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目的 制备难溶性药物反式西红花酸（trans-crocetin,TC）与甲基-β-环糊精（methyl-β-cyclodextrin,MβCD）的包合物（TC-MβCD），并评价包合物对TC溶解度、安全性和有效性的影响。方法 采用单因素实验和Box-Behnken响应面法筛选环糊精种类等工艺参数，采用冷冻干燥法制备TC-MβCD。采用扫描电子显微镜（SEM）、UV法、体外释放度测定法等对TC-MβCselleck化学D包合物进行表征，采用HPLC法测定TC含量。采用Caco-2细胞模型研究TC与TC-MβCD的体外转运机制。采用斑马鱼鱼卵/胚胎发育保护模型评价TC-MβCD包合物的安全性，采用体外乳腺癌4T1细胞和裸鼠体内乳腺癌MCF-7肿瘤模型对比研究TC及TC-MβCD的体内外抗肿瘤活性。结果 在5种环糊精中，MβCD对TC的增溶效果最好，优化包合工艺参数为料液比33%，搅拌温度60℃，搅拌时间120 min。TC-MβCD冻干粉中TC含量2.2%，增溶效果显著，复溶性良好。SEM和UV法表明TC被MβCD的空穴结构包合，TC-MβCD冻干粉可在0.1%聚山梨酯80-pH 6.8介质中释放，其拟合曲线符合一级释药模型。Caco-2细胞模型表明TC转运机制为被动扩散，包合促进吸收。斑马鱼鱼卵/胚胎发育试验发现，TC-MβCD包合物对斑马鱼的孵化率、斑马鱼胚胎的存活率和心率几乎没有影响，表明包合物安全性好。乳腺癌4T1细胞MK-1775体外抗肿瘤表明TC-MβCD的IC_(50)明显低于TC，说明包合物对乳腺癌细胞有更强的抑制作用。裸鼠体内MCF-7肿瘤模型表明，相同药物剂量下，TC-MβCD的抑制率为33.71%，远高于TC的16.86%。结论 采用相溶解度法筛选出合适的环糊精，通过冷冻干燥制备TC-MβCD冻干粉，并对其进行评价。TC被MβCD包合后，显著增加了TC的溶解度，提高了TC的抗肿瘤活性和安全性，为TC包合desert microbiome物制剂工业化生产提出理论依据。

目的 分析海洋中药瓦楞子中发挥免疫调节作用的蛋白质类成分。方法 采用水煎煮和乙酸两种提取方法提取瓦楞子中活性蛋白质类成分CHIR-99021说明书；利用RAW264.7巨噬细胞检测瓦楞子提取组分的免疫调节活性；运用瓦楞子转录组测序构建的瓦楞子转录组数据库，通过液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分析瓦楞子提取组分的蛋白质类成分；利用GO/KEGG功能富集分析发现瓦楞子提取组分中发挥免疫调节作用的蛋白质类成分。结果 得到2个具有免疫调节活性的蛋白质类组分WLZP-1和WLZP-2，其对小鼠RAW264.7细胞均无明显细胞毒性，并能促进RAW264.7细胞分泌一氧化氮（NO），其中，WLZP-1活性优于WLZP-2。同时，分别从WLZP-1和WLZP-2组分中鉴定了276和1immunological ageing75个蛋白质类成分。WLZP-1和WLZP-2组分中蛋白质类成分主要由参与分子功能、细胞组分和生物过程的蛋白多肽组成。WLZP-1和WLZP-2组分均具有多个蛋白质类成分参与人源免疫系统及信号传导的功能。结论 从瓦楞子两种免疫调节活性组分WLZP-1和WLZP-2中分别发现8个和7个参与人源免疫系统的蛋白质类成分，本研究为发现活性新蛋白多肽及中药瓦Bemcentinib体内实验剂量楞子免疫调节物质基础研究提供新的科学资料。

