Author: admin

目的 分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患寻找更多者肺部感染病原菌的分布情况，并探讨影响肺部感染发生的危险因素，为其临床预防和治疗提供参Electrical bioimpedance考。方法 回顾性分析罗定市第六人民医院2021年1月至11月收治的110例AECOPD患者的临床资料，按照其是否并发肺部感染分为未发生肺部感染组（60例）和发生肺部感染组（50例）。分析发生肺部感染组患者病原菌分布情况；对两组患者一般资料进行单因素分析；采用多因素Logistic回归分析筛选AECOPD患者发生肺部感染的独立危险因素。结果 发生肺部感染组患者的痰液样本中共分离出65株病原菌，其中革兰阴性菌41株，占比63.08%，革兰阳性菌18株，占比27.69%，真菌6株，占比9.23%；单因素分析结果显示，发生肺部感染组中年龄≥60岁、住院时间≥14 d、糖皮质激素使用时间≥7 d、抗生素使用时间≥17 d、有机械通气史、吸烟、合并糖尿病、未进行雾化吸入的患者占比均显著高于未发生肺部感染组（均P<0.05）；多因素Logistic回归分析结果显示，有机械通气史、糖皮质激素使用时间≥7 d、年龄≥60岁、住院时间≥14 d、抗生素使用时间≥17 d均为影响AECOPD患者发生肺部感染的独立危险因素（OR=1.446、1.570、1.603、1.489、2.寻找更多323，均P<0.05），而雾化吸入则为AECOPD患者发生肺部感染的保护因素（OR=0.596,P<0.05）。结论 AECOPD患者发生肺部感染的病原菌主要为革兰氏阴性菌，影响AECOPD患者发生肺部感染的危险因素为机械通气史、糖皮质激素使用时间≥7 d、年龄≥60岁、住院时间≥14 d、抗生素使用时间≥17 d,AECOPD患者发生肺部感染的保护因素为雾化吸入，针对以上因素，临床可采取相关措施，以预防患者发生肺部感染。

目的：探讨澳洲茄碱对肝癌细Nucleic Acid Electrophoresis胞增殖活性的影响及对丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)/胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调节作用。方法：取对数生长期的HepG2细胞随机分为对照组、澳洲茄碱组(以50μmol/L澳洲茄碱处理细胞)、激活剂组[以20μmol/L异丙肾上腺素(ISO)处理细胞]和激活剂+澳洲茄碱组(20μmol/L ISO处理细胞24 h后，以50μmol/L澳洲茄碱处理),24 h后采用四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率，采用划痕实验检测细胞迁移能力，采用Transwell试验检测细胞侵袭能力，采用蛋白质印迹法检测磷酸化ERK(p-ERK)、ERK、丝裂原激活的蛋白激酶激酶(MEK)和磷酸化MEK(p-MEK)蛋白相对表达量。结果：与0μmol/L澳洲茄碱比较，10、20、30、40及50μmol/L澳洲茄碱均可降低细胞存活率，差异均有统计学意义(P<0.05),且具浓度依赖性。与对照组比较，澳洲茄碱组细胞存活率、划痕愈合率，p-ERK、p-MEK蛋白相对表达量降低，侵袭细胞数减少；激活剂组细胞划痕愈合率，p-ERK、p-MEK蛋白相对表达量升高，侵袭细胞数增多，差异均有统计学意义(P<0.0selleck LY-1880115)。与澳洲茄碱组比较，激活剂+澳洲茄碱组细胞存活率、划痕愈合率，p-ERK、p-MEK蛋白相对表达量升高，侵袭细胞数增多，差异均有统计学意义(P<0.05)。与激活剂组比较，激活剂+澳洲茄碱组细胞存活率、划痕愈合率，p-ERK、p-MEK蛋白相对表达量降低，侵袭细胞数减少，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：澳洲茄碱可降低肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，其可能是通过抑制MAPPUN30119K/ERK信号通路发挥调控作用。

