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目的：探究45℃“足三里”温和灸对高脂血症大鼠腹主动脉慢性炎性反应的作用及不同灸程的效果。方法：SD大鼠随机分为空白组（2周）、模型组（2周）、艾灸组（2周）和空白组（4周）、模型组（4周）、艾灸组（4周），每组6只，高脂饲养喂养8周制备高脂血症大鼠慢性炎性反应模型。艾灸组于大鼠双侧“足三里”进行45℃温和灸干预，10 min/次，1次/d，连续干预2周或4周。HE染色法观察各组大鼠腹主动脉形态变化，ELISA法检测各组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血Filter media管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)含量及腹主动脉中一氧化氮（NO）、ox-LDL、ET-1含量；Western blot和实时荧光定量PCR法检测各组大鼠腹主动脉IL-6、TNF-α的蛋白和mRNA表达；免疫荧光检测各组大鼠腹主动脉IL-6的阳性表达。结果：与空白组相比，模型组大鼠血清LDL、TC、TG、ox-LDL、VCAM-1、ICAM-1、IL-6、TNF-α、ET-1含量，腹主动脉ox-LDL、ET-1含量及腹主动脉IL-6、TNF-α蛋白及mRNA表达升高（P<0.01,P<0.05,P<0.001），血清HDL含量，腹主动脉NO含量降低（P<0.01,P<0.05）；模型组大鼠腹主动脉呈暗粉色，血管外膜、中膜、内膜层纹理粗糙且内皮层毛糙。与模型组（2周）相比，艾灸组（2周）大鼠血清LDL、ICAM-1、ET-1，腹主动脉ox-LDL含量降低（P<0.05），血清IL-6、TNF-α含量，腹主动脉NO含量升高（P<0.01,P<0.05）；艾灸组（2周）大鼠腹主动脉血管壁较模型组光滑，细胞核及周围组织结构也相对清晰。与模型组（4周）相比，艾灸组（4周）大鼠血清LDL、TC、TG、VCAM-1、ICAM-1、IL-6、TNF-α、ET-1、ox-LDL，腹主动脉ox-LDL、ET-1含量，RepSox腹主动脉IL-6、TNF-α蛋白及mRNA表达降低（P<0.05,P<0.01），血清HDL含量，腹主动脉NO含量升高（P<0.05,P<0.01）；艾灸组（4周）大鼠腹主动脉血管壁较光滑，细胞核及周围组织结构相对清晰。与艾灸组（2周）相比，艾灸组（4周）大鼠血清HDL含量升高（P<0.05），血清TNF-α含量，腹主动脉IL-6蛋白及阳性表达降低（P<0.001,P<0.05）；艾灸组（4周）大鼠腹主动脉的血管壁更加光滑，细胞核及周围组织也更清晰。结论：45℃温和灸“足三里”可以通过调节血脂、血管舒缩功能、黏附分子、炎性因子等改善高脂饮食诱导的血管内皮损伤和炎性反应，以4周艾灸的作用效果Gefitinib NMR更佳。

目的 探讨结直肠GSK126作用癌肝转移患者癌组织中白细胞介素-18(IL-18ankle biomechanics)、促肝再生磷酸酶蛋白3(PRL-3)表达与临床病理特征及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶B(AKT)蛋白水平的关系。方法 选取2019年10月至2021年10月于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院行同期切除术的85例结直肠癌肝转点击此处移患者(肝转移组)的癌组织样本及癌旁正常组织(距肿瘤切缘4 cm),以及同期65例未发生肝转移结直肠癌患者(未肝转移组)的癌组织为研究对象。免疫组织化学S-P法检测不同组织中IL-18、PRL-3阳性表达率，Western blot检测癌组织中PI3K、p-AKT相对表达水平，分析IL-18、PRL-3与患者临床病理的关系及其与PI3K、p-AKT表达的相关性。