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目的:调查青光眼患者的社会人口学资料、临床检查情况、抑郁情购买NSC 119875况及视觉相关生存质量现状;分析青光眼患者视觉相关生存质量的影响因素;探讨青光眼患者抑郁与视觉相关生存质量间的内在关系。方法:本研究采用横断面研究方法,以2021年10月至2022年9月沈阳市爱尔眼科医院确诊的青光眼患者为研究对象,采用视功能障碍人群健康情况调查表,包括一般情况调查表、临床检查情况、抑郁自评量表(SDS)和国家眼科研究所视功能调查量表(NEI-VFQ-25),对其进行问卷调查。使用统计软件SPSS19.0及AMOS24.0对数据进行分析,采用分层逐步多元线性回归分析青光眼患者视觉相关生存质量的影响因素,采用结构方程模型分析抑郁与视觉相关生存质量的路径关系。结果:青光眼患者视觉相关生存质量平均得分为(70.1PR-171临床试验2±11.90)分;SDS量表的平均得分为(38.27±10.98)分,抑郁发生率为15.87%;分层逐步多元线性回归分析显示心理学指标是主导影响因素(R~2=25.1%),其次是临床学指标(R~2=12.9%)和社会人口学因素(R~2=11.3%),其中心理学指标抑郁是不同类型青光眼视觉相关生存质量的危险因素;结构方程模型显示,躯体性障碍(β=-3.23,P<0.05)、抑郁的心理障碍(β=-2.40,P<0.05)及精神运动性障碍(β=-10.27,P<0.01)对视觉相关生存质量有负向预测的作用。根据标准化路径系数,精神运动性障碍(标准化β=-0.37)对视觉相关生存质量的预测作用最强,其次是抑郁的心理障碍(标准化β=-0.28)。结论:沈阳市青光眼患者视觉相关生存质量处于中等水平,且抑郁是影响患者视觉相关生存质量的主导因素。此外,在抑郁与视觉相关生存质量的路径关系中,躯体性障碍、抑郁的心理障碍及精神运动性障碍对视觉相关生存质量有负向影响作用,其中精神运动性障碍的作用最强。青光眼治疗是一个复杂的过程,需要多学科协同配合,医护人员在对青光眼患者实施综合型干预保护措施时,不仅要关注疾病,还要重视患者的心理健康,以减少抑郁等负面情绪intramuscular immunization的发生,从而提升患者的视觉相关生存质量。

【研究背景】苦荞(Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn),属于蓼科荞麦属,是一种富含生物活性物质的药食兼用作物。食用苦荞制品对身体健康有益,特别是对糖尿病、高血压、心脑血管疾病等有积极的预防作用。它具有很强的生态适应性,多种植在土地贫瘠的山区,为农民脱贫致富起积极作用。但杂草的危害日趋严重,已经严重影响到其品质和产量,成为制约我国苦荞产业发展的重要障碍。【材料与方法】本研究选用低毒高效的除草剂(苯磺隆)作为筛选药剂,以川荞2号为实验材料,研究其对苯磺隆的反应机制。使用传统的化学诱导方法,以50 mmol/L的甲基磺酸乙酯(EMS)诱变川荞2号苦荞种子,使用高浓度苯磺隆(田间推荐cutaneous autoimmunity计量)从M1代起Alpelisib浓度正向筛选抗性种质。利用生理生化检测技术和selleck CP-690550转录组测序技术,挖掘苦荞代谢相关候选基因,分析苯磺隆对苦荞的毒害机理以及苦荞对苯磺隆的抗性反应机制。【结果与分析】筛选获得5个M2代抗性株系。用166mg/L苯磺隆分别喷施川荞2号和突变体材料,30天后,荞麦的叶绿素含量,株高和鲜重显著降低,且突变植株受到抑制程度较川荞2号轻。对苯磺隆喷施3天后的植株进行转录组测序分析结果如下:苯磺隆介导的下调基因数量高于上调基因。