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目的:探讨在孕前1周和孕期给予妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus, GDM)大鼠燕麦β-葡聚糖(Oat β-glucan, OG)对胎鼠肠道粘膜屏障发育(物理屏障、化学屏障和免疫屏障)异常的改善作用,为生命早期预防和改善子代肠道健康提供可行的措施和实验室数据。方法:将27只SD雌性大鼠分为正常组、GDM组和GDM+OG组,每组9只。采用8周高脂饮食和孕(Gestational day, GD)3.5时腹腔注射27 mg/Kg链脲佐菌素构建GDM模型,当空腹血糖值为10 mmol/L为模型成功,GDM+OG组为在GDM模型的基础上,在孕前1周和整个孕期给予1.1g/Kg OG,于GD 19.5时麻醉孕鼠取出胎鼠并分离其肠道,观察肠道细胞形态-回肠绒毛长度和结肠隐窝深度(HE染色)、回肠和结肠杯状细胞(AB-PAS染色)和回肠潘氏细胞(荧光桃红染色)的数量,紧密连接蛋白(Claudin1、Claudin1和Occludin)、黏蛋白(Muc2)和抗菌肽(defa6和hamp)的表达,免疫细胞标志物转录水平(树突状细胞、巨噬细胞和T细胞)和相应细胞因子的表达水平。结果:与正常组相比,GDM组GD19.5时胎鼠肠道形态损伤,表现为回肠绒毛、结肠隐窝深度明显缩短,但是物理屏障中未见显著差异,化学屏障的异常包括回肠和结肠中杯状细胞数量的显著减少及Muc2分泌降低,回肠潘氏细胞数量的增加、抗菌肽defa6和hamp的转录水平显著升高,免疫屏障中树突状细胞标记物cd83与T细胞标记物cd3和cd4转录水平显著降低,巨噬细胞标记物cdbiomedical agents68的转录水平显著升高,细胞因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattratctant protein-1, MCP-1)和巨噬细胞炎症蛋白1-α(Macrophage Inflammatory Protein 1α, MIP-1α)的浓度升高,调节激活正常T细胞表达分泌因子(Reduced upon activation nornal T cell expressed andsecreted, RANTES)和嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)浓度降低,结果提示GDM对宫内胎鼠肠道屏障功能造成损伤,孕期宫内环境的变化对子代肠道健康发育造成重要不利影响,孕前和孕期的预防措施至关重要。GDM孕鼠在孕IDN-6556化学结构前和孕期补充OG后,显著改善了胎鼠肠道的形态,包括增加回肠绒毛深度、回肠和结肠中杯状细胞的数量、降低回肠中潘氏细胞数量,促进紧密连接蛋白Claudin5、粘蛋白Muc2表达,降低抗菌肽defa6和hamp的转录水平,促进树突状细胞标记物cd83、T细胞标记物cd3和cd4转录水平,降低巨噬细胞标记物cd68的转录水平,显著减少INCB018424溶解度细胞因子MCP-1和MIP-1α的表达,并促进了RANTES和eotaxin的表达,结果提示孕鼠OG的补充能显著改善异常的GDM胎鼠肠道物理、化学和免疫屏障功能,OG补充的剂量根据中国居民膳食营养素纤维素的推荐摄入量换算所得,即补充到推荐摄入量就可有显著促进子代肠道健康的作用。结论:研究发现孕前一周和整个孕期补充OG,能改善胎鼠肠道形态、物理屏障、化学屏障、免疫细胞、细胞因子表达,以保护胎鼠肠道屏障功能。上述结果为孕前和孕期补充OG促进子代肠道健康提供了一定的研究基础。