结果 与未肝转移组比较，肝转移组TNM分期IV期、低分化程度比例较高(P<0.05)。肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K、p-AKT蛋白阳性表达率高于其癌旁正常组织和未肝转移患者癌组织，且未肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K、p-AKT蛋白阳性表达率高于肝转移患者癌旁正常组织(P<0.05)。相关性分析示，肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3表达与PI3K、p-AKT均呈正相关(P<0.05);未转移癌组织中IL-18表达与PI3K、p-AKT均呈正相关(P<0.05),PRL-3表达与p-AKT均呈正相关(P<0.05),且IL-18与PRL-3呈显著正相关(P<0.05)。结论 IL-18、PRL-3可能通过激活PI3K/AKT信号通路从而参与结直肠癌肝转移过程。

目的 探讨住院抑郁障碍患者自杀倾向的相关因素。方法 选取2017年11月至2018年12月在MK-4827首都医科大学附属北京安定医院住院治疗的1 160例抑郁障碍患者为研究对象，按照有无自杀倾向（包括自杀观念与自杀未遂）将其分为自杀倾向组（n=431）和无自杀倾向组（n=729）。比较两组患者的临床特征，采用二项Logistic回归分析住院抑郁障碍患者自杀倾向的selleck NMR相关因素。结果 单因素分析显示，两组患者的性别、冲动性格、精神活性物质依赖史、自杀家族史、重大精神创伤史、抑郁严重程度比较，差异有统计学意义（χ~2=5.841、33.806、5.869、5.585、5.499、33.311;P<0.05）。二项Logistic回归分析显示，冲动性格（OR=2.445,95%CI=1.802～3.319）、有精神活性物质依赖史（OR=2.254,95%CI=1.038～4.894）、有重大精神创伤史（OR=1.533,95%CI=1.056～2.226）、抑郁症状严重程度较重（OR=2.754,95%CI=2.002～3.790）是住院抑郁障碍患者自杀倾向的影响因素（P<0.05）。结论 冲动性格、精神活性物质依赖史、重大精神创伤史、严重的抑郁症状可能增加住院抑郁障碍患者的自杀Medication-assisted treatment倾向。

研究背景近年来,慢性肾脏病对人们健康的影响愈发严重,严重影响人们日常生活,引发全球广泛关注,氟氯氰菊酯作为环境内分泌干扰物,能够影响肾脏系统,但有关氟氯氰菊酯暴露造成肾脏功能损伤的研究较少。大量研究表明,氧化应激、炎症反应在肾脏损伤过程中有着重要作用。研究表明,在肾脏损伤过程中,肾脏组织氧化应激水平增高,炎症相关因子表达升高,MAPK信号通路被激活,同时GADDD45B基因与肾脏损伤过程密切相关。本研究通过建立氟氯氰菊酯致大鼠损伤模型,探究GADD45B基因介导的p38MAPK/JNK通路在氟氯氰菊酯致大鼠肾脏组织及肾小管上皮细胞损伤过程中的作用机制,为后续氟氯氰菊酯致肾脏损伤的研究提供理论依据。研究目的本研究通过建立氟氯氰菊酯诱导大鼠肾小管损伤的体内模型,探究GADD45B基因和JNK/p38MAPKMirdametinib抑制剂信号通路在氟氯氰菊酯致肾脏功能损伤中的作用机制,为后续阐明毒理机制并寻找氟氯氰菊酯致肾脏损伤的早期生物标志物,为防治环境内分泌干扰物引起的肾脏病变提供理论依据。研究方法1.建立氟氯氰菊酯致大鼠肾小管损伤体内模型选取SPF级Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为空白对照组、低剂量染毒组、中剂量染毒组、高剂量染毒组,隔天灌胃染毒,每周称量大鼠体质量,连续28天,麻醉处死,取大鼠肾脏组织。2.