编码光系统I,光系统II和细胞素b6复合体的基因都显著下调,这与生理检测结果一致。KEGG富集分析表明,下调基因显著富集在光合作用和生物合成相关途径、脂肪酸和碳水化合物生物合成途径。相反,发现许多参与转录、外源代谢、解毒和抗氧化的基因上调。如在调节除草剂解毒过程中的编码细胞色素P450单加氧酶、谷胱甘肽S-转移酶、UDP糖基转移酶、羧酸酯酶和ABC转运蛋白的基因都有不同程度升高。与抗性相关的转录因子家族,如WRKY、AP2、MYB、NAC、BZIP等,都受到了明显的调控作用。KEGG富集分析表明,上调基因显著富集在花青素生物合成和类黄酮生物合成途径。【结论】这些结果表明,苯磺隆喷施植株会导致与光合作用、生物合成以及能量代谢等相关基因的表达量降低,造成植株光合作用,伸长生长受到抑制。而植株可通过提高氧化应激、防御和解毒过程等相关基因表达量来提高植株抗性,适应环境生长。本研究通过分析苯磺隆对苦荞的毒害作用,筛选苦荞抗药性相关基因,为解析苦荞抗除草剂机制,为苦荞抗除草剂品种的选育提供理论基础和参考依据。

目的:探讨基于分子分型的子宫内膜癌各亚组的临床病理学特征及各亚组的预后情况。方法:通过检索以下数据库:Pub Med;Embase;Web of Science;The Cochrance Library;中国知网(CNKI);万方医学数据库;维普数据库,收集自2013年1月至2022年10月,子宫内膜癌患者行分子分型分组的相关文献,通过阅读全文,严格按照纳入及排除标准,进行筛选文献,提取相关数据,质量评估。使用STATA17.0软件和Rev Man5.4软件进行meta分析。结果:本研究共纳入17篇,共计6997例子宫内膜癌患者且均进行分子分型。其中POLE mut亚组544例(7.77%),MMR-d亚组2029例(29.00%),NSMP亚组3233例(46.21%)、p53abn亚组1191例(17.02%)。进一步分析数据得出:(一)POLE mut 型:(1)以NSMP型为对照组,POLE mut型的OS、DSS以及PFS合并HR值均小于1,提示POLE mut型相比于NSMP型更有利于患者预后。(OS:HR=0.76,95%CI[0.46,1.52];DSS:HR=0.44,95%CI[0.15,1.24];PFS:HR=0.28,95%CI[0.12,0.65])(2)POLE mut型子宫内膜癌临床病理学特征:更多表现为子宫内膜样癌(合并OR值为0.71,95%CI[0.55,0.92],P值=0.009),差异有统计学意义;肿瘤分化程度更多SB431542 molecular weight表现为G3(合并OR值为1.59,95%CI[1.24,2.03],P值=0.0002),差异有统计学意义;更多为FIGOⅠ期(合并OR值为0.33,95%CI[0.22,0.49],P值<0.00001),差异有统计学意义;肿瘤局限于黏膜层或侵及肌层<1/2更常见(合并OR值为0.71,95%CI[0.55,0.91],P值=0.006),差异有统计学意义;淋巴结转移较少见(合并OR值为0.31,95%CI[0.19,0.53],P值<0.00001),差异有统计学意义。而POLE mut型子宫内膜癌与淋巴脉管浸润(OR=1.06,95%CI[0.86,1.31],P值=0.59)和术后辅助治疗(OR=1.18,95%CI[0.94,1.49],P值=0.16)未见明显相关性。(二)MMR-d 型:(1)以NSMP型为对照组,MMR-d型的OS、DSS以及PFS合并HR值均大于1,提示MMR-d型相比于NSMP型患者预后更差。