目的：分析CT测量膀胱壁厚度（bladder wall thickness,BWT）及前列腺突入host genetics膀胱距离（intravesical prostatic protrusion,IPP）对男性膀胱出口梗阻（bladde购买Naporafenibr outlet oMicrotubule Associat抑制剂bstruction,BOO）的诊断价值。方法：选取江门市中心医院2018年1月—2021年6月收治的41例男性BOO患者作为BOO组，另选取院内同期40例无BOO患者作为无BOO组，分析BWT以及IPP在男性BOO中的诊断价值。结果：BOO组前列腺体积（prostate volume,PV）、血清前列腺特异抗原（prostate specific antigen,PSA）水平高于无BOO组（P <0.05）；两组患者的残余尿量（postvoid residual volume,PVR）比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。BOO组患者的BWT、IPP均大于无BOO组，差异有统计学意义（P <0.05）。BWT、IPP与年龄、PV以及PVR均呈现为正相关关系（P <0.05），但BWT、IPP与PSA均无相关性关系（P> 0.05）。受试者操作特征（ROC）曲线分析显示，BWT对BOO诊断的ROC曲线下面积（AUC）为0.823[95%置信区间（CI）=0.613～0.978,P <0.05]；当BWT≥2.617时，BWT预测BOO的灵敏度为100.00%，特异度为67.1%。IPP对BOO诊断AUC为0.865(95%CI=0.799～0.931,P<0.05)；当IPP≥9.425时，IPP预测BOO灵敏度为83.00%，特异度为100.00%。结论：CT测量BWT、IPP在男性BOO的诊断中具有一定的应用价值，其中BWT、IPP与年龄、PV以及PVR之间均有正相关关系，与PSA则无明显相关性；IPP在BOO的诊断中价值较高，可以作为临床的主要参考。

偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)是一种生长速度较快的多孔菌科(Polyporaceae)白腐菌,对木材和木质素具有较强的分解能力。在真菌中,C2H2型锌指转录因子主要参与调控生长发育、产孢、碳源代谢、致病性和胁迫应答等过程。SFP1蛋白为C2H2型锌指转录因子的裂指蛋白1,已有研究表明,在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和白色念珠菌(Candida albicans)中SFP1锌指转录因子具有调控生长发育、生物膜形成与氧化应激反应等功能,目前在白腐菌中对SFP1蛋白结构和功能的研究尚未开展,有待进行与深入研究。本研究以偏肿革裥菌中Lg-sfp1基因为研究对象,对该基因进行基因克隆、结构鉴定与生物信息学分析,基于同源重组原理构建Lg-sfp1基因敲除载体,运用PEG介导的原生质体转化法得到了△Lg-sfp1基因缺失突变体菌株。通过与野生型(WT)对比分析,初步揭示了Lg-sfp1基因的在偏肿革裥菌中的功能,主要研究结果如下:1、成功克隆并鉴定出Lg-sfp1基因,该基因cDNA全长1947bp。蛋白理化性质结构表明,Lg-sfp1基因编码一个由648个氨基酸组成的亲水性膜内蛋白,蛋白大小为68.27k D,等电点为6.46,不稳定指数为68.04,为不稳定蛋白,脂肪指数为51.20,亲水性平均系数值为-0.61,为亲水性蛋白。蛋白保守结构域预测结果表明,Lg-SFP1蛋白在氨基酸序列的C端含有2个C2H2型锌指结构域,且存在SFP1特征序列,为C2H2型锌指转录因Infection transmission子的裂指蛋白1。Lg-SFP1蛋白进行系统发育树构建表明Lg-SFP1与绒毛栓菌(Trametes pubescens)的SFP1的亲缘关系最近。2、制备偏肿革裥菌原生质体,利用PEG介导的遗传转化法将构建好的敲除载体p KOV21-sfp1转化到原生质体中。经过抗性筛选与PCR检测后得到6株△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株,并对6株△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株进行实时荧光定量法(qRT-PCR)检测Lg-sfp1基因表达量,最终筛选出1株敲除效果最佳的突变体菌株进行后续功能验证。