观察氟氯氰菊酯对大鼠肾脏损伤变化对大鼠进行每日体重监测,观察大鼠体重变化情况,同时注意氟氯氰菊酯是否影响大鼠肾脏脏器系数;HE染色观察氟氯氰菊酯致大鼠肾脏组织形态结构变化;透射电镜观察氟氯氰菊酯致大鼠肾脏细胞超微结构的病理损伤变化;LDH试剂盒检测氟氯氰菊酯染毒后大鼠肾脏组织LDH的含量变化。3.检测氟氯氰菊酯对大鼠肾脏氧化应激损伤和肾功能指标变化通过氧化应激试剂盒检测氟氯氰菊酯染毒后大鼠肾脏MDA和SOD的变Knee biomechanics化情况;通过Elisa试剂盒检测氟氯氰菊酯染毒后大鼠血清中血尿素氮和血清肌酐含量的变化。4.检测氟氯氰菊酯对大鼠肾脏炎症水平以及GADD45B表达变化通过Western blot、q-PCR检测炎症因子IL-6和TNF-α表达水平的变化;通过Western blot、q-PCR以及免疫组化检测氟氯氰菊酯染毒后对大鼠GADD45B基因表达水平的变化。5.检测氟氯氰菊酯染毒对大鼠肾脏损伤中MAPK通路关键因子的表达变化通过Western blot、q-PCR对MAPK通路关键因子及磷酸化指selleck PR-171标的m RNA及蛋白相对表达水平进行检测,并通过免疫荧光双标染色法检测GADD45B基因与MAPK通路关键因子共表达情况。研究结果1.氟氯氰菊酯致大鼠肾脏损伤情况HE染色结果显示,对照组中肾小管和肾小球形态结构无异常;低剂量组肾小球开始出现轻度萎缩,肾小管管腔出现水肿扩张;中剂量组肾小球明显萎缩,肾小管管腔明显扩张;高剂量组肾小球重度萎缩,肾小管扩张更加严重,肾间质可见炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞大量脱落。透射电镜结果显示,对照组中肾小管上皮细胞排列规则,线粒体和细胞核结构均正常,低剂量组基底膜有所增厚,足突轻度肿胀,线粒体出现肿胀;中剂量组基底膜明显增厚,足突发生融合,线粒体明显肿胀;高剂量组基底膜重度增厚,界限不清,足突大片融合,线粒体严重肿胀,出现致密沉积物。LDH检测结果显示,与对照组相比,低、中、高剂量组LDH含量明显升高,且呈剂量依赖性(P<0.05)。染毒4周后,各染毒组大鼠的体质量变化无统计学意义(P>0.05);各染毒组大鼠肾脏组织重量和脏器系数变化无统计学意义(P>0.05)。说明氟氯氰菊酯能够诱导大鼠肾脏组织损伤。2.氟氯氰菊酯致大鼠肾脏氧化应激损伤和肾功能指标变化情况肾功能指标检测结果显示,与对照组相比,中、高剂量组BUN、Cr明显升高(P<0.05)。氧化应激指标检测结果显示,与对照组相比,低、中、高剂量组SOD活力明显下降,中、高剂量组MDA含量明显上升(P<0.05)。说明氟氯氰菊酯能够诱导大鼠肾脏组织发生氧化损伤和肾功能障碍。3.氟氯氰菊酯致大鼠肾脏炎症水平以及GADD45B表达变化情况炎症因子检测结果显示,IL-6和TNF-α的表达随着染毒剂量的增加而增加,说明机体发生炎症反应。Western blot和q-PCR结果显示,GADD45B的相对蛋白及m RNA表达水平随着染毒剂量的增加而增加;免疫组化结果显示,GADD45B阳性表达呈棕黄色,主要位于肾脏的肾小管上皮细胞中,与对照组相比表达水平逐渐升高,高剂量组最为显著。4.MAPK通路参与氟氯氰菊酯对肾脏的损伤Western blot和q-PCR结果显示,与对照组相比,随着染毒剂量的增加,肾脏组织中p-JNK、p-p38MAPK、ERK的蛋白和m RNA表达水平明显升高(P<0.05),JNK、p38MAPK、p-ERK的蛋白和m RNA表达水平明显降低(P<0.05)。免疫荧光双标染色结果显示,GADD45B与J NK共表达于肾小管中,低、中、高染毒组中GADD45B与JNK荧光信号较对照组逐渐增强;p38MAPK主要表达与肾小球的毛细血管内皮细胞中,低、中、高染毒组中GADD45B与p38MAPK荧光信号较对照组逐渐增强。结论1.氟氯氰菊酯具有一定的肾脏毒性,可引起大鼠肾脏形态结构损伤,伴有明显氧化损伤、炎症的发生以及肾功能障碍。2.氟氯氰菊酯可引起GADD45B表达升高,进而激活p38MAPK/JNK通路诱导大鼠肾脏损伤的发生。