(OS:HR=1.57,95%CI[1.28,1.92];DSS:HR=1.67,95%CI[1.14,2.46];PFS:HR=1.14,95%CI[0.89,1.46])(2)MMR-d型子宫内膜癌临床病理学特征:更多为子宫内膜样癌(合并OR值为0.51,95%CI[0.42,0.62],P值<0.00001),差异有统计学意义;更多为FIGOⅡ-Ⅳ期(合并OR值为1.14,95%CI[1.00,1.30],P值=0.04),差异有统计学意义;多伴有淋巴脉管浸润(合并OR值为1.79,95%CI[1.58,2.03],P值<0.00001)及肿瘤侵及肌层≥1/2(合并OR值为1.19,95%CI[1.03,1.37],P值=0.02)且多数需要术后辅助治疗(合并OR值为1.23,95%CI[1.07,1.41],P值=0.004),差异有统计学意义。而在淋巴结转移(合并OR值为1.16,95%CI[0.92,1.46],P值=0.22)及肿瘤分级(合并OR值为1.28,95%CI[0.91,1.78],P值=0.15)未见显著相关性。(三)NSMP 型:NSMP型子宫内膜癌临床病理学特征:更多为子宫内膜癌样癌(合并OR值为0.16,95%CI[0.10,0.25],P值<0.00001)、肿瘤分级G1-2(合并OR值为0.17,95%CI[0.AG-22112,0.23],P值<0.00001)、FIGOⅠ期(合并OR值为0.67,95%CI[0.48,0.95],P值<0.00001),差异有统计学意义。淋巴脉管浸润(合并OR值为0.36,95%CI[0.32,0.42],P值<0.00001)、淋巴结转移(合并OR值为0.71,95%CI[0.56,0.90],P值=0.005)且术后辅助治疗(合并OR值为0.63,95%CI[0.53,0.75],P值<0.00001)均较少,差异有统计学意义。而在肌层浸润深度(合并OR值为0.77,95%CI[0.56,1.08],P值=0.13)未见相关性,但可靠性差。(四)p53abn 型:(1)以NSMP型为对照组,p53abn型的OS、DSS以及PFS合并HR值均大于1,提示p53abn型相比于NSMP型患者预后更差。(OS:HR=2.86,95%CI[2.26,3.61];DSS:HR=2.84,95%CI[1.51,5.35];PFS:HR=1.67,95%CI[1.19,2.34])(2)p53abn型子宫内膜癌临床病理学特征:更多为非子宫内膜样癌(合并OR值为19.02,95%CI[10.20,35.46],P值<0.00001)、肿瘤分级G3(合并OR值为12.00,95%CI[7.15,20.15],P值<0.00001)、FIGOⅡ-Ⅳ期(合并OR值为3.61,95%CI[3.04,4.30],P值<0.00001)、淋巴脉管浸润(合并OR值为2.55,95%CI[2.16,3.03],P值<0.00001)且多伴淋巴结转移(合并OR值为2.13,95%CI[1.58,2.87],P值=0.59)、较多需要术后辅助治疗(合并OR值为4.00,95%CI[3vocal biomarkers.08,5.18],P值<0.00001),差异有统计学意义。而肌层浸润深度(合并OR值为1.31,95%CI[0.90,1.91],P值=0.16)未见相关性,但可靠性差。结论:1.基于分子分型的子宫内膜癌各亚组,具有不同临床病理特征,其中POLE mut型主要表现为子宫内膜样癌、低分化(G3)、肌层浸润<1/2、不伴淋巴结转移;MMR-d型主要表现为子宫内膜样癌、FIGOⅡ-Ⅳ期、淋巴脉管浸润、肌层浸润≥1/2、术后多数需要辅助治疗;NSMP型主要表现为子宫内膜样癌、中高分化(G1-2)、FIGOⅠ期,而淋巴脉管浸润、淋巴结转移及术后辅助治疗较少;p53ban型主要表现为非子宫内膜癌样癌、低分化(G3)、FIGOⅡ-Ⅳ期、淋巴脉管浸润、淋巴结转移且术后多数需要辅助治疗。2.POLE mut型可能有利于子宫内膜癌患者的预后且在四种亚组中预后最好;MMR-d型和p53abn型相较于NSMP型的预后可能较差,且p53abn型预后最差;NSMP型对子宫内膜癌的预后是否有价值,需进一步深入研究。