目的:研究鸡内金的最佳酶解工艺条件，并分析其酶解物的氨基酸组成、分子量分布及抗氧化活性。方法:以鸡内金多肽得率、酶解液水解度为指标，采用正交试验优化鸡内金的酶解工艺条件；采用氨基酸分析仪、高效凝胶渗透色谱法测定鸡内金酶解物的氨基酸组成和分子量分布；并考察鸡内金酶解物对DPPH自由基和ABTS~+自由基的清除能力。结果:鸡内金最佳酶解工艺条件为以中性蛋白酶和碱性蛋白酶共同酶解，酶解温度60℃,酶解时间9 h,酶解pH值11,蒸煮时间6 h。该条件下鸡内金多肽得率为75.68%,水解度为14.43%;鸡内金酶解物的必需氨基酸与非必需MK-2206抑制剂氨基酸的比值为58.56%,具有较高的营养价值；鸡内金酶解物相对分子质量<1 000 Da所占比例为BI 1077390.2%,易于消化吸收；当鸡内金酶解物质量浓度为1.5 mg/mL时，其对ABTS~+自由基的清除率达到94.19%。结论:最佳酶解工艺下，鸡内金多肽得率高达75.68%,具有Bio-controlling agent较好的抗氧化活性。

目的 分析乳腺癌PF-07321332试剂患者手术前后糖类抗原-153(CA-153)、鳞状细胞癌抗原（SCC）及人附睾蛋白4(HE4)水平变化及在复发预测中的应用价值。方法 2019年1月至2020年12月于承德市第三医院行外科手术治疗的乳腺癌患者102例（观察组），另选取本院同期体检健康人群98名作为对照组。对观察组进行为期12个月随访，统计患者复发情况，检测Endocrinology & Hormones抑制剂不同人群CA-153、SCC及HE4水平，分析CA-153、SCC及HE4对乳腺癌术后复发的预测价值。结果 CA-153、SCC、HE4表达水平为：观察组治疗前>观察治疗后>对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。随访截止至Primary Cells2021年12月31日，所有患者均未失访，102例乳腺癌患者中复发者21例，未复发者81例。术后复发者病理分期为Ⅲ～ⅣV期、肿瘤直径≥5 cm、术后未辅助治疗、术后CA-153≥30 U/L、SCC≥1.5 ng/mL、HE4≥70 pmol/L占比明显高于术后未复发者，差异均有统计学意义（P<0.05）。经多元Logistic回归分析可知，术前病理分期、肿瘤直径以及术后是否辅助治疗、术后CA-153、SCC及HE4水平为影响乳腺癌患者复发的相关危险因素（P<0.05）。结论 CA-153、SCC及HE4表达水平与乳腺癌患者术后复发密切相关，监测CA-153、SCC、HE4表达水平可为患者术后复发预测提供参考依据。

目的：观察鼻及鼻咽部疾病与EB病毒感染之间的关系。方法：收集2019年9月至2020年12月期间广州市干部健康管理中心电子鼻咽镜检查的资料，统计所有研究对象电子鼻咽镜检查及EB病毒检测的结果，比较不同EB病毒感染的鼻咽镜检查疾PCR Equipment病的发病率。结果：711例研究对象中，EB病毒衣壳蛋白抗原（VCA）–免疫球蛋白A(IgA)抗体阳性234例，阴性477例；EB病毒核抗原1(NA1)–IgASB431542小鼠抗体阳性93例，阴性618例；两项均为阳性者23例，均为阴性407例。鼻咽镜KD025检查异常的结果中，鼻咽炎的发病率最高，EB病毒NA1–IgA抗体阳性者鼻咽癌的发病率明显高于阴性者，EB病毒VCA–IgA抗体阴性者鼻息肉的发病率明显高于阳性者，两项均阳性者鼻咽癌的发病率明显高于阴性者，差异均具有统计学意义（P <0.05）。结论：EB病毒与鼻及鼻咽部相关疾病的发生具有一定相关性，EB病毒VCA–IgA抗体阳性和NA1–IgA抗体阳性患者中鼻咽炎的发病率较高，两者可能分别参与鼻息肉和鼻咽癌的发生，但仍需进一步研究。