目的 探究心理护理对急性闭角型青光眼患者术后恢复的临床疗效。方法 选取2020年6月至2021年6月河南省人民医院收治的急性闭角型青光眼患者84例，利用随机数字表法将其分selleckchem GSK1120212为两组：对照组(42例)和观察组(42例)。对照组患者接受常规护理，而观察组患者在接受常规护理的基础上进行心理AG-221分子式护理。分urine microbiome析两组急性闭角型青光眼患者接受护理干预前后的视力改善情况、心理状态评分、生活质量评分和护理满意度。结果 护理干预后，观察组患者的视力改善情况优良率(83.33%)明显高于对照组(59.52%)，差异有统计学意义(P <0.05)。护理干预后，观察组患者的SDS和SAS评分明显降低，差异有统计学意义(P <0.05)，且观察组患者的SDS和SAS评分显著低于对照组，差异有统计学意义(P <0.05)。护理干预后，观察组患者的生活质量评分明显升高，差异有统计学意义(P <0.05)，且观察组患者的生活质量评分高于对照组，差异有统计学意义(P <0.05)。观察组的护理满意度情况满意率(90.48%)高于对照组(73.81%)，差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 心理护理能够提高其视力水平，改善急性闭角型青光眼患者的不良情绪，提高患者的生活质量，有助于患者的术后恢复。

目的：观察以ERK/mTOR通路的角度分析六味地黄丸含药血清的调控自噬，对改善骨细胞应激反应的影响。方法：将60只健康SPF级SD的大鼠作为研究对象，研究人员于模型组大鼠体外培养MC3T3-E1细胞，并进行24h的0.04～0.79mmol/LH_2O细胞干预Enasidenib研究购买随机分为3组：六味地黄丸组(给予六味地黄丸治疗)、紫檀芪组(给予紫檀芪治疗)及对照组(无Device-associated infections任何治疗方案),各20只，治疗14周。给药结束后检测氧化应激指标、各组自噬相关LC3B mRNA含量、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达水平。结果：研Cell Cycle抑制剂究结果显示，伴随时间延长，与对照组相比，六味地黄丸组及紫檀芪组的SOD水平数值均得到显著提升，MDA水平数值明显下降(P<0.05)。且六味地黄丸组SOD水平数值高于紫檀芪组，MDA水平数值低于紫檀芪组(P<0.05);与对照组和紫檀芪组相比，六味地黄丸组的自噬相关LC3B mRNA含量明显提升，且紫檀芪组高于对照组，差异存在统计学意义(P<0.05)。说明六味地黄丸可改善应激状态下的成骨细胞自噬水平的提升；与对照组相比，六味地黄丸组和紫檀芪组的ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达水平下降，差异存在统计学意义(P<0.05)。但六味地黄丸组和紫檀芪组的ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达水平对比无统计学意义(P>0.05)。说明六味地黄丸可利用压制ERK/mTOR通路以诱导自噬细胞降低成骨细胞的损伤。结论：六味地黄丸可改善机体应激指标，提升MC3T3-E1细胞的细胞活性，提升LC3B mRNA含量，降低的ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达水平。