水牛(Bubalus bubalis)是适应南方气候的重要家畜品种,具有广阔的经济开发价值。水牛奶因其营养价值丰富、产品附加值高被誉为“奶中之王”,水牛奶业已成为我国南方奶业的重要组成部分。但是,水牛养殖过程中药物滥用导致水牛奶中残留药物,对人类健康造成威胁。另一方面,水牛奶Ipatasertib源掺假问题也被社会普遍关注。因此,检测水牛奶中药物残留和奶源成分是保障动物源食品安全的关键环节,亟待开发出灵敏有效的分析方法开展水牛奶中兽药残留检测和酪蛋白溯源。基于此目的,本研究主要利用液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)技术开展兽药残留和酪蛋白鉴定的研究与应用。本研究为水牛奶制品的食品安全检测和溯源分析提供新的手段,为建立行业检测标准打下理论基础,有助于促进奶水牛产业的良性发展。本研究的主要内容如下:(一)水牛奶多种兽药残留LC-MS/MS检测方法研究。利用LC-MS/MS技术开展甲硝唑、沙丁胺醇、阿托品、甲氧苄啶、氢化可的松、吉他霉素、罗红霉素、泰乐菌素,8种常见兽药的选择反应监测(Select Reaction Monitor,SRM)分析方法。对线性关系、检出限、准确度等美国食品和药物管理局(Food and Drug Administration,FDA)生物分析方法指南16所规定的指标开展方法学优化,同时比较了不同的样品处理方法、色谱条件和质谱方法。结果表明,各分析物的精密度和准确度为1.81%～12.35%和1.25%～14.57%。线性关系良好,相关系数r~2为0.9995～0.9999,检测限为0.1～10μg·L~(-1)。平均提取回收率为93.59%～114.57%,平均基质效应结果为87.12%～103.76%。水牛奶中的8种分析物均表现出稳定性。该技术方法检测限低、灵敏度高、重复性好,可在20 min内对8种药物残留进行准确的定性和定量分析。该技术体系成功用于检测原奶等样品的药物残留分析。本试验为建立水牛奶药物残留检测体系的行业标准打下了基础。(二)水牛奶酪蛋白(Casein,CN)分离和肽指纹图谱分析。利用高效液相色谱和质谱技术对水牛奶酪蛋白单体进行分离和鉴定,并对水牛奶和牛奶的酪蛋白及其单体进行肽指纹图谱分析。结果表明,采用化学沉淀法可有效提取酪蛋白,使用乙腈(0.1%TFA)和水(0.1%TFA)作为流动相,C18ODS-AP为色谱柱,有效分离水牛奶α_(S1)-CN,α_(S确认细节2)-CN,β-CN,κ-CN。酪蛋白经酶解后,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF)可检测到水牛奶与牛奶酪蛋白相似性肽段16条,差异性肽段17条。通过进一步LC-MS/MS鉴定酪蛋白特征性肽段,确定了8条来自于水牛奶酪蛋白的特征性肽,可作为水牛奶溯源识别的标志物。该方法可有效分离水牛奶酪蛋白,为水牛奶酪蛋白的快速鉴定和质量检测建立了技术手段,特征性多肽结合质谱鉴定可为水牛奶、牛奶及其混合物的痕量分析提供高灵敏度的方法。综上所述,本研究成功创立了一种同时检测水牛奶多种兽药残留的方法,建立了水牛奶酪蛋白的分离体系,并筛选出水牛奶酪蛋白的特征性多肽,为水牛奶和牛奶的溯medication history源鉴定和掺假分析提供参考依据。