3、Lg-sfp1基因参与调控偏肿革裥菌菌落形态和生长。在PDA培养基中,与野生型菌株相比,△Lg-sfp1基因敲除突变体生长速率下降,菌株生物量减少,且菌落形态变化显著,纵向生长的selleckchem ICI 46474气生菌丝较多,且菌丝体较厚实。以LNAS基本培养基分别培养△Lg-sfp1基因敲除体与野生型菌株,静置培养3天后,分别在0、2、4、6、8、10d提取对应处理的菌丝RNA,利用q RT-PCR检测生长发育过程中5个与生长Imidazole ketone erastin配制发育相关基因的表达量,△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株中5个生长发育与相关基因的表达量与野生型菌株相比均下降。4、Lg-sfp1基因参与调控偏肿革裥菌的胁迫应答。氧化胁迫条件下,在含有低浓度H_2O_2的PDA培养基中,△Lg-sfp1基因敲除突变体的耐受性比野生型低,而随着胁迫因子浓度升高,Lg-sfp1基因敲除突变体的耐受性明显高于野生型。以LNAS基本培养基分别培养△Lg-sfp1基因敲除体与野生型菌株,静置培养3天后,分别在0、2、4、6、8、10d提取对应处理的菌丝RNA。利用q RT-PCR检测6个与胁迫应答相关抗氧化酶基因的表达量,△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株中6个与胁迫应答相关抗氧化酶基因的表达量与野生型菌株相比均上升,结果表明Lg-sfp1基因对抗氧化酶的产生有负调控作用。离子胁迫条件下,在含有不同浓度Na Cl和KCl的PDA培养基中,随着盐胁迫因子浓度升高,△Lg-sfp1基因敲除突变体与野生型的生长速度均在不断的降低,但△Lg-sfp1基因敲除突变体与野生型生长速度相比明显降低。综上所述,本研究成功克隆并鉴定出偏肿革裥菌C2H2型锌指转录因子的裂指蛋白1基因Lg-sfp1,并初步分析了Lg-sfp1基因的功能,拓展了分子生物学水平上对偏肿革裥菌生长发育与胁迫应答机制的研究,为白腐菌中SFP1蛋白与功能研究奠定了有力的理论依据。

牙周炎是一种以PLX-4720作用牙周炎症和牙周附着丧失为特征的慢性炎症性疾病,是口腔中最常见的疾病之一,它由复杂的龈下菌斑生物膜定植引起,通过破坏牙齿支持组织,造成牙槽骨吸收,最终导致牙齿脱落。破骨细胞是参与牙槽骨吸收的主要细胞,是治疗牙周炎的关键靶点。目前牙周炎的治疗主要集中在牙周基础治疗后全身或局部用药,然而虽然常用的药物对控制牙周炎有一定的治疗效果,但它们对全身的副作用明显,不推荐长期使用,因此,寻找一种毒副作用小的药物治疗牙周炎是必要的。有研究发现,辣木叶提取物可以延缓一些慢BioBreeding (BB) diabetes-prone rat性炎症性疾病的发生,如骨关节炎、溃疡性结肠炎等,同时最新研究发现辣木叶单体荭草苷具有良好的抗炎作用,然而,荭草苷对破骨细胞分化的作用,及对体内牙周炎症和牙槽骨吸收的影响尚未见报道。自噬是一种高度保守的分解代谢过程,其活性与m TOR信号通路密切相关,最近有研究发现自噬会促进破骨细胞的形成和分化,造成牙槽骨吸收。因此,在本研究中,我们首次研究荭草苷对破骨细胞分化的作用,及对体内牙周炎症和牙槽骨吸收的影响,并进一步探讨自噬在这个过程中的作用。目的:通过实验研究荭草苷是否通过自噬抑制破骨细胞分化,对体内牙周炎症和牙槽骨吸收产生影响。方法:1、用0μM-80μM浓度的荭草苷处理BMMs 24h、72h、120h,CCK8检测细胞毒性;在破骨细胞分化过程中,选取合适浓度的荭草苷干预,以雷帕霉素促进自噬;TRAP染色检测破骨细胞的分化程度,鬼比环肽染色评估破骨细胞吸收功能,q RT-PCR法检测破骨细胞相关基因的表达,MDC染色检测自噬特异性反应,Western blotting检测自噬相关蛋白及AKT/m TOR信号通路的表达。