目的 观察糖尿病肾小管病(DT)的临床病理特征，并分析间质纤维化与肾小管萎缩(IFTA)评分与疾病不良预后的关系。方法 收集2018-2021年在陆军军医大学陆军特色医学中心经病理活检诊断为DT的121例患者的病理antipsychotic medication类型、基本资料、实验室检查指标及随访情况进行回顾性分析。根据IFTA评分的不同将121例患者分为：1分组(n=20)、2分组(n=55)和3分组(n=46)。不良预后以发生终点事件为标准。比较各组临床及实验室指标间的差异，分析IFTA与肾小球损伤、间质炎症、肾动脉玻璃样变、肾动脉硬化的相关性，并采用Cox回归分析评估IFTA评分与终点事件的关系。结果 1selleck抑制剂21例DT患者年龄(53.0±10.2)岁，其中男84例，女37例，患高血压99例(81.8%)。随着IFTA评分的增高，夜尿增多、下肢水肿、蛋白尿、糖尿病视网膜病变的发生率逐渐增高(P<0.01)，尿微量白蛋白(mAlb)、尿蛋白定量、尿白蛋白与肌酐比值(ACR)、校正后尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、胱抑素C(CYC)、血肌酐水平也逐渐升高(P<0.01)，而尿肌酐(Ucr)、估算肾小球滤过率(eGFR)水平则逐渐降低(P<0.01)，但罹患冠心病、脑血管疾病、慢性selleckchem ICI 46474肝病的比例无明显变化(P>0.05)。相关性分析显示，IFTA评分与肾小球损伤(r=0.503,P=0.000)、肾动脉玻璃样变(r=0.329,P=0.007)密切相关。Cox回归分析显示，IFTA评分与患者不良预后呈正相关(经模型校正后P=0.021,HR=2.740,95%CI1.167～6.410),IFTA评分为3分的患者不良预后的发生风险是1分患者的2.740倍。结论 肾小球损伤、肾动脉玻璃样变、肾动脉硬化评分与DT的IFTA评分密切相关，而IFTA评分与DT患者的不良预后密切相关。

[目的]探讨布托啡诺对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡确认细节的影响及其在蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)通路中的作用。[方法]使用SD大鼠建立缺血性脑卒中大鼠模型，所有大鼠分为对照组、模型组、布托啡诺低剂量组(布托啡诺L组)、布托啡诺高剂量组(布托啡诺H组)、布托啡诺+PKA抑制剂(H-89)组确认细节，对大鼠行神经功能评分，TTC染色检测脑梗死体积，HE染色观察脑组织病理特征，铀铅双染色海马区观察神经元焦亡，免疫荧光检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎Immediate access症小体、Caspase-1的表达，酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、cAMP的含量，Western blot检测磷酸化PKA(p-PKA)、PKA、p-CREB、CREB蛋白表达水平。[结果]与对照组比较，模型组大鼠脑组织间隙变大，神经元细胞膜缺损，细胞核核膜凹陷、固缩，神经功能评分升高，脑梗死体积增加，NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18水平增加，cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平下降(P<0.05);与模型组比较，布托啡诺L、H组脑组织结构较完整，神经元细胞结构异常改善，神经功能评分降低，脑梗死体积减小，NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18水平降低，cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平升高(P<0.05);与布托啡诺H组比较，布托啡诺+H-89组脑组织细胞空泡变性增加，神经元结构异常，神经功能评分升高，脑梗死体积增加，NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18水平增加，cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平下降(P<0.05)。[结论]布托啡诺显著抑制缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡，可能与激活PKA/CREB信号通路有关。