魔芋Entinostat葡甘聚糖(KCL13900GM)由于其独特的胶凝特性,通常被用作质构增强剂。本研究旨在研究不同浓度的KGM(MP重量的1/40、1/20和1/10)对凡纳滨对虾肌原纤蛋白(MP)凝胶和消化特性的影响。KGM改进了MP的理化性质,MP的二级和三级结构、乳化性能、粒径和蛋白质聚集受到显著影响。相比之下,适量浓度的KGM(MP重量的1/20,MK20)修饰的MP表现出较高的储能模量、损耗模量和热稳定性。这导致了热诱导MPmixed infection凝胶的保水能力、三维空间网络稳定性以及凝胶强度的提高。此外,KGM对MP的修饰调节了其凝胶的消化行为。与对照组相比,MK20的消化率和水解度分别提高了16.63%和1.32倍。然而,过量的KGM可能会导致形成粘性水凝胶,并渗透到MP中,导致其结构降解、松散,降低对消化酶的敏感性。分子对接结果表明,KGM主要依靠自身羟基结构通过氢键与MP相互作用。这种相互作用破坏了MP的α-螺旋结构并促进其结构膨胀,最终影响MP及其热诱导凝胶的理化及功能特性。

目的 评价蒲地蓝消炎口服液联合注射用炎琥宁治疗小儿病毒性肺炎对患儿血清炎症因子水平的改善情况。方法 选取2021年1月至2022年3月青岛市即墨区人民医院收治的100例病毒性肺炎患儿，按随机数字表法分为观察组和对照组，各50例。观察组采取蒲地蓝消炎口服selleck化学液联合注射用炎琥宁治疗，对照组采取注射用炎琥宁单独治疗，对比两组患儿退热、啰音消失时间，治疗效果，肺功能指标，血清炎症因子水平。nano-microbiota interaction结果 观察组患儿退热、啰音消失时间均短于对照组（均P <0.05）；观察组患儿治疗总有效率高于对照组（P <0.05）；治疗后，两组患儿第1秒用力呼气容积（FEV1）、用力肺活量（FVC）、FEV1/FVC均升高，且观察组均高于对照组（均P <0.05）；治疗后，两组患儿超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL购买Torin 1-6）均降低，且观察组均低于对照组（均P <0.05）。结论 蒲地蓝消炎口服液联合注射用炎琥宁治疗小儿病毒性肺炎的效果十分显著，能够减轻机体炎症反应，提高肺功能，加快症状消失进程。

目的:探讨在孕前1周和孕期给予妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus, GDM)大鼠燕麦β-葡聚糖(Oat β-glucan, OG)对胎鼠肠道粘膜屏障发育(物理屏障、化学屏障和免疫屏障)异常的改善作用,为生命早期预防和改善子代肠道健康提供可行的措施和实验室数据。方法:将27只SD雌性大鼠分为正常组、GDM组和GDM+OG组,每组9只。采用8周高脂饮食和孕(Gestational day, GD)3.5时腹腔注射27 mg/Kg链脲佐菌素构建GDM模型,当空腹血糖值为10 mmol/L为模型成功,GDM+OG组为在GDM模型的基础上,在孕前1周和整个孕期给予1.1g/Kg OG,于GD 19.5时麻醉孕鼠取出胎鼠并分离其肠道,观察肠道细胞形态-回肠绒毛长度和结肠隐窝深度(HE染色)、回肠和结肠杯状细胞(AB-PAS染色)和回肠潘氏细胞(荧光桃红染色)的数量,紧密连接蛋白(Claudin1、Claudin1和Occludin)、黏蛋白(Muc2)和抗菌肽(defa6和hamp)的表达,免疫细胞标志物转录水平(树突状细胞、巨噬细胞和T细胞)和相应细胞因子的表达水平。