目的 观察火针对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及软骨组织p38的影响,探讨火针对KOA起效的机制。方法 抽签法将15只SD大鼠均分至3组(5只/组),分别标为空白组、模型组与火针组。除空白组大鼠外,其余动物均建立KOA模型。火针组采用毫火针点刺治疗,隔日1次,治疗2周。ELISA法分析大鼠血清TNF-α含量,膝关节软骨组织内p38 mRNA表达水平用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测。结果 模型组大鼠血清TNCompound C生产商F-α含量相较于空白组升高明显(P<0.01),膝关节软骨组织p38 mRNA相对表达量亦有增加,差异具统计学意义(P<0.05);与Novel PHA biosynthesis模型组相比,火针组血清TNF-α明显降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),p38 mRNA表达减少,差异同具有统计学意义(P<0.05)。结论火针Baricitinib molecular weight可通过降低外周血内TNF-α的含量,抑制软骨组织内p38的基因表达对膝骨性关节炎起治疗作用。
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基于网络药理学与实验验证探讨连翘苷治疗脓毒症的作用及机制
目的:探讨连翘苷治疗脓毒症的作用机制。方法:利用网络药理学预测连翘苷治疗脓毒症的潜在靶点,构建“连翘苷-共同靶点-疾病”可视化网络图,确立连翘苷治疗脓毒症的蛋白互作关系网络(PPI);并对潜在靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,了解连翘苷治疗脓毒症可能的生物进程及通路。通过分子对接检验连翘苷与核心基因的结合活性。通过腹腔注射脂多糖(LPS)复制脓毒症大鼠模型,给与连翘苷进行干预,通过反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测连翘苷抗脓毒症作用。结果:网络药理学分析表明,连翘苷治疗脓毒症的核心基因为SRC、AKT1、RHOA、CASP3和HSP90AA1等,GO富集分析结果表明连翘苷主要通过影响蛋白水解、细胞迁移的正调节、凋亡过程的负调节等生物进程;发挥丝氨酸型内肽酶活性、酶结合、相同的蛋白质结合等分子功能;以及细胞外泌体、细胞外区域、质膜等细胞组分,进而发挥抗脓毒症的作用,其作用可能与PI3K-AKT信号通路、IL-17信号通路、Rap1信号通路、糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、脂质和动脉粥样硬化等通路相关。分子对接结果显示,连翘苷与以上核心靶点均有良好的结合活性。动物实验结果显示,与正常对照组比Z-IETD-FMK研究购买较,模型对照组大鼠肺组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、SRC、RHOA、CASP3、HSP90AA1 mRNA表MK-2206半抑制浓度达均immunocompetence handicap显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,连翘苷10 、20、40 mg/kg组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、SRC、RHOA、CASP3、HSP90AA1 mRNA表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:运用网络药理学预测了连翘苷治疗脓毒症的核心靶点及信号通路,并通过体内实验进行相关验证,为深入探讨连翘苷治疗脓毒症的作用机制提供参考依据。
枳壳黄酮类化合物提取、功效分析及产品研发
枳壳中有丰富的黄酮类化合物,且其具有降血脂、selleck VX-445抗疲劳等功效,药用价值很高。但是枳壳作为常用理气药多以饮片形式冲泡服用,活性物质溶出率低,限制了其更广阔的商业价值。同时枳壳品种众多,其中有着重要功效的黄酮类化合物的含量差异较大,限制了其作用的发挥。若能从枳壳中提取出高纯度黄酮并将其运用于抗肿瘤功能性食品的研究,将有重要的意义。本课题从重庆22个枳壳样本中筛选出优质品种,对其中的黄酮类化合物进行提取、纯化,并对其进行结构分析和活性研究,开发出一款枳壳黄酮保健饮料,为枳壳的综合利用与开发提供参考。1枳壳黄酮类化合物的提取和纯化工艺研究通过高效液相色谱检测法筛选出优Alpelisib供应商质枳壳样品。结合单因素实验和响应面实验,使用超声辅助法提取枳壳黄酮类化合物的最佳工艺条件为:超声时间20.39 min,液固比35:1(m L/g),酒精浓度79.36%,该条件下黄酮类化合物提取率为16.87%。实验从6种不同型号的大孔树脂中筛选出纯化枳壳黄酮类化合物性能最优的D101型树脂,其最佳纯化条件为:吸附时间4.5 h,解吸浓度90%,解吸液体积与树脂质量比为30:1,解吸时间2.5 h,解吸率为77.1%。各因素对枳壳黄酮类化合物纯化的影响主次顺序为:吸附时间>解吸液体积与树脂质量比>解吸附时间>解吸时乙醇浓度。枳壳黄酮类化合物的纯度由8.23%上升到63.5%,较未纯化前提升了7.7倍。