2、建立牙周炎动物模型,分为空白对照组,牙周炎组和荭草苷组,1个月后处死,HE染色检测药物对各组重要脏器的毒性作用及炎症细胞的表达,q RT-PCR法检测相关炎症因子的表达,Micro-CT扫描牙槽骨并测量近远中骨吸收的情况,TRAP染色检测破骨细胞分化情况,免疫组化评估自噬相关蛋白LC3的表达。结果:1、体外实验结果:(1)0μM-20μM浓度范围内,荭草苷对BMMs细胞活性影响小,细胞存活率大于80%;(2)TRAP染色及鬼笔环肽染色结果显示经荭草苷处理后,TRAP~+多核破骨细胞体积和数目减少,纤维肌动蛋白环周长减小;(3)q RT-PCR结果显示,荭草苷抑制体外破骨细胞相关基因c-Fos、TRAP、DC-STAMP和CTSK的表达;(4)WB和MDC染色结果显示,荭草苷抑制自噬相关蛋白LC3-II、Beclin-1的表达,及细胞内酸性自噬泡的表达;(5)雷帕霉素促进自噬逆转了荭草苷对破骨细胞的抑制作用;(6)荭草苷促进AKT/m TOR信号通路的表达,而加入雷帕霉素后,AKT/m TOR的表达降低。2、体内实验结果:(1)对各组大鼠的重要脏器组织进行HE染色,结果表明各组脏器无器质性病变,荭草苷对实验性大鼠无毒性反应;(2)q RT-PCR结果显示,荭草苷抑制促炎因子TNF-α、IL-1β表达,而促进抗炎因子IL-10的表达;(3)HE染色显示牙周炎组的牙周组织中见大量RSL3的炎性细胞浸润,然而荭草苷组炎症细胞的数量明显减少;(4)Micro-CT结果显示荭草苷能减少实验性大鼠牙槽骨的吸收;(5)TRAP染色结果显示,荭草苷组破骨细胞分化减少;(6)免疫组化结果显示荭草苷抑制自噬蛋白LC3-II的表达。结论:1、在一定浓度范围内,荭草苷的生物安全性好,毒性小;2、体外实验发现荭草苷可以通过自噬影响AKT/m TOR信号通路抑制破骨细胞分化;3、体内实验发现荭草苷可以通过自噬抑制牙周炎症及牙槽骨吸收。

背景：铁死亡是一种区别于凋亡、坏死等新型细胞程序性死亡的方式，主要由累积的脂质过氧化引起，已被证实参与蛛网膜下腔出血后的病理过程。黄芩素是一种铁螯合剂，能够抑制脂质过氧化反应，但其在蛛网selleck Regorafenib膜下腔出血后早期脑损伤中缓解神经元铁死亡的作用仍未明确。目的：探讨黄芩素治疗蛛网膜下腔出血后对神经元铁死亡的影响及机制。方法：提取孕16-17 d C57BL/6L胎鼠大脑皮质神经元细胞，运用血红蛋白刺激原代神经元模拟体外蛛网膜下腔出血模型。采用CCK-8法检测5,15,25,50,100μmol/L黄芩素作用24 h后原代神经元细胞的活力，确定黄芩素的最适浓度。然后将原代神经元细胞分为对照组、血红蛋白组、血红蛋白+黄芩素组，利用试剂盒检测细胞内活性氧和丙二醛水平，RT-PCR检测铁死亡相关标记物PTGS2、SLC7A11、谷胱甘肽过氧化物酶4的mRNA表达；进一步将原代神经元细胞分为对照组、SLC7A11抑制剂Erastin组、血红蛋白组、血红蛋白+黄芩素组、血红蛋白+黄芩素+Erastin组，Western blot检测铁死亡相关标记物SLC7A11和谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达。结果与结论：(1)选取25μmol/L黄芩素作为后续实验浓度；(2)与血红蛋白组相比，血红获悉更多蛋白+黄芩素组丙二醛和活性氧水平显著下降(P <0.05)；(3)与血红蛋白组相比，血红蛋白+黄芩素组PTGS2的m RNA表达显著下降，SLC7A11和谷胱甘肽过氧化物酶4的m RNA表达显著升高(P <0.000 1)；(4)SLC7A11抑制剂Erastin能在一定程度上逆转黄芩HBeAg-negative chronic infection素改善的铁死亡作用(P <0.05)；(5)结果表明，黄芩素可通过SLC7A11/GPX4通路缓解蛛网膜下腔出血后神经元细胞的铁死亡。