结果:与正常组相比,GDM组GD19.5时胎鼠肠道形态损伤,表现为回肠绒毛、结肠隐窝深度明显缩短,但是物理屏障中未见显著差异,化学屏障的异常包括回肠和结肠中杯状细胞数量的显著减少及Muc2分泌降低,回肠潘氏细胞数量的增加、抗菌肽defa6和hamp的转录水平显著升高,免疫屏障中树突状细胞标记物cd83与T细胞标记物cd3和cd4转录水平显著降低,巨噬细胞标记物cdbiomedical agents68的转录水平显著升高,细胞因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattratctant protein-1, MCP-1)和巨噬细胞炎症蛋白1-α(Macrophage Inflammatory Protein 1α, MIP-1α)的浓度升高,调节激活正常T细胞表达分泌因子(Reduced upon activation nornal T cell expressed andsecreted, RANTES)和嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)浓度降低,结果提示GDM对宫内胎鼠肠道屏障功能造成损伤,孕期宫内环境的变化对子代肠道健康发育造成重要不利影响,孕前和孕期的预防措施至关重要。GDM孕鼠在孕IDN-6556化学结构前和孕期补充OG后,显著改善了胎鼠肠道的形态,包括增加回肠绒毛深度、回肠和结肠中杯状细胞的数量、降低回肠中潘氏细胞数量,促进紧密连接蛋白Claudin5、粘蛋白Muc2表达,降低抗菌肽defa6和hamp的转录水平,促进树突状细胞标记物cd83、T细胞标记物cd3和cd4转录水平,降低巨噬细胞标记物cd68的转录水平,显著减少INCB018424溶解度细胞因子MCP-1和MIP-1α的表达,并促进了RANTES和eotaxin的表达,结果提示孕鼠OG的补充能显著改善异常的GDM胎鼠肠道物理、化学和免疫屏障功能,OG补充的剂量根据中国居民膳食营养素纤维素的推荐摄入量换算所得,即补充到推荐摄入量就可有显著促进子代肠道健康的作用。结论:研究发现孕前一周和整个孕期补充OG,能改善胎鼠肠道形态、物理屏障、化学屏障、免疫细胞、细胞因子表达,以保护胎鼠肠道屏障功能。上述结果为孕前和孕期补充OG促进子代肠道健康提供了一定的研究基础。

目的：分析CT测量膀胱壁厚度（bladder wall thickness,BWT）及前列腺突入host genetics膀胱距离（intravesical prostatic protrusion,IPP）对男性膀胱出口梗阻（bladde购买Naporafenibr outlet oMicrotubule Associat抑制剂bstruction,BOO）的诊断价值。方法：选取江门市中心医院2018年1月—2021年6月收治的41例男性BOO患者作为BOO组，另选取院内同期40例无BOO患者作为无BOO组，分析BWT以及IPP在男性BOO中的诊断价值。结果：BOO组前列腺体积（prostate volume,PV）、血清前列腺特异抗原（prostate specific antigen,PSA）水平高于无BOO组（P <0.05）；两组患者的残余尿量（postvoid residual volume,PVR）比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。