目的:探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对胃上皮细胞m~6A甲基化修饰的影响,及其介导FTO调控RNF4表达在感染细胞DNA损伤反应和侵袭迁移中的作用。方法:1.Hp感染对细胞m~6A甲基化修饰的影响及其介导FTO在感染细胞侵袭迁移中的作用:(1)Hp以MOI为60:1感染胃上皮细胞GES-1、AGS 24h,m~6A斑点印迹实验检测细胞总RNA m~6A修饰水平,实时荧光定量PCR和Western blot检测m~6A甲基化修饰相关酶FTO、METTL3和YTHDF2的表达。(2)生物信息学分析FTO、METTL3和YTHDF2在胃癌中的表达及预后,FTO表达与胃癌临床病理参数的关系和功能富集。(3)免疫组织化学技术检测人胃癌组织中FTO表达和Hp感染蒙古沙鼠胃组织FTO表达。(4)构建敲低FTO基因的稳转细胞系,Western blot检测FTO表达;Hp感染FTO基因敲低细胞,m~6A斑点印迹实验检测细胞m~6A甲基化修饰水平。(5)细胞划痕实验和Transwell实验检测Hp感染FTO基因敲低细胞的迁移侵袭能力。2.Hp介导FTO通过m~6A去甲基化修饰对RNF4表达的影响:(1)生物信息学预测FTO m~6A修饰靶基因。(2)Hp感染FTO基因敲低细胞,Western blot检测RNF4表达水平,Me RIP-q PCR检测RNF4 m~6A水平。3.RNF4在Hp诱导胃上皮细胞DNA损伤反应和侵袭迁移中的作用:(1)免疫组化和生物信息学分析RNF4在胃癌中的表达及功能富集。(2)RNA干扰技术下调GES-1、AGS细胞中RNF4基因表达,Western blot验证RNF4的表达水平,彗星实验检测细胞DNA损伤情况,Western blot检测DNA损伤关键蛋白γ-H2AX、P53和RAD51的表达。(3)构建过表达RNF4稳转细胞系,并用Hp感染,Western blot检测RNF4及DNA损伤修复关键蛋白P53和RAD51表达,免疫荧光技术检测γ-H2AX和RAD51的表达及定位,用彗星实验检测细胞DNA损伤情况。(4)细胞划痕实验、Transwell实验检测敲低RNF4和Hp感染过表达RNF4的胃上皮侵袭迁移能力。结果:1.Hp上调FTO基因表PF-03084014核磁达降低感染细胞总m RNA m~6A甲基化水平,促进感染细胞迁移和侵袭:(1)与未感染组相比,Hp感染的胃上皮细胞总RNA m~6A甲基化修饰水平下降,FTO m RNA和蛋白表达升高,METTL3和YTHDF2 m RNA和蛋白表达降低。(2)生物信息学分析显示,胃癌组织中FTO和YTHDF2m RNA表达高于正常组织,METTL3 m RNA表达低于正常组织;FTO高表达与胃癌患者的预后呈负相关,与胃癌患者的T分期、M分期以及AJCC分期等病理参数呈正相关联;FTO参与调节m RNA甲基化,RNA稳定性,DNA损伤修复,细胞增值、代谢等过程。(3)免疫组化结果显示胃癌组织BMS-354825中FTO蛋白的表达水平显著高于癌旁组织,Hp感染蒙古沙鼠胃组织中FTO表达同样高于对照组织。(4)成功构建敲低FTO的细胞系,与空载组相比,敲低FTO的胃上皮细胞总RNA m~6A水平显著升高;与敲低FTO细胞相比,Hp感染FTO敲低细胞,FTO表达升高,细胞总m RNA m~6A水平降低。(5)与非感染组相比,Hp感染显著提高细胞的迁移侵袭能力;与空载组相比,敲低FTO基因抑制细胞迁移和侵袭能力,且敲低FTO抑制Hp感染细胞的迁移侵袭能力。2.Hp介导FTO通过m~6A甲基化修饰下调RNF4表达:(1)RM2 Target网站预测RNF4存在m~6A修饰位点,是FTO的一个m~6A修饰靶蛋白。