目的:1.探讨肝泡型包虫病患者肝组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平与炎症、纤维化及单核细SPR immunosensor胞来源巨噬细胞浸润程度的相关性,了解巨噬细胞及相关细胞因子与肝损伤及纤维化的关系;2.检测泡球蚴感染小鼠模型肝脏组织内巨噬细胞比例。方法:第一部分,收集肝泡型包虫病患者肝组织标本及血液标本,1)通过苏木精-伊红(H&E)和Masson染色评估肝泡型包虫病患者肝组织的损伤和纤维化程度;2)采用免疫组织化学方法检测肝组织中CD68~+巨噬细胞、MAC387~+单核细胞来源的巨噬细胞浸润情况及趋化因子MCP-1、巨噬细胞分泌的细胞因子TGF-β1、i NOS、颗粒体蛋白-GRN、肝星状细胞活化标志物α-SMA及Desmin的表达情况;R428说明书3)应用Quantitative RT-PCR(q RT-PCR)检测肝星状细胞活化标志物α-SMA,巨噬细胞分泌的细胞因子TGF-β1及TNF-α在肝组织中的基因表达水平;4)运用ELISA检测MCP-1在外周血中的水平变化。第二部分,建立E.multilocularis感染小鼠模型,1)通过H&E和Masson染色观察小鼠肝组织的病理学变化和纤维化水平;2)通过ELISA检测小鼠血清中ALT和AST的水平变化;3)通过IHC检测肝组织中F4/80~+巨噬细胞及CD11b~+单核细胞浸润情况、HSC活化标志物Desmin和α-SMA的表达情况、趋化因子MCP-1及巨噬细胞分泌的细胞因子TGF-β1和i NOS的表达情况;4)应用Quantitative RT-PCR(q RT-PCR)检测α-SMA、TGF-β1、Col1α1、TNF-α、MCP-1m RNA在肝组织中的表达水平;5)运用流式细胞术检测肝组织内巨噬细胞及单核细胞来源的巨噬细胞浸润情况。结果:第一部分,1)与肝泡型包虫病患者远端正常组织相比近端病灶组织肝小叶结构被破坏,并伴有不同程度纤维化;2)肝泡型包虫病患者肝组织及外周血中MCP-1表达水平显著增高,相关性分析显示肝组织内MCP-1表达水平与MAC387~+单核细胞来源的巨噬细胞浸润情况,肝组织炎症分级及纤维化分期呈正相关;3)q RT-PCR结果显示,近端病灶组织内α-SMA,TGF-β1和TNF-αm RNA表达水平显著高于远端正常组织;4)免疫组化结果显示,在肝泡型包虫病患者肝组织内α-SMA、Desmin、i NOS、TGF-β1、GRN表达水平显著升高。第二部分,1)E.multilocularis感染会导致小鼠肝组织损伤并伴有纤维化;2)E.multilocularis感染小鼠血清中ALT和AST表达水平显著升高;3)E.multilocularis感染小鼠肝组织内F4/80~+巨噬细胞、CD11b~+单核细胞浸润情况显著增加;4)E.multilocularis感染小鼠肝组织内趋化点击此处因子MCP-1、巨噬细胞分泌的细胞因子TGF-β1、i NOS和肝星状细胞活化标志物α-SMA、Desmin表达水平显著增加;5)E.multilocularis感染小鼠肝组织内α-SMA,TGF-β1,Col1α1,TNF-α和MCP-1m RNA表达水平升高;6)E.multilocularis感染小鼠肝脏组织内单核细胞来源的巨噬细胞(Mo MF)比例显著升高,而肝脏固有巨噬细胞(KCs)比例并无显著变化。结论:1)MCP-1可能参与单核细胞来源的巨噬细胞肝组织浸润,其在肝泡型包虫病导致肝损伤及纤维化中具有重要作用;巨噬细胞相关细胞因子参与肝泡型包虫病导致的肝损伤及纤维化进程;2)E.multilocularis感染小鼠肝脏组织内单核细胞来源的巨噬细胞(Mo MF)比例显著升高。