观察积雪草苷 (asiaticoside， Ass) 对氧糖剥夺/再复 (oxygen and glucose deprivation/reperfusion， OGD/R) 损伤的H9C2心肌细胞的增殖、磷脂酰肌醇3-激酶 (PI3K)/蛋白激酶B (Akt)/Bcl-2同源结构域蛋白 (Beclin-1) 信号通路的干预作用， 探讨其对H9C2心肌细胞的影响。选用H9C2心肌细胞作为研究对象， 采用细胞增殖与活性检测试剂盒 (CCK-8) 法检测H9C2细胞活性。将H9C2细胞分成对照组、OGD/R组、Ass低浓度组 (10 μmol·L~(-1))、Ass高浓度组 (80 μmol·L~(-1)) 和Ass高浓度+氯喹组 (80 μmol·L~(-1) + 50 μmol·L~(-1))。对照组于正常条件下培养， 其余各组在处理后进行氧糖剥夺4 h/再复2 h。酶联免疫吸附法检测细胞上清液中天门冬氨酸氨基转移酶 (aspartate transaminase， AST)、乳酸脱氢酶 (lactate dehydrogenase， LDH)、肌酸激酶 (creatine kinase， CK) 的含量; 免疫荧光观察药物对细胞数量的影响; 自噬染色检测试剂盒观察细胞自噬; 分子对接技术确定Ass分子靶点; 蛋白质印迹法检测PI3K、Akt、选择性自噬接头蛋白 (P62)、Beclin-1的表达水平。与OGD/R组相比， Ass各组在10～80 μmol·L~(-1)具有保护作用， AST、LDH和CK的含量均降低， PI3K、Akt、P62和Beclin-1蛋白表Critical Care Medicine达水平降低。与Ass组相比， Ass高浓度 + 氯喹组的AST、LDH和CK的含量均降低， PI3K、Akt、Beclin-1和P62蛋白表达水平均降低。免疫荧光显示抑制剂组、各给药组与模型组相比均具有不同程度的保护作用。综上所述， 积雪草苷能够降低OGD/R诱导的H9C2心肌细胞损伤， 降低AST、LDHselleckchem VX-765、CK含量和 P62蛋白水平， 减少细胞自噬， 这可能GNE-140体内与其抑制PI3K/Akt/Beclin-1信号通路激活密切相关。

【目的】分析非洲猪瘟病毒(Africa swine fever virus, ASFV)D250R蛋白潜在的生物学功能，制备其多克隆抗体，为ASFV D250R蛋白功能研究及相关诊断试剂的研发提供材料。【方法】应用生物信息学软件分析D250R蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、磷酸化位点、生物功能及蛋Infectious keratitis白结构等。通过大肠杆菌表达系统表达重组D250R蛋白，采用镍亲和层析柱和分子筛纯化重组D250R蛋白，Western blotting检测纯化蛋白的反应原性，将纯化的D250R蛋白免疫BALB/GSK1349572使用方法c小鼠制备多克隆抗体，用间接ELISA方法测定多克隆抗体效价，用间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体特异性。【结果】生物信息学分PF-6463922半抑制浓度析结果显示，D250R蛋白共由250个氨基酸组成，理论分子质量为29 822.54 u,理论等电点为8.96,为亲水性蛋白，无信号肽及跨膜区。修饰位点预测结果显示，D250R蛋白可能存在15个磷酸化修饰位点，其中丝氨酸(Ser)6个、酪氨酸(Tyr)6个、苏氨酸(Thr)3个；2个N-糖基化修饰位点，分别位于第61和197位氨基酸处。生物学功能预测结果显示，D250R蛋白含有Nudix序列，具有解水解酶活性。蛋白结构预测结果显示，D250R蛋白二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链、无规则卷曲占比分别为49.20%、7.60%、15.20%和28.00%,三维空间结构存在较多α-螺旋，与二级结构预测结果基本一致。将ASFV D250R基因克隆至pET-32a(+)获得pET-32a-D250R重组质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，在16℃、1 mmol/L IPTG诱导下，D250R蛋白以可溶性和包涵体2种形式表达，蛋白大小约44 ku,蛋白上清经镍亲和层析柱和分子筛层析纯化得到纯度较高的蛋白；Western blotting检测结果显示，重组蛋白具有良好的反应原性；间接ELISA检测结果显示，D250R蛋白抗体效价达到1∶256 000,成功制备多克隆抗体；IFA检测结果表明该多克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本研究在分子层面分析了D250R蛋白的理化性质及蛋白结构，在大肠杆菌表达系统中实现了ASFV D250R蛋白的高效表达，纯化的D250R蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体具有较高的特异性，为深入探讨ASFV D250R蛋白的生物学功能及ASFV相关诊断试剂的研发奠定了基础。