(2)与空载组相比,敲低FTO引起RNF4 m~6A水平升高,上调RNF4蛋白表达。(3)与敲低FTO细胞相比,Hp感染FTO敲低细胞,FTO表达升高,引起RNF4 m~6A水平下调,RNF4表达水平下降,提示Hp可介导FTO通过去m~6A甲基化修饰下调RNF4表达。3.Hp下调RNF4表达参与胃上皮细胞DNA损伤反应和侵袭迁移:(1)Hp感染蒙古沙鼠胃组织中RNF4蛋白表达降低,生物信息学分析显示RNF4在胃癌组织中低表达;RNF4主要参与了细胞应激反应和DNA损伤修复,进而参与肿瘤的发生和发展。(2)sh RNF4转染GES-1、AGS细胞中RNF4表达降低;与非感染组相比,Hp感染细胞DNA拖尾变长;与Hp感染空载组相比,Hp感染RNF4敲低细胞加重基因组DNA损伤;与空载组相比,敲低RNF4的细胞DNA损伤修复关键蛋白P53、RAD51表达降低。(3)过表达RNF4基因的GES-1、AGS细胞中RNF4表达升高;与非感染组相比,Hp感染细胞中DNA拖尾变长,RAD51和P53稳定性降低;与空载组相比,过表达RNF4上调RAD51和P5immunocompetence handicap3蛋白水平;与过表达RNF4组相比,Hp感染过表达RNF4基因细胞DNA损伤程度降低,细胞核内γ-H2AX和RAD51聚集加快,P53、RAD51稳定表达,提示过表达RNF4基因可以减轻Hp感染引起细胞的DNA损伤。(4)与空载组相比,敲低RNF4促进胃上皮细胞迁徙和侵袭,过表达RNF4降低细胞侵袭迁移能力;与Hp感染空载组相比,Hp感染过表达RNF4细胞侵袭和迁移能力降低。结论:(1)Hp可上调FTO表达降低感染细胞的m~6A水平,促进细胞迁移和侵袭。(2)Hp可通过FTO去m~6A修饰下调RNF4表达。(3)Hp下调RNF4表达参与其感染细胞的DNA损伤反应和侵袭迁移。

基于体外细胞实验、网络药理学和分子对接探讨槐定碱（sophoridine，SRI）对DU-145前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。MTT、克隆形成以及免疫荧光实验检测SRI对DU-145细胞增殖的影响，流式细胞术检测细胞凋亡情况。qPCR检测Ki67、PCNA、Caspase-3/7、Bcl-2、Bax以及p38MAPK mRNA表达。Western blot检测PCNA、Caspase-3、Bcl-2、Bax、p38MAPK以及p-p38MAPK蛋白表Hepatitis C达。利用TCMSP、HERB、Swiss Target PrICI 46474分子量ediction和PharmMapper数据库获得SRI靶点，利用OMIM、GeneCards数据库收集前列腺癌靶点，并通过VennyGW4869生产商2.1.0筛选两者的共同靶点。利用STRING数据库构建蛋白-蛋白互作（protein-protein interaction，PPI）网络，采用Cytoscape3.9.0软件进行网络拓扑学分析以及PPI网络可视化。通过DAVID数据库进行GO富集和KEGG通路分析。采用AutoDock1.5.6软件进行分子对接。细胞实验结果表明SRI能显著抑制DU-145细胞的增殖，并促进其凋亡。PPI网络分析得到ALB、MAPK1、CASP3、MAPK8、p38MAPK等16个核心靶点。GO富集分析得到158个条目（P < 0.01），主要集中在细胞凋亡过程、蛋白质磷酸化、蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性等。KEGG富集分析得到84个信号通路（P < 0.01），涉及癌症通路、癌症中的蛋白多糖、MAPK信号通路等。分子对接结果表明SRI与核心靶点p38MAPK能够稳定结合。qPCR和Western blot结果证实SRI能促进p38MAPK的表达。综上，本研究表明SRI能抑制DU-145前列腺癌细胞的增殖并促进其凋亡，这可能与p38MAPK的激活有关。