目的 探讨不同热暴露方式对自发性高血压大鼠胸主动脉血管损伤的影响及其机制。方法 选用自发性高血压大鼠（SHR），构建热暴露大鼠模型，分为对照组SHR-CN(n=9，饲养在24℃室温下)，间断性热暴露组SHR-8(n=9，每天接受任意连续8 h热暴露，其Belumosudil分子量余时间饲养在与对照组相同的条件下)和持续性热暴露组SHR-24(n=9，持续暴露在32℃高温下)。进行自噬和通路干预的SHRs，分别于热暴露前30 min腹腔注射自噬激活剂Rapa，抑制剂3-MA和AMPK抑制剂Compound C(CC)。。通过苏木素-伊红染色（HE）观察大鼠胸主动脉形态的变化；利用Western blot和免疫Medical order entry systems荧光（IF）分别检测高血压大鼠胸主动脉自噬相关因子Beclin1、LC3B和p62的表达情况；利用TUNEL检测高血压大鼠胸主动脉凋亡的情况，Western blot检测Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达情况；用自噬的激活剂和抑制剂干预高血压大鼠后，检测自噬和凋亡相关因子的表达情况；免疫组化（IHC）检测通路相关因子的表达情况，大鼠腹腔注射AMPK抑制剂Compound VorinostatC(CC)后，进一步观察通路及自噬的表达情况。结果 HE染色显示，SHR-8组胸主动脉内膜排列分布不完整，细胞分布紊乱。Western blot显示Beclin1、LC3II/LC3I表达增高，p62降低，差异均具有统计学意义（P<0.05）。TUNEL结果表明SHR-8组中凋亡阳性细胞数明显高于对照组。Western blot表明热暴露后Bax表达升高，Bcl-2表达降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。3-MA抑制自噬的表达，同时凋亡表达降低，Rapamycin促进自噬和凋亡的表达。IHC显示，与SHR-CN相比，SHR-8组p-mTOR明显降低，p-AMPK和p-ULK1表达升高。腹腔注射CC降低了pAMPK和p-ULK1的表达，同时自噬相关因子LC3B和Beclin1表达降低。结论 不同热暴露下，间断性热暴露导致自发性高血压大鼠胸主动脉形态、自噬和凋亡相关因子表达变化显著，其作用机制可能是通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路来实现的。