目的 分析本院门诊2型糖尿病患者口服降糖药物的用药情况,进而为患者的临床治疗提供科学合理的依据。方法 统计4040例2型糖尿病患者处方,观察应用药物名称、规格、类别、销售金额、用药频度(DDDs)、日均费用(DDC)及不合理用药情况。结果 2型糖尿病患者的口服降糖药物类型BI 10773化学结构主要包括DDP-4抑制剂、TZDs胰岛素增敏剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、双胍类以及磺酰脲类。DDDs居于前三位的分别为阿卡波糖、二甲点击此处双胍、瑞格列奈；销售金Cardiovascular biology额居于前三位的分别为二甲双胍、瑞格列奈、阿卡波糖；DDC居于前三位的分别为吡格列酮、阿卡波糖、瑞格列奈。研究中共有8例不合理用药情况,包括TZDs胰岛素增敏剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、磺酰脲类药物、双胍类药物不合理应用。结论 本院基本上采用两种不同作用机制降糖药物联合用药方式对患者进行治疗,使用情况合理。

目的 了解丽水地区新生儿与婴幼儿TORCH感染情况，为丽水TORCH感染预防提供科学依据。方法 采用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)检测新生儿与婴幼儿血清中特异性的抗体，对数据进行统计学分析。结果 1 933例标本中，TORCH-IgG总阳性率为99.74%,TORDibutyryl-cAMP体内CH-IgM总阳性率为4.13%,其中CMV-IgG、TOX-Immunomganetic reduction assayIgG、RV-IgG、HSVⅠ-IgG、HSVⅡ-IgG阳性率分别为85.05%、2.97%、66.13%、72.79%、17.84%,CMV-IgG阳性率最高，TOX-IgG阳性率最低，CMV-IgM、Dolutegravir分子量TOX-IgM、RV-IgM、HSVⅠ-IgM、HSVⅡ-IgM阳性率分别为3.20%、0.09%、0.09%、0.14%、0.09%,CMV-IgM的阳性率最高。不同性别的新生儿与婴幼儿TORCH阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。新生儿CMV-IgG、RV-IgG、HSVⅠ-IgG、HSVⅡ-IgG阳性率高于婴幼儿阳性率(P<0.05),另外新生儿的CMV-IgM、TOX-IgM、RV-IgM、HSVⅠ-IgM阳性率低于婴幼儿的阳性率(P<0.05)。结论 丽水地区新生儿与婴幼儿主要感染是CMV、HSVⅠ、RV,感染模式主要是IgG+IgM-,加强孕前TORCH检测以降低新生儿与婴幼儿TORCH感染率，从而提高新出生人口质量。