2枳壳黄酮类化合物的自由基清除能力、抗肿瘤活性研究首先考察了枳壳黄酮类化合物对DPPH自由基的清除能力,IC_(50)值为232.6μg/m L。采用MTT(噻唑蓝)实验对枳壳黄酮类化合物进行体外抗肿瘤活性研究,结果显示枳壳黄酮类化合物对结直肠癌(HCT116,HCT-8)细胞,胃癌(CA133,SCC15)细胞均有一定的抑制作用,呈现浓度依赖性,其中对HCT116细胞的抑制效果最好,IC_(50)值为317.2μg/m L。以HCT116细胞为模型进行了克隆形成实验,并采用Annexin V-FITC/PI双染色法,发现随着黄酮浓度的提升,HCT116的体外增殖比例显著降低,且枳壳黄酮类化合物能诱导HCT116细胞的早期凋亡。3枳壳黄酮保健饮料的工艺研究通过响应面实验,确定了枳壳黄酮保健饮料的最优工艺。最佳配方为枳壳黄酮类化合物2.5%,蜂蜜7%,柠檬酸0.04%,复配稳定剂的最佳比例为卡拉胶0.02%,黄原胶0.05%,羧甲基纤维素0.01%。此时枳壳黄酮保健饮料的口味优良、质地均匀,稳定性好。以维生素C作阳性对照,验证了枳壳黄酮保健饮料对DPPH自由基的清除能力,同时进行理化指标和微生物的检测。研究表明,饮料的自由基清除能力与其中黄酮提取物的浓度呈正相关性。在黄酮类化合物的添加量为2.5%时,枳壳黄酮保健饮料对DPPH自由基清除率为84%。与传统水提法相比,超声波辅助乙醇法具备节省时间,步骤简单的优点。通过大孔树脂纯化,进一步提高了枳壳黄酮类化合物中的黄酮含量。在此基础上进行了抗肿瘤、自由基清除能力的试验,说明该提取方法没有损伤黄酮类化合物的活性。最Insulin biosimilars后研发出一款质地稳定,酸甜可口的枳壳黄酮保健饮料。
lncRNA MALAT1对哮喘小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响
目的:检测长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis Filter mediaassociated in lung denocarcinoma transcript 1,MALAT1)对哮喘小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响。方法:将 6~8 周龄雄性BALB/c小鼠随机分成对照组和哮喘组。用卵清蛋白诱导小鼠支气管哮喘模型,HE染色和PAS染色观察小鼠肺组织病理改变,流式细胞术检测小鼠脾细胞中的Th17细胞和Treg细胞,实时荧光定量PCR检测脾组织中的lncRNA MALAT1的表达水平。结果:与对照组相比,哮喘小鼠气道炎症变化明显,支气管周围存在明显炎症细胞浸润,管壁增厚,气道上皮细胞破坏或不规则。哮喘组小鼠脾组织中Th17细胞比例显著升高(P<0.01),Th17细胞的关键转录因子维甲酸相关孤儿核受体C(retinoic acid receptor related orphan C,Rorc)表达上调(P<0.05),而Treg细胞比例显著下降(P<0.01),其关键转录因子叉状头/翼状螺旋转录因子(forkhead/selleck GSK126winged helix R428小鼠transcriptional factor P3,Foxp3)表达下调(P<0.05);脾组织lncRNA MALAT1相对表达量显著上升(P<0.01),与Th17细胞比例呈正相关(r = 0.64,P<0.05),与Treg细胞呈负相关(r = -0.73,P<0.05);而且MALAT1的表达与Rorc表达呈正相关(r = 0.65,P<0.05),与Foxp3表达呈负相关(r = - 0.60,P<0.05)。结论:MALAT1与哮喘小鼠Th17/Treg细胞的失衡密切相关,靶向于MALAT1可能有助于改善哮喘小鼠Th17/Treg平衡。
水苏糖对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用
目的:探究水苏糖对溃疡性结肠炎(UC)的干预作用。方法:采用葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液灌胃诱导建立小鼠溃疡性结肠炎模型。将小鼠随机分为5组:生理盐水组、DSS模型组、水苏糖低剂量组、水苏糖中剂量组、水苏糖高剂量组。通过检测小鼠体质量、便血等疾病活动指数及结肠长度、大体形态损伤等指标,分析水苏糖对小鼠结肠炎的干预作用。通过测定小鼠结肠组织髓过氧化物酶(MPO)含量、血清中IL-1β等细胞因子的分泌水平及NF-κB信号关键蛋白表达,探讨其可能机制。结果:与生理盐水组相比,模型组小鼠体质量显著下降,出现腹泻、便血等症Proteomics Tools状,MPO含量及炎症因子表达均显著上升。与模型组相比,水苏糖各剂量组均能显著改善DSS诱导的UC模型小鼠的疾病症状及组织病理学病Pexidartinib分子式变,降低MPO含量,减少炎症因子释放,以中、高剂量组的作用较为selleck明显,同时,水苏糖显著抑制了NF-κB信号途径关键分子p65的表达。结论:水苏糖对UC具有良好的改善作用,该作用可能与其降低IL-1β等炎症细胞因子含量及抑制NF-κB信号途径有关。
来氟米特联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎疗效分析