目的 为临床安全使用血小板生成素受体激动剂类药物罗米司亭和艾曲泊帕提供参考。方法 利用美国FDA不良事件报告系统(FAERS)收集罗米司亭和艾曲泊帕从在美国上市至2022年9月30日的药物不良事件(ADE)报告，利用报告比值比(ROR)法与英国药品和健康产品管理局的综合标准法对2种KD025药物的ADE信号进行分析。结果 共收集到罗米司亭和艾曲泊帕的ADE报告分别为14 021、4 431份，性别构成均为女性多于男性。经信号筛选，得到罗米司亭563个ADE信号，累及25个系统器官分类(SOC)；艾曲泊帕433个ADDigital histopathologyE信号，累及26个SOC。2种药物发生频次最多的ADE信号均为血小板计数降低(分别为2 060、1 585例)，在其药品说明书中均有记CX-5461试剂载；按信号强度排序，罗米司亭的血小板生成素水平异常(ROR值为2 268.85)和艾曲泊帕的登革病毒检测阳性(ROR值为954.50)位列第一，且均未被其药品说明书记载。结论 罗米司亭和艾曲泊帕的ADE主要累及血液及淋巴系统，且新的可疑高风险信号较多。

目的 探究糖尿病视网膜病变患者血清血清胱抑素C、同型半胱氨酸及血脂的表达及相关分析。方法 选取2021年1月—2022年1月诏安县医院收治的2型糖尿病患者201例，根据是否患有视网膜病变以及视网膜病变是否有增生将其分为2型糖尿病组（73例）、非增生组（63例）和增生组（65例），并选取同期于本院进行体检的60例健康者作为健康组。对比4组血清胱抑素C、同型半胱氨酸、血脂总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇及高密度脂蛋白胆固醇的水平，分析其与患者视网膜病变的关系和患视网膜病变的影响因素。结果 2型糖尿病组、非增生组和增生组患者的血清胱抑素C、同型半胱氨酸、血脂总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇及高Antibiotic-siderophore complex密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于健康组人群，差异有统计学意义（P<0.05）。Spearman相关性结果显示，血清胱抑素C、同型半胱氨酸、血脂总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇及高密度脂蛋白胆固醇水平与患者是否伴获悉更多有视网膜病变呈现正相关关系（P<0.05）。Logistic回归分析显示，血清胱抑素C、同LGK-974浓度型半胱氨酸、血脂总胆固醇、三酰甘油是患视网膜病变的独立危险因素（P<0.05）。结论 血清胱抑素C、同型半胱氨酸、血脂总胆固醇、三酰甘油的高表达水平是患者患视网膜病变的危险因素，且其水平在糖尿病视网膜病变患者中随病情的严重程度而增加，可作为观察期病情严重程度的指标。

肥胖(obesity)是由于体内脂肪过量堆积引起的慢性疾病,是导致2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)的主要因素。T2DM是由于胰岛素抵抗或胰岛素分泌相对不足引起的慢性疾病。研究表明,肥胖和T2DM密切相关:一方面肥胖是导致T2DM的主要因素;另一方面T2DM会加剧肥胖程度,加深肥胖并发症的风险。T2DM和肥胖并发症严重影响现代人的生活质量和寿命。如何防治这两种疾病已引起全世界的高度关注。现有治疗手段无法有效降低患病率和死亡率,因此,发现新的与肥胖和T2DM相关的药物靶点对于防治这两种疾病具有重要的意义。胰淀素受体(Amylin Receptors,AMYRs)能同时发挥降糖和减重insulin autoimmune syndrome的生理作用,因此在治疗肥胖和T2DM方面具有良好的前景。胰淀素和鲑鱼降钙素(salmon calcitonin,s CT)能作用于AMYRs,产生降低血糖和减轻体重的效果,且现有药物如卡格列肽、KBP-042等分别基于上述两者改造得到,因此探究两者与AMYRs之间的作用机制,对于开发治疗肥胖和T2DM的药物有重要价值。分子动力学模拟已成功地运用于探究药物与靶标作用机制的预测及活性评价。