BOO组患者的BWT、IPP均大于无BOO组，差异有统计学意义（P <0.05）。BWT、IPP与年龄、PV以及PVR均呈现为正相关关系（P <0.05），但BWT、IPP与PSA均无相关性关系（P> 0.05）。受试者操作特征（ROC）曲线分析显示，BWT对BOO诊断的ROC曲线下面积（AUC）为0.823[95%置信区间（CI）=0.613～0.978,P <0.05]；当BWT≥2.617时，BWT预测BOO的灵敏度为100.00%，特异度为67.1%。IPP对BOO诊断AUC为0.865(95%CI=0.799～0.931,P<0.05)；当IPP≥9.425时，IPP预测BOO灵敏度为83.00%，特异度为100.00%。结论：CT测量BWT、IPP在男性BOO的诊断中具有一定的应用价值，其中BWT、IPP与年龄、PV以及PVR之间均有正相关关系，与PSA则无明显相关性；IPP在BOO的诊断中价值较高，可以作为临床的主要参考。

偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)是一种生长速度较快的多孔菌科(Polyporaceae)白腐菌,对木材和木质素具有较强的分解能力。在真菌中,C2H2型锌指转录因子主要参与调控生长发育、产孢、碳源代谢、致病性和胁迫应答等过程。SFP1蛋白为C2H2型锌指转录因子的裂指蛋白1,已有研究表明,在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和白色念珠菌(Candida albicans)中SFP1锌指转录因子具有调控生长发育、生物膜形成与氧化应激反应等功能,目前在白腐菌中对SFP1蛋白结构和功能的研究尚未开展,有待进行与深入研究。本研究以偏肿革裥菌中Lg-sfp1基因为研究对象,对该基因进行基因克隆、结构鉴定与生物信息学分析,基于同源重组原理构建Lg-sfp1基因敲除载体,运用PEG介导的原生质体转化法得到了△Lg-sfp1基因缺失突变体菌株。通过与野生型(WT)对比分析,初步揭示了Lg-sfp1基因的在偏肿革裥菌中的功能,主要研究结果如下:1、成功克隆并鉴定出Lg-sfp1基因,该基因cDNA全长1947bp。蛋白理化性质结构表明,Lg-sfp1基因编码一个由648个氨基酸组成的亲水性膜内蛋白,蛋白大小为68.27k D,等电点为6.46,不稳定指数为68.04,为不稳定蛋白,脂肪指数为51.20,亲水性平均系数值为-0.61,为亲水性蛋白。蛋白保守结构域预测结果表明,Lg-SFP1蛋白在氨基酸序列的C端含有2个C2H2型锌指结构域,且存在SFP1特征序列,为C2H2型锌指转录因Infection transmission子的裂指蛋白1。Lg-SFP1蛋白进行系统发育树构建表明Lg-SFP1与绒毛栓菌(Trametes pubescens)的SFP1的亲缘关系最近。2、制备偏肿革裥菌原生质体,利用PEG介导的遗传转化法将构建好的敲除载体p KOV21-sfp1转化到原生质体中。经过抗性筛选与PCR检测后得到6株△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株,并对6株△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株进行实时荧光定量法(qRT-PCR)检测Lg-sfp1基因表达量,最终筛选出1株敲除效果最佳的突变体菌株进行后续功能验证。3、Lg-sfp1基因参与调控偏肿革裥菌菌落形态和生长。在PDA培养基中,与野生型菌株相比,△Lg-sfp1基因敲除突变体生长速率下降,菌株生物量减少,且菌落形态变化显著,纵向生长的selleckchem ICI 46474气生菌丝较多,且菌丝体较厚实。