目的与背景随着社会医疗水平的发展,个体化精准医疗逐渐成为大众关注的焦点,主要指从基因角度对疾病进行筛查、诊断、预后评估和用药指导等,日渐成熟的分子诊断技术在其中占据重要组成部分。通过基于PCR扩增技术的分子诊断技术对重大传染性疾病进行早筛、对肿瘤特异性标志物进行筛查等,我们可以进行大规模的流行病学调查和分析以及制定个性化的治疗方案,这对提高我国整体人口健康水平影响深远。但是现阶段基于PCR的核酸扩增技术仍存在一定问题,样本处理后的大规模核酸提取费时费力,且RNA靶标在提BMS-907351使用方法取过程中易发生降解或者断裂,一定程度上限制了检测的灵敏度;受仪器荧光检测通道的制约,PCR扩增重数受到限制等。综上所述,一种灵敏特异的无需核酸提取的核酸检测技术可以解决分子诊断现存的一些问题,本研究将一种高特异性、高灵敏度、基于捕获和连接的核酸检测方法加以创新改进,应用到儿童白血病融合基因和人体免疫缺陷病毒的检测中,成功的实现了这两种疾病的高通量核酸检测及定量研究。方法本研究将免提核酸的、灵敏特异的基于捕获和连接的PCR核酸检测技术方法应用到儿童白血病中融合基因的定性定量检测,同时我们用市面上现有的普通RT-PCR试剂盒对融合基因体外转录合成RNA(in vitro translation RNA,IVT-RNA)和病人血液样品进行平行检测,通过方法学的比较评估了此方法的灵敏度和特异性,然后对来自首都医科大学附属北京儿童医院的50例急性淋巴细胞白血病患儿样本,进行检测验证。在PCR的基础之上,我们运用MALDI-TOF质谱分析初步建立了一种基于捕获和连接的多重融合基因质谱分析技术,随后用IVskin immunityT-RNA对方法的可行性进行评估。此外,本研究将一种基于捕获和连接的核酸检测技术方法应用到链霉亲和素包裹的磁珠上,结合LAMP(loop-mediated isothermal amplif-ication)恒温扩增建立起了一种免核酸提取的、灵敏高效的基于磁珠捕获和连接的环介导恒温扩增(capture and ligation probe-LAMP,CLIP-LAMP)方法体系,该体系用于传染性疾病HIV IVT-RNA的定性及定量检测,同时评估该体系的灵敏度和特异性。结果本研究成功将基于96孔板的CLIP-PCR核酸检测技术应用到儿童急性淋巴细胞白血病中融合基因的检测,针对两种种常见的融合基因BCR-ABL1和ETV6-RUNX1进行定性定量和双重检测,BCR-ABL1可以稳定检测到192 copies,ETV6-AUNX1可以稳定检测到24.24 copies,用普通RT-PCR试剂盒进行方法学比较可以得到相同的检出限。我们还进一步联合CLIP-PCR和核酸质谱方法对BCR-ABL1和ETV6-RUNX1这两种融合基因进行多重检测初步可行性分析,实验结果证明,该方法成功应用于多重融合基因的检测,检测结果良好。除此之外,本研究构建的基于磁珠捕获和连接的环介导恒温扩增方法体系成功的应用到重大传染性疾病HIV的定性与定量检测中,并且可以稳定检测到32 CPs/μL的病毒载量,检测方法具有良好的特异性,且具有处理>1 mL的大体积样本的可能,整个反应可以控制在2h内完成。结论本研究在基于捕获和连接的核酸检测技术基础上,将其与磁珠上的恒温扩增及捕获板里的PCR扩增方法体系相结合,成功建立起了免核酸提取的RNA为靶标的定性与定量检测技术,并应用于血液肿瘤里融合基因和HIV的检测。通过对结果分析证明,基于96孔板捕获和连接selleck合成的PCR扩增和核酸质谱方法体系,应用于融合基因的定性定量检测,取得了较高的灵敏度和特异性;基于磁珠捕获和连接的环介导恒温扩增方法体系可以特异性的捕获RNA靶标并进行高效扩增,有潜力成为一种灵敏高效、简便快捷的边境地区HIV筛查技术。综上所述,基于捕获和连接的核酸检测方法在儿童血液肿瘤里融合基因和人体免疫缺陷病毒上的应用取得成功,同时为其他疾病的检测提供了新的方法和思路。

目的 分析程序性死亡受体-1(PD-1)抑制剂在非小细胞肺癌(NSCLC)中的疗效及安全性。方法 回顾性收集2020-01-01-2021-06-30在嘉兴市第一医院接受PD-1抑制剂治疗的NSCLC患者149例，对用药信息、免疫治疗相关不良反应(irAEs)、客观缓解率(ORR)和疾病控制率(DCR)进行分析，采用χ~2检验比较组间差异，二分类logistic回归分析与irAEs发生有关的独立危险因素。结果 6种PD-1抑制剂中信迪利单抗占比最高(48例，32.2%);联合化疗是最主要的治疗方式(86例，57.7%)。irAEs发生率为47.7%(71/149),其中≥3级的irAEs发生率为6.7%(10/149),且单药治疗高于联合治疗(14.3%vs 3.7%),χ~2=5.359,P=0.021;二分类log获悉更多istic回归分selleck Naporafenib析结果显示，吸烟史是发生irAEs的独立危险因素，OR=2.521,95%CI:1.235～5.146,P=0.011。总人群的ORR为23.5%,DCR为83.2%,其中PD-L1肿瘤细胞阳性比例分数(TPS)≥1%较PD-L1 TPS<1%者具有较高的DCR(90.3%vs 66.7%),χ~2=4.814,P=0.028;一线治疗的DCR高于后线治疗(90.4%vs 74.2%),χ~2=6.841,P=0.009;irAEs组较无irAEs组有较高的ORR(33.8%vs 14.1%,χ~2=8.026,P=0.005)和DCR(93.0%vs 74.4%,χ~2=9.208,P=0immune thrombocytopenia.002)。结论 PD-1抑制剂治疗晚期NSCLC疗效尚可，irAEs发生率与疗效相关。