目的 探讨来氟米特(LEF)联合甲氨蝶呤(MTX)治疗类风湿性关节炎的疗效.方法 选取类风湿性关节炎患者70例,随机分为A组、B组,每组35例.A组采用来氟米特联合甲氨蝶呤治疗,B组采用甲氨蝶呤治疗,两组均连续治疗半年,比较两组患者的临床症状、炎症指标改善情况及不良反应发生率.结果 治疗半年后,两组患者关节肿胀数、关节压痛数及晨僵持续时间较治疗前均改善,且A组关节肿胀、关节疼痛个数少于B组,晨僵时间A组短于B组(P<0.05);两组患者血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)及血清白介素-6(IL-6)较治疗前均改善,且A组较B组更低(P<0.05);A组治疗总routine immunization有效率94.29%,高于B组的77购买RAD001.14%(P<0.05),两Empagliflozin采购组患者并发症发生率组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 来氟米特联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎可明显改善患者的临床症状,与单用甲氨蝶呤相比临床疗效更显著,且不会增加不良反应,安全性高,值得临床推广.
燮理汤对溃疡性结肠炎小鼠TLR4/NF-κB/HIF-1α通路的影响
目的:探讨燮理汤对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用及其可能的作用机制。方法:60只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶组(0.6 g·kg~(-1))和燮理汤低DNA Purification、中、高剂量组(1.67、3.34、6.68 g·kg~(-1)),以DSS溶液自此网站由饮用周期循环的方式复制慢性UC小鼠模型。除正常组外,其余各组小鼠采用浓度为1.5%的DSS循环饮用3个周期(1~7 d,22~28 d,43~49 d),其余时间予以蒸馏水(8~21 d,29~42 d,50~63 d),待第1次循DNA/RNA Synthesis抑制剂环结束后,给予相应的药物治疗42 d。实验过程中每日记录小鼠一般状况、体质量及疾病活动指数(DAI)评分的改变。治疗结束后,采集血清和结肠组织标本,测量结肠长度,计算肠重指数和结肠黏膜损伤(CMDI)评分;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理形态学;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量、结肠长度和IL-10含量均显著降低(P<0.01),DAI评分、肠重指数、CMDI评分、IL-6、TNF-α含量及TLR4、NF-κB、HIF-1α mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);结肠黏膜结构破坏,出现炎性细胞浸润。与模型组比较,燮理汤各剂量组小鼠体质量、结肠长度和IL-10含量均明显升高(P<0.05,P<0.01),DAI评分、肠重指数和CMDI评分、IL-6、TNF-α含量及TLR4、NF-κB、HIF-1α mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);结肠黏膜病理损伤明显减轻。结论:燮理汤能明显改善DSS诱导的UC小鼠的炎症反应,其作用机制可能与调节TLR4/NF-κB/HIF-1α信号通路有关。
饲养密度和栏舍面积对仔猪生长性能、肠道健康和免疫功能的影响
本试验旨在研究饲养密度和栏舍面积对仔猪生长性能、肠道健康和免疫功能的影响。试验采用2×3双因素设计,其中栏舍面积分别为2和4 m~2,饲养密度分别为0.33、0.67和1.00 m~2/头。选取198头健康状态良好、胎次相近的28日龄三元杂(杜×长×白)去势仔猪,平均体重为(10.32±0.18) kg,随机分为6组,每组6个重复。试验期为30 d。结果表明:1)饲养密度为0.67和1.00 m~2/头组的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和末重显著高于饲养密度为0.33 m~2/头组(P<0.05)。栏舍面积为4 m~2组的ADFI和ADG显著高于栏舍面积为2 m~2组(P<0.05)。饲养密度为0.33 m~2/头组的空肠绒毛高度/隐窝深度显著低于饲养密度为0.67和1.00 m~2/头组(P<0.05)。2)饲养密度为0.33 m~2/头组的血清白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于饲养密度为0.67 m~2/头组(P<0.05)。3)饲确认细节养密度和栏舍面积对仔猪空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、组织蛋白酶E(CathE)和黏蛋白-2(MUC-2)含量存在显著交互效应(P<0.05)。饲养密度为0.33 m~2/头组的空肠黏膜MUC-2含量显著低于饲养密度为0.67和1.00 m~2/头组(P<0.05)。4)栏舍面积为2 m~2组的空肠黏膜闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的mRNA相对表达量显著高于栏舍面积为4 m~2组(P<0.05)。