EGCG衍生物及过硫酸氢钾复合物粉体外抑制Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒的研究

【目的】为了将表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin Gallate,EGCG)的2种衍生物和过硫酸氢钾复合物粉(Compound Potassium Peroxymonosulfate Powder, KMPS)运用于体外细胞实验中,以评估这3种药物对I型草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus, GCRV)的抑制和杀灭效果。【方法】利用 MUSE 法和 CCK-8 法评估表没食子儿茶素没食子酸酯棕https://www.selleck.cn/products/dabrafenib-gsk2118436.html榈酸酯(Epigallocatechin Gallate Palmitate, EGCG-P)、乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯(Peracetylated Epigallocatechin Gallate, AcEGCG)和过硫酸氢钾复合物粉3种药物对细胞的安全浓度,利用体外细胞感染病毒模型,使用不同浓度测试物处理病毒或细胞后感染病毒,通过Real-time PCR法分析不同测试物对病毒的抑制和杀灭效果。使用不同浓度测试物处理细胞后,利用Real-time PCR法检测宿主免疫相关基因变化情况。【结果】 EGCG-P和 AcEGCG 对 GCRV-JX01 感染细胞的抑制作用呈剂量依赖性,且 EGCG-P 的抑制效果优于 AcEGCG,EGCG-P 浓度为 10 μg/mL 和 40 μgut-originated microbiotag/mL 时病毒量相对于对照组上清中病毒的滴度分别降低了 10~(2 )和 10~(3) copies/μL,而AcEGCG浓度为 60 μg/mL 和 120 μg/mL 时才能达到相同抑制效果。杀灭实验结果表明,EGCG-P、AcEGCG和KMPS对GCRV-I毒株均有杀灭效果,最低有效杀灭剂量 KMPS(5 μg/mL)< EGCG-P(120 μg/mL)< AcEGCG(180 μg/mL)。草鱼白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因Captisol纯度子α(TNFα)和髓样分化因子(MyD88)相对于对照组在测试物中均有不同程度上调,其中 EGCG-P(50 μg/mL)和AcEGCG(10 μg/mL)处理组分别在 8 h 和 24 h 上调较为显著。【结论】 EGCG-P、AcEGCG 和 KMPS 对 GCRV-I 均有良好的抑制效果和杀灭效果,其中 EGCG-P 和 KMPS 能够在 40 μg/mL 较低浓度下对 GCRV 发挥显著性的抑制和杀灭效果,且在 24 h 后不会引起机体产生炎症反应。本研究为拮抗草鱼呼肠孤病毒环境友好型消毒产品的开发提供参考。