夏荔芪胶囊自2004年起先后获得8项国家专利，在临床创新性、服务体系创新性及产业创新性方面均可体现企业的创新性。创新性好，评为A级。(5)基于问卷调查结果，夏荔芪胶囊可基本满足临床用药需求。适宜性较好，评为B级。(6)从药品价格水平、可获得性和可负担性3方面得出夏荔芪胶囊可及性较好，评为B级。(7)夏荔芪胶囊是在络病理论的基础上化裁自李东垣的“通关丸”。中医药特色较突出，评为B级。综合“6+1”维度证据评价结果，夏荔芪胶囊治疗前列腺增生(本虚标实证)的临床价值综合评为B类。结论 夏荔芪胶囊治疗前列腺增生(本虚标实证)临床价值较好，创新性较为突出，据国家卫生健康委员会发布的《药品临床综合评价管理指南(2021年版试行)》，建议可按程序转化为基本临床用药管理的相关政策结果。

目的 研究肝素酶修饰的血栓弹力图(hmTEG)用于连续性肾脏替代治疗(CRRT)时肝素监测的临床价值。方法 选取2014年1月至2019年6月解放军第九〇八医院重症医学科进行血液净化治疗时用DS-3201研究购买肝素抗凝的97例患者，总血液净化台次为278,依据血液净化抗凝时采用部分活化凝血酶原时间(APTT)监测或hmTEG监测，将患者分为APTT组和TEG组，比较两组患者血液净化前及第28天SOFA、血液净化总时间、肝素总剂量、滤器寿命与出血并发症情况，并进行生存分析。结果 与APTT组相比，TEG组的肝素总剂量明显增加、血液净化时间和平均滤器寿命明显延长(P<0.05);与APTT组的第28Baricitinib使用方法天SOFA相比，TEG组的SOFA明显更低(P<0.05);生存分析显示，APTT组患者的28天死亡风险是TEG组的2.01倍(P<0genetic enhancer elements.05),TEG组的72 h滤器寿命较APTT组明显长(P<0.05)。结论 用hmTEG监测血液净化时的肝素抗凝更安全且可以延长滤器使用寿命，改善病情及病死率。

近视是会引起视觉功能障碍甚至致盲的全球性公共卫生问题,受遗传和环境因素共同影响。既往基于高度近视家系等遗传学方面研究发现低密度脂蛋白受体相关蛋白的伴侣蛋白 1(low-density lipoprotein receptor-related protein-associated protein BI 10773临床试验1,LRPAP1)基因和高度近视有关,但仍缺乏基础研究证实。另外,户外光照时间和光照强medullary rim sign度是影响近视患病率的重要环境因素。然而,光照不足导致近视的机制仍未阐明。本课题分别从遗传和环境角度出发,旨在初步探讨lrpap1基因和弱光环境对斑马鱼近视调节的作用及其机MK-1775制,为近视防控发掘潜在的治疗靶点。一方面,通过构建lrpap1基因纯合移码突变突变(c.264_268delinsTCTC,p.Lys35Asnfs*3)斑马鱼模型,探索其基因功能缺失对近视的影响及其机制。结果发现,lrpap1基因纯合移码突变导致斑马鱼出现进行性近视表型。另外,转录组测序和生物信息学分析(KEGG、GO、GSEA)提示细胞凋亡相关通路富集,我们通过吖啶橙染色和TUNEL染色证明lrpap1基因纯合移码突变斑马鱼眼球细胞凋亡增加。最后,免疫印迹试验(Western Blot)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)激动剂/抑制剂胚胎孵育实验表明突变体眼球TGF-β水平升高(P<0.05)并且TGF-β激动剂处理野生型胚胎可加重眼球凋亡程度而使用TGF-β抑制剂可以减轻突变体胚胎的凋亡,表明lrpap1基因纯合移码突变通过TGF-β诱发的细胞凋亡过程参与近视的调控。另一方面,从环境因素出发,探索弱光环境(<51ux)对斑马鱼近视的影响。屈光相关参数测量结果表明弱光干预组斑马鱼在受精后7、14、21和28天相对屈光度向近视漂移(P<0.05),受精后21和28天时眼轴/身长增大(P<0.05),转录组测序结果表明光传导通路富集(KEGG分析)并且弱光干预组受影响部位主要富集于感光细胞外段并涉及眼睛发育、视觉系统发育等生物学过程(GO分析)。HE染色和免疫荧光分析显示,视杆细胞外段延长,视紫红质(Rhodopsin,RHO)表达增加伴脉络膜变薄。同时,斑马鱼胚胎过表达RHO结果表明RHO基因过表达导致幼鱼相对屈光度向近视漂移(P<0.05)并且诱发巩膜层扩张表现,而外层视网膜有4-羟基壬烯醛(4-Hydroxynonenal,4-HNE)累积。此外,弱光干预组眼球活性氧(P<0.05)和丙二醛(P<0.05)水平升高,视网膜有脂褐素和4-HNE累积且TUNEL阳性细胞明显增多(P<0.05)。最后,4-HNE刺激人源视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞实验表明低浓度(20μM)4-HNE提高细胞增殖能力和TGF-β转录水平(P<0.05),高浓度(40μM)时表现为抑制细胞增殖并诱发细胞凋亡和铁死亡。以上结果提示RHO通过脂质过氧化产物4-HNE影响视网膜色素上皮细胞功能,从而介导近视的发生。