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目的 观察急性等容血液稀释联合回收式自体输血技术在心脏瓣膜置换手selleckchem MG132术中应用的效果及安全性。方法 选择2022年6月-12月在我院行心脏瓣膜Telemedicine education置换手术的患者80例，按数字表法随机分为急性等容血液稀释联合回收式自体输血组Z-IETD-FMK配制（A组）和回收式自体输血组（B组），每组40例。A组在麻醉诱导后、肝素化前进行急性等容性血液稀释并采集一定量的血液保存，在鱼精蛋白拮抗肝素后回输所采自体血；同时对整个手术过程术野出血、体外循环管道余血进行血液回收并充分清洗后回输。B组对整个手术过程术野出血、体外循环余血进行血液回收并充分清洗后回输。比较两组术中术后异体输血量、异体输血率、术后12、24 h出血引流量、心脏外科ICU留观时间、术前及术后12、24 h凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（Hct）、血小板计数（PLT）水平。结果 两组术后12、24 h PT、APTT、TT较术前延长、FIB较术前下降，且B组术后12、24 h PT、APTT、TT长于A组，FIB低于A组（P<0.05）；两组术后12、24 h Hb、Hct、PLT较术前下降，且B组低于A组（P<0.05）;A组术中术后异体输血量、异体输血率、术后12、24 h出血引流量、ICU留观时间少于B组（P<0.05）。结论 急性等容血液稀释联合回收式自体输血在心脏瓣膜置换手术中应用效果良好，对凝血功能影响小，可以减少术后出血引流量、异体输血量和异体输血率，有效节约用血，缓解血源紧张。

目的:研究新生血管性青光眼(NVG)治疗中玻璃体腔内注射雷珠单抗疗法与经小梁切除术联用效果。方法:以回顾性分析为法，观察对象为2020年1月至2022年1月入院的70例NVG患者，根据不同治法分为研究组(35例)与对照组(35例)。研究组行玻璃体腔内注射雷珠单抗疗法与经小梁切除术联合治疗，对照组行经小梁切除术治疗；比较两组治疗前与治疗3个月后眼压水平Anthocyanin biosynthesis genes、视力水平、眼动脉血流动力学指标[血流阻力系数(RI)、收缩期峰值流速(PSV)、舒张末期流速(EDV)]、血清白细胞介素-6(ILMS-275价格-6)与治疗后总有效率、并发症(眼球疼痛、前房积血、低眼压、角膜水肿)发生率。结果:治疗前，两组患者的眼压、视力、RI、PSV、EDV、IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后，两组患者的视力、PSV、EDV水平较治疗前升高，眼压、RI、IL-6水平较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.05);两组视力、PSV、EDV、眼压、RI、IL-6水平治疗前后差值比较，差异有统计学意义(P<0.05);研究组的总有效率较对照组升高，并发症发生率较对照组降低，差异GNE-140核磁有统计学意义(P<0.05)。结论:NVG治疗中玻璃体腔内注射雷珠单抗疗法与经小梁切除术联用效果显著，可有效提升患者视力，降低其眼压水平，还可改善眼动脉血流动力学及IL-6水平，减少并发症。

目的：探究高原低氧如何调控PPAR信号通路诱导脾脏组织铁死亡发生的分子机制。方法：本研究构建低氧动物模型，通过转录组学和蛋白质组学联合分析筛选预测靶基因，通过GO和KEGG富集分析，挖掘低氧暴露下PPAR和铁死亡通路中的关键基因，并通过RT-qPCR和Western Blot进行验证。结果：转录组学与蛋白selleckchem BIBW2992质组学联合分析结果显示，低氧暴露下有95个预测靶基因（蛋白质）出现显著性差pathologic outcomes异表达，GO注释分析和KEGG富集分析结果显示，差异基因主要显著富集在PPAR和铁死亡信号通路。对PPAR与铁死亡信号通路进行相关性分析，结果呈负相关，且GSEA显寻找更多示，PPAR和铁死亡信号通路的差异基因集在高原低氧组呈相反表达趋势。对PPAR信号通路中关键基因（PPARA、RXRB、APOA1和SCD-1）进行验证，结果发现在低氧暴露下mRNA 和蛋白表达量均下调。随后，对铁死亡信号通路中内源性途径中GPX4和外源性途径中SLC7A11、TRP53和TFRC的mRNA和蛋白表达量均出现差异表达。对4个铁死亡关键基因与差异炎症相关基因（DE-IRGs）进行相关性分析，结果均呈正相关或负相关。并对炎症相关基因进行验证，发现低氧暴露下脾组织中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-18、INF-γ和TNF-α的表达水平上调。结论：本研究发现，高原低氧暴露通过PPAR信号通路介导脂代谢紊乱进一步诱导铁死亡，并伴随炎症反应的发生，进而引起脾脏组织损伤。