以LNAS基本培养基分别培养△Lg-sfp1基因敲除体与野生型菌株,静置培养3天后,分别在0、2、4、6、8、10d提取对应处理的菌丝RNA,利用q RT-PCR检测生长发育过程中5个与生长Imidazole ketone erastin配制发育相关基因的表达量,△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株中5个生长发育与相关基因的表达量与野生型菌株相比均下降。4、Lg-sfp1基因参与调控偏肿革裥菌的胁迫应答。氧化胁迫条件下,在含有低浓度H_2O_2的PDA培养基中,△Lg-sfp1基因敲除突变体的耐受性比野生型低,而随着胁迫因子浓度升高,Lg-sfp1基因敲除突变体的耐受性明显高于野生型。以LNAS基本培养基分别培养△Lg-sfp1基因敲除体与野生型菌株,静置培养3天后,分别在0、2、4、6、8、10d提取对应处理的菌丝RNA。利用q RT-PCR检测6个与胁迫应答相关抗氧化酶基因的表达量,△Lg-sfp1基因敲除突变体菌株中6个与胁迫应答相关抗氧化酶基因的表达量与野生型菌株相比均上升,结果表明Lg-sfp1基因对抗氧化酶的产生有负调控作用。离子胁迫条件下,在含有不同浓度Na Cl和KCl的PDA培养基中,随着盐胁迫因子浓度升高,△Lg-sfp1基因敲除突变体与野生型的生长速度均在不断的降低,但△Lg-sfp1基因敲除突变体与野生型生长速度相比明显降低。综上所述,本研究成功克隆并鉴定出偏肿革裥菌C2H2型锌指转录因子的裂指蛋白1基因Lg-sfp1,并初步分析了Lg-sfp1基因的功能,拓展了分子生物学水平上对偏肿革裥菌生长发育与胁迫应答机制的研究,为白腐菌中SFP1蛋白与功能研究奠定了有力的理论依据。

牙周炎是一种以PLX-4720作用牙周炎症和牙周附着丧失为特征的慢性炎症性疾病,是口腔中最常见的疾病之一,它由复杂的龈下菌斑生物膜定植引起,通过破坏牙齿支持组织,造成牙槽骨吸收,最终导致牙齿脱落。破骨细胞是参与牙槽骨吸收的主要细胞,是治疗牙周炎的关键靶点。目前牙周炎的治疗主要集中在牙周基础治疗后全身或局部用药,然而虽然常用的药物对控制牙周炎有一定的治疗效果,但它们对全身的副作用明显,不推荐长期使用,因此,寻找一种毒副作用小的药物治疗牙周炎是必要的。有研究发现,辣木叶提取物可以延缓一些慢BioBreeding (BB) diabetes-prone rat性炎症性疾病的发生,如骨关节炎、溃疡性结肠炎等,同时最新研究发现辣木叶单体荭草苷具有良好的抗炎作用,然而,荭草苷对破骨细胞分化的作用,及对体内牙周炎症和牙槽骨吸收的影响尚未见报道。自噬是一种高度保守的分解代谢过程,其活性与m TOR信号通路密切相关,最近有研究发现自噬会促进破骨细胞的形成和分化,造成牙槽骨吸收。因此,在本研究中,我们首次研究荭草苷对破骨细胞分化的作用,及对体内牙周炎症和牙槽骨吸收的影响,并进一步探讨自噬在这个过程中的作用。目的:通过实验研究荭草苷是否通过自噬抑制破骨细胞分化,对体内牙周炎症和牙槽骨吸收产生影响。方法:1、用0μM-80μM浓度的荭草苷处理BMMs 24h、72h、120h,CCK8检测细胞毒性;在破骨细胞分化过程中,选取合适浓度的荭草苷干预,以雷帕霉素促进自噬;TRAP染色检测破骨细胞的分化程度,鬼比环肽染色评估破骨细胞吸收功能,q RT-PCR法检测破骨细胞相关基因的表达,MDC染色检测自噬特异性反应,Western blotting检测自噬相关蛋白及AKT/m TOR信号通路的表达。2、建立牙周炎动物模型,分为空白对照组,牙周炎组和荭草苷组,1个月后处死,HE染色检测药物对各组重要脏器的毒性作用及炎症细胞的表达,q RT-PCR法检测相关炎症因子的表达,Micro-CT扫描牙槽骨并测量近远中骨吸收的情况,TRAP染色检测破骨细胞分化情况,免疫组化评估自噬相关蛋白LC3的表达。