目的 探讨白细胞介素-22(IL-22)对高血压小鼠血压和血管功能的影响及其机制。方法 45只SPF级C57BL/6雄性小鼠，随机分成为3组：对照组、模型组和IL-22中和抗体（IL-22 NAb）组，每组各15只。通过血管紧张素II(Ang II)灌注构建高血压小鼠模型，其中模型组和IL-22 NAb组小鼠均按750 ng/（kg·min）输注Ang II,IL-22组小鼠每日腹腔注射IL-22 NAb1.25μg，对照组小鼠注射等量生理盐水。分别于灌注前、Bioelectrical Impedance灌注后第1天、第7天、第14天和第28天测量小鼠的收缩压和舒张压。采用Verhoeff’s Van Gieson(VVG)和Masson染色，评估血管形态和胶原沉积情况。检测小鼠血清IL-6、IL-10、IL-22、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和AZD6738说明书转化生长因子-β(TGF-β)水平。流式细胞术检测IL-22对巨噬细胞极化的影响。结果 与对照组比较，模型组小鼠血清IL-22含量显著升高（P<0.05）；与模型组比较，IL-22 NAb组血清IL-22含量明显降低（P<0.05）。与对照组比较，模型组小鼠的收缩压和舒张压均明显升高，弹力纤维和血管周围胶原沉积（均P<0.05）；与模型组比较，IL-22 NAb组小鼠的收缩压和舒张压均显著降低，弹力纤维和血管周围胶原含量明显降低（均P<0.05）。与对照组比较，模型组小鼠主动脉M1型巨噬细胞数量升高，M2型巨噬细胞数量降低（均P<0.05）；与模型组比较，IL-22 NAb组小鼠M1型巨噬细胞数量降低，M2型巨噬细胞数量升高（均P<0.05）；与对照组比较，模型组小鼠血清IL-6和TNF-α含量显著升高，IL-10和TGF-Dolutegravir说明书β含量降低（均P<0.05）；而与模型组相比，IL-22 NAb组小鼠血清IL-6和TNF-α含量明显降低，IL-10和TGF-β含量升高（均P<0.05）。结论 IL-22通过调控巨噬细胞极化，参与高血压病程和血管重构。

氨苄青霉素是一种β-内酰胺类抗生素，用于治疗和CP-690550 molecular weight预防细菌感染。它是80多年来使用最广泛的抗菌药物，至今仍是最重要的一类抗生素。其作为生长促进剂和化学治疗/预防剂在兽医实践中广泛使用，导致食品中大量残留，对健康造成严重危害。由于动物实验和农业生产中氨苄青霉素的滥用，用简便、灵敏、快速的方法测定氨苄青霉素在生media richness theory物系统中的含量已迫在眉睫。鉴于其药理意义，对其检测和定量研究已做了大量工作。本文综述了近22年来测定氨苄青霉素的方法。依据使用的不同检测体系，对检测方法进行如下分类:分光光度法、比色法、色谱法、表面增强拉曼光谱法、电化学法、化Baf-A1学发光法、荧光法、表面等离子体共振法和光电化学传感法。本综述主旨在于进一步鼓励和启发感兴趣的研究者开发新的方法，为今后氨苄青霉素的检测提供更实用、更成熟的方法。

目的 分析人枯草溶菌素转化酶9抑制剂依洛尤单抗治疗经皮冠状动脉介入术后临床应用价值。方法 连续纳入2020年7月至2021年6月就诊于上海交通大学医学院附属新华医院心血确认细节管内科接受经皮冠状动脉介入术的冠状动CX-5461供应商脉粥样硬化性心脏病患者90例，依据随机数字表法将患者分为试验组及对照组，每组各45例。对照组给予阿托伐他汀钙，试验组在此基础上给予皮下注射依洛尤单抗，治疗3个月。分析受试者治疗前后血脂水平、炎症因子水平及不良反应情况，收集并比较治疗过程中受试者心绞痛发作次数及持续时间。结果 研究发现，两组患者治疗前临床基线资料具有可比性；与治疗前相比，治疗后两组患者低密度胆固醇脂蛋白及总胆固醇均显著下降，高密度胆固醇脂蛋白水平显著升高，且试验组上述指标下降或升高幅度显著高于对照组，差异有显著性（P<0.05）；与治疗前相比，治疗后两组患者肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超敏C反应蛋白均显著下降，且试验组上述指标降幅显著高于对照组；与治疗前相比，治activation of innate immune system疗后两组患者胸痛发作次数及持续时间均显著缩短，且试验组胸痛发作次数及持续时间均显著小于对照组。结论 人枯草溶菌素转化酶9抑制剂依洛尤单抗能够改善PCI术后血脂代谢，抑制机体炎症反应，改善患者临床症状，且不增加不良反应。