细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP)酶是一gibberellin biosynthesis类以血红素为辅基的单加氧酶,广泛参与生物体中内源性底物和外源性药物的氧化代谢,其代谢途径包括羟基化、去甲基化以及环氧化等。CYP4家族是人类第二大CYP家族。其中,细胞色素P450 4F2(CYP4F2)是一种ω-羟化酶,其功能包括催化花生四烯酸生成20-羟二十烷四烯酸,分解代谢白三烯B4和长链脂肪酸以及启动维生素K和维生素E的代谢等。α-生育酚(α-TOH)是维生素E中生物活性和生物利用率最高的抗氧化剂,它是CYP4F2的主要底物之一。阐明CYP4F2与α-TOH的结合机制有利于我们了解α-TOH的代谢过程,丰富CYP4F2的结构-功能关系,为基于底物的药物设计提供理论指导。本论文利用同源模建方法构建了CYP4F2的蛋白结构,通过分子对接方法获得了α-TOH与CYP4F2的复合物模型,并采用分子动力学模拟结合多种分析方法研究了α-TOH与CYP4F2的相互作用过程以及重要残基突变对二者结合的影响。具体内容包括:1.细胞色素P450 4F2与α-生育酚相互作用的分子动力学模拟研究α-生育酚(α-TOH)是一种强效的抗氧化剂。在维生素E的八种形式(α-、β-、γ-和δ-生育酚和α-、β-、γ-和δ-生育三烯酚)中,α-TOH具有最高的生物活性和生物利用率。血浆中α-TOH的浓度与人体健康密切相关,浓度较低可能会导致人体生长发育迟缓、贫血和免疫下降;浓度过高可能会导致许多不良反应。CYP4F2是人体中主要代谢α-TOHselleck的细胞色素P450酶,它通过对α-TOH的末端甲基进行ω-羟基化来激活α-TOH的代谢。阐明α-TOH与CYP4F2的结合机制,揭示α-TOH与CYP4F2的相互作用细节对了解α-TOH的代谢过程具有重要意义。目前,CYP4F2的蛋白结构尚未被解析。在本章工作中,我们通过同源模建和分子对接构建了α-TOH-CYP4F2复合物的模型,综合利用分子动力学模拟和结合自由能分析等计算方法对复合物体系进行研究以明确α-TOH与CYP4F2结合的关键因素及二者的相互作用细节。结合自由能计算及自由能面图分析结果表明,疏水作用和氢键作用是α-TOH与CYP4F2结合的关键因素。8个关键残基(V67、V76、F124、V395、P396、V397、L421和L504)在CYP4F2的活性位点形成疏水空腔稳定α-TOH与CYP4F2的结合,S423与α-TOH形成唯一的氢键将α-TOH锚定在有利于发生ω-羟基化的位置。该项工作丰富了CYP4F2的结构信息,有利于我们理解α-TOH与CYP4F2的相互作用过程,为研究CYP4F2介导的其它底物的ω-羟基化提供了有益的理论参考。2.细胞色素P450 4F2重要残基突变对α-生育酚结合的影响基于前一部分的计算结果,并结合相关实验数据和CYP4F2的结构特征,我们推测S423、V433和E328可能对α-TOH与CYP4F2的结合有重要作用。前一部分的研究发现S423与α-TOH形成唯一的氢键,S423可能对α-TOH与CYP4F2的结合至关重要。有报道称V433M突变会显著降低CYP4F2对α-TOH的ω-羟基化活性。我们观察到,V433的位置远离CYP4F2的活性位点,远端残基V433突变如何影响CYP4F2的结构特征和底物结合引起了我们的研究兴趣。此外,CYP4家族酶I螺旋上的谷氨酸与血红素形成酯键,这此网站使得该家族酶能够选择性催化底物发生ω-羟基化。CYP4F2中I螺旋上的E328与血红素形成酯键,该酯键对α-TOH发生羟基化的影响尚不明确。为了研究S423、V433和E328对α-TOH与CYP4F2结合的影响,我们设计突变实验对S423A,V433M和E328A突变型体系分别进行了分子动力学模拟。结果表明,S423与α-TOH之间氢键的消失导致α-TOH发生位移,减弱了α-TOH与CYP4F2的相互作用,破坏了发生ω-羟基化反应的距离条件。V433通过远端调控影响α-TOH与CYP4F2的结合,V433M突变引起蛋白构象变化,破坏了原有的疏水空腔和S423与α-TOH之间的氢键,不利于α-TOH与CYP4F2的结合。E328与血红素之间的酯键将α-TOH限制在一个狭窄的空腔内,有利于α-TOH在ω位点发生羟基化反应;在E328A突变型体系中,酯键的消失增加了ω-1位点的碳原子与血红素接触的概率,从而增加了α-TOH的ω-1位点发生羟基化反应的可能性,减弱了CYP4F2对α-TOH发生ω-羟基化的选择性。S423A、V433M和E328A突变直接或间接地改变了α-TOH与CYP4F2的结合模式,降低了二者的结合亲和力,不利于α-TOH发生ω-羟基化。该项工作在原子水平上阐明了重要残基突变对α-TOH与CYP4F2结合的影响,有利于我们更好的理解CYP4F2的结构-功能关系。