5)饲养密度和栏舍面积对仔猪回肠黏膜干扰素-γ(IFN-γ)、骨髓分化因子88(Myd88)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体4(TLR4)的mRNA相对表达量存在显著交互效应(P<0.05)。栏舍面积为2 m~2组的回肠黏膜Myd88、IL-10和TLR4的mRNA相对表达量显著低于栏舍面积为4 m~2组(P<0.05)。饲养密度为1.00 mNSC125066 molecular weight~2/头组的回肠黏膜Myd88和TLR4的mRNA相对表达量显著低于饲养密度为0.33和0.67 m~2/头组(P<0.05)。由此可见,10~23 kg的仔猪适宜饲养密度为0.6Affinity biosensors7~1.00 m~2/头,适宜栏舍面积为4 m~2。饲养密度和栏舍面积可能通过影响肠道屏障功能以及炎症相关途径的信号通路影响仔猪肠道健康和免疫功能。
类风湿关节炎患者血清中硬骨素的相关研究
目的 探讨硬骨素(SOST)在不同性别、年龄段的类风湿关节炎(RA)患者血清中的变化,以及与RA患者实验室指标的相关性。方法此网站 选取2015年9月—2020年1月我院收治的324例RA患者[RA组,按性别分为RA(M、F)亚组,按年龄分为RA·Y、M、O亚组]和297例健康体检者[HC组,同样按上述方法分组,分为HC(M、F)亚组,HC·Y、M、O亚组]的血标本和相关实验室指标;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测每组血浆中SOST表达水平。采用SPSS17.0统计软件进行分析,计量资料组间比较采用Wilcoxon秩和检验、单因素方差分析,变量间的相关关系采用Spearman相关分析。结果 RA组SOST、ESR、CRP、RF、A-CCP均高于HC组(均P<0.05);按性别分组后,RA(M)组、RA(F)组SOST、ESR、CRP、RF、A-CCP均高于HC(M)组、HC(F)组,HC(M)组SOST高于HC(F)组,RA(M)组SOST高于RA(F)组(均P<0.05);按年龄分组后,RA·M、O组SOST血清表达水平均高于HC·Y、M、O组、RA·Y组,且R更多A·O组高于RA·M组,HC·M、O、RA·Y组SOST血清表达水平均高于HC·Y组,且HC·O组高于HC·M、RA·Y组,RA·Y、M、O组ESR、CRP、RF、A-CCP水平均高于HC·Y、M、O组,RA·Y组ESR、CRP水平低于RA·M、O组(均P<0.05)。Spearman相关分析发现RA组、RA(M)组、RA(F)组、RA·Y组、RA·M组、RA·O组SOST与年龄均呈正相关,RA组、RA(M)组SOST与ESR、CRP呈正相关。Tissue Culture结论 SOST在RA患者血清中的表达水平显著升高,不同性别、年龄间的表达存在差异,且与年龄、炎症指标呈正相关,提示SOST可能参与了RA的发生发展,调控其炎症反应。
针刺联合耳穴压豆治疗冠心病稳定性心绞痛临床研究
目的:观察针刺联合耳穴压豆治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)稳定性心绞痛的临床疗效及对患者心功能和内皮功能的影响。方法:选取2021年1月至2022年4月河南中医药大学第一附属医院治疗的冠心病稳定性心绞痛患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例。对照组给予西医常规治疗,观察组在对照组治疗的基础上给予针刺联合耳穴压豆治疗。观察两组患者治疗前后心绞痛发作持续时间、每周心绞痛发作频次、心绞痛疼痛程度及心功能[左室射血分Nirogacestat配制数(left ventricular ejection fractioselleck激酶抑制剂n, LVEF)、左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter, LVEDD)、心搏量(cardiac stroke volume, SV)]和内皮功能[血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)、一氧化氮(nitric oxide, NO)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)]的变化情况。结果:观察组有效率为98.0%,对照组有效率为78.0%,观察组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后心绞痛发作持续时间短于对照组,心绞痛发作频次和心绞痛疼痛程度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后LVEF、SV和NO水平高于对照组,LVEDD、AngⅡ和ET-1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组不良反应发生率为18.0%,观察组不良反应发生率为16.0Healthcare acquired infection%,两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针刺联合耳穴压豆可明显缓解冠心病稳定性心绞痛患者临床症状,改善患者心功能及内皮功能。