<正>特应性皮炎（atopic dermatitis,AD)是一种慢性、复发性、炎症性皮肤疾病，全球约有2.3亿人受到AD困扰，其中包括VP-16纯度20%的儿童和1%～3%的成人，其特征是瘙痒、炎症性皮损，以及皮肤屏障缺损~([1])。反复抓挠会引起瘙痒-抓挠循环，严重影响患者生活质量~([2])，所以，控制瘙痒是其治疗目标之一。AD的疾病机制与遗传、环境、皮肤屏障和免疫等因素等均有关。Th2型炎症是AD的基本特征，不同年龄阶段AD的炎症表现也不尽相同，儿童期主要表现为Th2型炎症，而成人期却表现为Th2/Th22型混合炎症，亚裔则以Th2/Th17混合型炎症为主。AD的治疗方式有：基础治疗，包括洗浴、食物干预、改善环境、脱离变应原等；外用药物治疗，如一线用药糖皮质激素、钙调神经磷酸酶抑制剂；抗葡萄球菌抗生素可以有效治疗继发性皮肤感染；由于口服抗组胺药不能减轻瘙痒，故不推荐使用；对于一线治疗不充分的中重度特应性皮biotic index炎，紫外线光疗是一种安全有效的治疗方法；还可系统应用糖皮质激素、selleck NMR免疫抑制剂、Janus激酶抑制剂、生物制剂等方法治疗AD。

目的 探讨乳腺癌新辅助化疗后退缩模式的MRI评估及与病理反应的相关性。方法 选取169例确诊乳腺癌并行新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NAC)的患者治疗前后的MRI资料，评估基线MRI肿瘤形态、治疗后MRI退缩模式，并与NAC后病理反应对照。结果 最常见的基线MRI形态是孤立性肿块占58.0%(Compound 3浓度98/169)，此类型以向心Biosynthetic bacterial 6-phytase性退缩为主(53.1%,52/98)，其次是碎裂成多结节(24.5%,24/98);第二常见MRI基线形态是成组病变(16.6%,2selleck化学8/169)，并以碎裂成多结节为主(89.3%,25/28)。最常见的病理反应是Miller-Payne分级3级(约49.7%,84/169),MRI退缩模式呈向心性退缩为主。病理完全缓解((pathological complete response,p CR)占24.9%(42/169)，但其中只有13例术前影像学诊断完全缓解(radiologic complete response,r CR),29例(占69.0%) p CR术前MRI误诊残余癌，其中2例为向心性退缩，27例为碎裂型退缩。分析29例患者中13例可见不同程度原位癌，其余还有炎症或炎性肉芽肿5例，增生或其他良性肿瘤4例。结论 MRI提示r CR与病理p CR一致性较高，其特异性较高但敏感性较低，仍有一部分p CR病例因病变区域内不同程度原位癌、炎性反应/肉芽肿或者其他良性病变强化而误诊为肿瘤残留。向心性退缩病变MRI能较准确检测肿瘤残留强化灶;而非向心性退缩病变对残余肿瘤的判断及大小检测方面存在一定混淆因素。