在本工作中,我们从结合热力学和解离动力学两方面探究鼠胰淀素(rat amylin,r Amy)和s CT与III型胰淀素受体(Amylin3 Receptors,AMY_3R)之间的作用机制及关键残基,并基于此进行多肽序列优化。本论文主要包括三个方面的工作:第一部分,为了探究AMY_3R与多肽激动剂(r Amy和s CT)作用的热力学机制,我们首先使用分子动力学模拟、残基能量分解和丙氨酸扫描突变的方法识别了多肽(r Amy和s CT)与AMY_3R作用的的关键残基。结果显示,AMY_3R的W79、S129、N135、Y146、L291、V293、E294、W361、H377等,r Amy的A8、Q10、R11、L12、A13、N14、L16、R18等,s CT的V8、L9、L12、Q14、E15、L16、H17、L19等为关键残基。随后,通过主成分分析、静态网络分析和氢键占有率分析等探究作用模式,结果显示,多肽(r Amy和s CT)与AMY_3R分别能够形成广泛的氢键作用和稳定的盐桥与π-π堆积作用,如Q10~(r Amy)-L291、Q14~(s CT)-V293/E294等形成氢键,K11~(s CT)-E294、R18~(r Amy)-E294等形成盐桥,Y37~(r Amy)-W79和Y22~(s CT)-Y41形成π-确认细节π堆积作用。这些关键残基和相互作用的识别,为靶向AMYRs的药物筛选以及基于多肽(r Amy和s CT)为模板的多肽序列优化提供了良好的结构基础。第二部分,为了探究AMY_3R和多肽(r Amy和s CT)作用的动力学机制,我们使用随机加速分子动力学模拟预测多肽(r Amy和s CT)的解离路径,结果显示它们从螺旋1和2之间离开结合口袋前往膜外。随后通过拉伸分子动力学模拟探究多肽(r Amy和s CT)解离时中间态的关键残基和作用机制以及解离过程的平均力势。结果显示,AMY_3R的W79、S129、N135、Y146、L291、V293、E294、W361、H377等,r Amy的A8、Q10、R11、L12、F15、L16、V17、R18等,s CT的V8、L9、G10、K11、L12、L16、H17、L19等为解离时关键残基,并通过形成氢键、盐桥和π-π堆积作用阻碍多肽(r Amy和s CT)从AMY_3R的解离,如N14~(r Amy)-E294、V8~(s CT)-H377等形成氢键;R18~(r Amy)-D97、K11~(s CT)-E294和E15~(s CT)-K141形成盐桥,Y37~(r Amy)-W79和Y22~(s CT)-Y41形成π-π堆积作用。第三部分,r Amy存在一些不足之处,例如活性较低、稳定性较差、半衰期较短,这些缺点限制了它的应用。因此采用随机突变和分子动力学模拟的方法对r Amy进行序列优化,以得到稳定性高、亲和力强的多肽激动剂。首先,对r Amy中部α螺旋区域进行随机突变,然后计算突变能并进行毒性预测,初步筛选出27条突变型多肽。然后,对这27条多肽进行100 ns分子动力学模拟和模拟轨迹的分析,评价它们的稳定性,并挑选出了8条稳定性高的多肽。最后对这8条肽进行300 ns分子动力学模拟并计算结合自由能,结果显示在计算水平上这8条多肽亲和力均强于野生型r Amy。我们通过对多肽稳定性和亲和力评价,最终筛选出A8L、Q10D、Q10N、A13D、A13M、A13Y、N14F和L16I这8条多肽。综上所述,本文从结合热力学和解离动力学两方面探究多肽(r Amy和s CT)与AMY_3R之间的作用Canagliflozin化学结构机制以及关键残基,并对r Amy进行了序列优化,为肥胖和T2DM药物研发提供理论基础。

