目的长链非编码RNAs(lncRNAs)已被证明参与多种肿瘤的发生与发展,但其在胃癌中的确切作用和分子机制尚未被完全阐述。我们的研究旨在探究lnc RNAs调控胃癌恶性进展的作用及其具体机制,为胃癌的靶向治疗提供新的依据。方法1)通过线上数据库GEO(Gene Expression Omnibus)和TCGA,筛选在胃癌中显著高表达的lncRNAs;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测108对新鲜胃癌和癌旁组织中MIR181A2HG的表达情况;分析其表达与胃癌临床病理特征和预后之间的关系。2)通过q RT-PCR法检测胃癌细胞和人胃黏膜细胞(GES-1)中MIR181A2HG的表达情况。选取MIR181A2HG表达最高的两株胃癌细胞株进行MIR181A2HG敲降。通过进行CCK-8实验、Transwell细胞迁移实验、集落形成实验和划痕实验探究MIR181A2HG对胃癌细胞增殖和迁移的影响。3)通过裸鼠足垫-腘窝淋巴结转移模型探究MIR181A2HG对胃癌细胞淋巴结转移的影响。4)通过免疫组化(IHC)、q RT-PCR实验评估MIR181A2HG在巨噬细胞genetic parameter聚集和M2极化中的作用;细胞共培养及小管形成实验分析巨噬细胞极化对淋巴小管形成的作用。5)通过免疫印迹试验、q RT-PCR证实血管内皮生长因子C(VEGF-C)参与MIR181A2HG诱导胃癌细胞淋巴结转移的分子机制。结果1)MIR181A2HG在胃癌组织中表达显著上调且与淋巴结转移密切相关;对TCGA数据库和GEO芯片(GSE54129)进行分析,筛选出在胃癌组织中表达显著上调的MIR181A2HG;分析108例胃癌样本组织发现MIR181A2HG的表达与TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移、淋巴管密度密切相关,而与年龄、性别、侵犯深度、分化程度无关;生存分析结果显示MIR181A2HG的表达与患者预后相关,MIR181A2HG高表达的患者总生存期远短于ABT-263分子量MIR181A2HG低表达的患者。2)MIR181A2HG促进胃癌细胞的增殖和迁移;q RT-PCR法检测发现胃癌细胞株中MIR181A2HG的m RNA表达水平较高,利用慢病毒构建低表达MIR181A2HG的细胞株,进行体外细胞功能实验,结果显示MIR181A2HG敲降显著抑制了SGC-7901和MKN-45细胞的迁移和增殖能力。3)MIR181A2HG促进胃癌细胞淋巴结转移;裸鼠足垫-腘窝淋巴结转移模型证实敲降MIR181A2HG显著抑制了胃癌细胞在体内的淋巴结转移。MIR181A2HG敲降降低了腘窝淋巴结转移成功率、延长了小鼠生存时间。4)MIR181A2HG通过促进巨噬细胞M2极化介导淋巴管生成;免疫组化结果证实MIR181A2HG敲降组裸鼠足垫肿瘤组织中淋巴管标记物LYVE-1和巨噬细胞标记物F4/80表达下降,提示淋巴管生成减少、巨噬细胞数量下降。体外淋巴内皮细胞(HLECs)小管形成实验证实,单独胃癌细胞条件上清无法促进淋巴小管形成。将THP-1细胞通过PMA诱导分化为巨噬细胞,与胃癌细胞体外共培养48h后q RT-PCR法检测,结果显示与MIR181A2HG敲降胃癌细胞株共培养的巨噬细胞M2型标记物减少Dorsomorphin价格;收集共培养后的条件上清处理HLECs细胞,小管形成实验结果显示胃癌细胞MIR181A2HG敲降后淋巴管生成减少。5)MIR181A2HG通过M2/VEGF-C轴促进胃癌的淋巴结转移;利用q RT-PCR、免疫印迹实验检测与胃癌细胞共培养后巨噬细胞中VEGF-C的表达,结果显示巨噬细胞M2极化后VEGFC的m RNA和蛋白表达水平均明显升高。结论综上所述,MIR181A2HG通过诱导巨噬细胞M2型极化上调VEGF-C表达,从而促进胃癌淋巴管生成,最终促进胃癌细胞的淋巴结转移。