结果:1、体外实验结果:(1)0μM-20μM浓度范围内,荭草苷对BMMs细胞活性影响小,细胞存活率大于80%;(2)TRAP染色及鬼笔环肽染色结果显示经荭草苷处理后,TRAP~+多核破骨细胞体积和数目减少,纤维肌动蛋白环周长减小;(3)q RT-PCR结果显示,荭草苷抑制体外破骨细胞相关基因c-Fos、TRAP、DC-STAMP和CTSK的表达;(4)WB和MDC染色结果显示,荭草苷抑制自噬相关蛋白LC3-II、Beclin-1的表达,及细胞内酸性自噬泡的表达;(5)雷帕霉素促进自噬逆转了荭草苷对破骨细胞的抑制作用;(6)荭草苷促进AKT/m TOR信号通路的表达,而加入雷帕霉素后,AKT/m TOR的表达降低。2、体内实验结果:(1)对各组大鼠的重要脏器组织进行HE染色,结果表明各组脏器无器质性病变,荭草苷对实验性大鼠无毒性反应;(2)q RT-PCR结果显示,荭草苷抑制促炎因子TNF-α、IL-1β表达,而促进抗炎因子IL-10的表达;(3)HE染色显示牙周炎组的牙周组织中见大量RSL3的炎性细胞浸润,然而荭草苷组炎症细胞的数量明显减少;(4)Micro-CT结果显示荭草苷能减少实验性大鼠牙槽骨的吸收;(5)TRAP染色结果显示,荭草苷组破骨细胞分化减少;(6)免疫组化结果显示荭草苷抑制自噬蛋白LC3-II的表达。结论:1、在一定浓度范围内,荭草苷的生物安全性好,毒性小;2、体外实验发现荭草苷可以通过自噬影响AKT/m TOR信号通路抑制破骨细胞分化;3、体内实验发现荭草苷可以通过自噬抑制牙周炎症及牙槽骨吸收。

背景：铁死亡是一种区别于凋亡、坏死等新型细胞程序性死亡的方式，主要由累积的脂质过氧化引起，已被证实参与蛛网膜下腔出血后的病理过程。黄芩素是一种铁螯合剂，能够抑制脂质过氧化反应，但其在蛛网selleck Regorafenib膜下腔出血后早期脑损伤中缓解神经元铁死亡的作用仍未明确。目的：探讨黄芩素治疗蛛网膜下腔出血后对神经元铁死亡的影响及机制。方法：提取孕16-17 d C57BL/6L胎鼠大脑皮质神经元细胞，运用血红蛋白刺激原代神经元模拟体外蛛网膜下腔出血模型。采用CCK-8法检测5,15,25,50,100μmol/L黄芩素作用24 h后原代神经元细胞的活力，确定黄芩素的最适浓度。然后将原代神经元细胞分为对照组、血红蛋白组、血红蛋白+黄芩素组，利用试剂盒检测细胞内活性氧和丙二醛水平，RT-PCR检测铁死亡相关标记物PTGS2、SLC7A11、谷胱甘肽过氧化物酶4的mRNA表达；进一步将原代神经元细胞分为对照组、SLC7A11抑制剂Erastin组、血红蛋白组、血红蛋白+黄芩素组、血红蛋白+黄芩素+Erastin组，Western blot检测铁死亡相关标记物SLC7A11和谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达。结果与结论：(1)选取25μmol/L黄芩素作为后续实验浓度；(2)与血红蛋白组相比，血红获悉更多蛋白+黄芩素组丙二醛和活性氧水平显著下降(P <0.05)；(3)与血红蛋白组相比，血红蛋白+黄芩素组PTGS2的m RNA表达显著下降，SLC7A11和谷胱甘肽过氧化物酶4的m RNA表达显著升高(P <0.000 1)；(4)SLC7A11抑制剂Erastin能在一定程度上逆转黄芩HBeAg-negative chronic infection素改善的铁死亡作用(P <0.05)；(5)结果表明，黄芩素可通过SLC7A11/GPX4通路缓解蛛网膜下腔出血后神经元细胞的铁死亡。