近年来,甘肃陇东地区苹果产业发展迅速,苹果品质优异,已成为黄土高原地区最具潜力的鲜食苹果产区。为优化甘肃陇东地区苹果品种结构,扩大该地区苹果产业的发展规模,本研究于2021年～2022年,系统调查研究了甘肃陇东地区41个苹果品种的果实品质特性,通过分析内在品质和外在品质,并进行综合评价,从果实品质角度来筛选出陇东地区表现优异的苹果品种。获得以下主要结果:1、参试的早中熟品种中,‘金世纪’、‘密歇嘎拉’、‘樱桃嘎拉’的成熟期在8月下旬,L*值较高,内在品质差异不大,可滴定酸含量在0.5%左右,固酸比较低,果实风味偏酸,香气成分以醇类物质为主。综合评价值较好,均在0.5左右。‘金世纪’的果个大于其余2个嘎拉优系。2、参试的中熟和中晚确认细节熟品种当中,‘华红’的可溶性固形物含量最高为15.38%,固酸比适中,抗氧化物质含量较高,Vc、总酚、类黄酮的含量分别为7.27 mg·100g~(-1)、1.41 mg·g~(-1)、1.34 mg·g~(-1),‘凉香’的L*值较高,外在品质优异,内在品质较好。两个品种的综合评价值均较高,分别为0.546和0.458。从综合评价值来看,中晚熟品种的综合评价值平均值最低。3、对参试的富士优系比较中,早熟富士与晚熟富士品质方面的差异主要体现在外观上,3个早熟富士的L*和a*值较晚熟富士低,果面着色较淡。‘烟富3号’作为晚熟富士中的对照品种,外在品质优异,内在品质居中,香气成分以醇类物质为主,在晚熟富士优系当中有较高的综合评价值。‘长富vaginal microbiome2号’的可溶性selleck激酶抑制剂固形物含量和总糖含量较高,果面着色较好,‘烟富10号’的a*值较高,果形指数为0.91,内在品质居中,综合评价值高于对照。4、参试的其他晚熟品种中,‘伊美’、‘瑞香红’可溶性固形物和可溶性糖含量较高,风味浓郁,a*值显著高于对照,分别为75.49、73.75,‘瑞香红’果形指数为1.04,二者的品质优异,且综合评价突出。‘福丽’的固酸比最高为56.49,风味酸甜可口,抗氧化物质含量丰富,在陇东地区具有较大发展潜力。此外,晚熟黄绿色品种的品质突出,综合评价值优于大多数红色品种。其中‘瑞雪’果肉细脆,风味酸甜汁液多,作为黄绿色品种在市场上具有较大竞争力。

为探究一氧化氮（Nitric oxide，NO）介导宰后牦牛肉成熟过程中低氧诱导因子-1α（hypoxiainduciblefactor-1α，HIF-1α）对糖酵解水平和嫩度的影响及调控机制。本研究以牦牛背最长肌为研究对象，采用0.9% 生理盐水、200μmol/LS-亚硝基谷胱甘肽（S-Nitrosoglutathione，GSNO）、200μmol/LGSNO+ 100μmol/LYC-1（HIF-1α抑制剂）注射处理，分别成熟3、6、9、12、24、72 h，分析NO含量、HIF-1α、有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（MAPK/ERK）通路水平、糖酵解相关酶活、剪切力等相关指标。结果表明，宰后3～72h，GSNO组NO含量显著高于对照组（P<0.05），并在6 h达到峰值；宰后3～72h，GSNO组ERK1/2和p-ERK1/2表达水平高于对照组和GSNO+PD98059组（ERK抑制剂）（P<0.05），并在24 h 达到峰值；宰后3～72 h，GSNO组HIF-1α表达水平显著高于对照组和GSNO+YC-1组（P<0.05），并在12 h达到峰值；GSNO组的己糖激酶（Hexokinase，HK）、丙酮酸激酶（Pyruvatekinase，PK）、乳酸脱氢酶（Lactatedehydrogenase，LDH）分别在9、12 和12 h 达到最大值（P<0.05），并显著高于对照组；GSNO组糖酵解潜力在3、12、72 h 显著高于其余两组（P<0.05）；GSNO组pH值在6、9、72 h 显著低于其余两组（P<0.05）；此外，通过测定剪切力和HE染色评估牦牛嫩度，GSNO组剪切力、肌纤维面积、直径低于其余selleck Alisertib两组，GSNO组肌纤维细胞之间的空隙高于其余两VX-661试剂组。综上所述，宰后成熟初期，NO通过介导HIFmedication persistence-1α表达水平进而激活MAPK/ERK信号通路以及上调糖酵解酶HK、PK、LDH 活性，加快牦牛肉宰后糖酵解速率，加速pH值在正常范围内降低，进而改善牦牛肉嫩度。因此，该研究结果可能作为影响宰后牦牛肉嫩度的一个潜在调控机制，为完善宰后成熟过程中糖酵解与嫩度的理论体系提供一定的理论基础。