目的:比较单孔与多孔道髓芯减压联合富血小板血浆(PRP)治疗早期股骨头坏死的临床疗效。方法:选取2015年至2022年诊断为早期股骨头坏死并行保髋手术治疗的患者80例，将其分成A组(采取髋关节镜辅助下小直径多孔道髓芯减压)20例，B组(采取髋关节镜辅助下小直径多孔道髓芯减压联合富血小板血浆局部应用)20例，C组(采取髋关节镜辅助下大直径单孔道髓芯减压)20例，D组(采取髋关节镜辅助下大直径单孔道髓芯减压联合富血小板血浆局部应用)20例。术后1个月、3个月、1年及1.5年分别随访，并记录4组病例所有患者的术前、术后髋关节功能Harris评分、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分及手术侧股骨头的MRIE-616452抑制剂影像学改变，对数据进行统计分析，以评估股骨头内局部应用富血小板血浆和小直径多孔道/大直径单孔道髓芯减压的临床疗效。结果:VAS评分组内比较，治疗后4组VAS评分均低Roxadustat于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)。组间比较，治疗后VAwhole-cell biocatalysisS评分D组

目的:探讨外源性H_2S供体Na HS是否通过抑制BECN1/SLC7A11通路介导的铁死亡途径改善脓毒症心肌损伤。方法:细胞实验:采用不同浓度LPS(1、3、5、10、20μg/m L)刺激大鼠H9c2心肌细胞诱导脓毒症心肌细胞损伤体外模型。在LPS刺激前,采用不同浓度Na HS(20、50、100、150、200 mmol/L)预处理细胞1 h,筛选Na HS给药最适浓度。将H9c2细胞分为3组:Control组、LPS组、LPS+Na HS组。采用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测心肌细胞内Fe~(2+)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,采用荧光探针法检测心肌细胞活性氧(ROS)和心肌细胞线粒体膜电位的变化,免疫荧光检测BECN1、SLC7A11在心肌细胞中的表达定位,应用小干扰RNA(si RNA)降低H9c2细胞中的BECN1的表达,western-blot法检测铁死亡调控蛋白BECN1、p-BECN1、SLC7A11、Ferritin、GPX4表达水平。动物实验:为了进一步验证体内结果,研究采用盲肠结扎穿刺操作(CLP)诱导大鼠脓毒症心肌损伤体内模型,将45只SD大鼠(8-10周龄)分为假手术(Sham)组、脓毒症(CLP)组、脓毒症+Na HS干预(CLP+Na HS)组,每组15只,通过超声心动图观察各组大鼠心脏收缩与舒张功能,HE染色观察各组大鼠心肌形态学变化,透射电镜观察心肌线粒体结构变化,western-blot法检测铁死亡调控蛋白BECN1、p-BECN1、SLC7A11、Ferritin、GPX4表达水平。组间比较采用单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。对Fe~(2+)与细胞活力,心肌酶,细胞氧化应激、脂质过氧化,铁死亡标志蛋白等指标进行相关性分析,对大鼠心功能指标与铁死亡标志蛋白进行相关性分析,pearson相关系数|r|>0.8表示具有高度相关,P<0.05表示存在显著的线性关联。结果:(1)不同浓度梯度LPS刺激H9c2大鼠心肌细胞构建脓毒症心肌细胞损伤模型,与Control组相比,LPS刺激后H9c2细胞活力下降,Fe~(2+)浓度升高,MDA、ROS水平升高,线粒体JC-1单体增多,p-BECN1蛋白表达水平上升,Ferritin、GPX4、SLC7A11蛋白的表达水平下调,心肌细胞损伤加重(p<0.05)。(2)与LPS组相比,Na HS给药后可减轻LPS刺激的H9c2细胞活力降低和Fe~(2+)浓度升高,降低LPS刺激的H9c2细胞氧化应激和铁代谢障碍,下调p-BECN1蛋白表达水平,上调Ferritin、GPX4、SLHepatic infarctionC7A11蛋白的表达水平,减轻心肌细胞损伤(p<0.05)。(3)BECN1 si RNA干预后发现,抑制BECN1的表达可增强细胞的抗氧化能力,降低LPS诱导的H9c2细胞铁死亡的敏感性。联合Na HS给药干预后铁死亡调控蛋白Bafilomycin A1SLC7A11、Ferritin、GPX4的表达水平有所升高(p<0.05)。(4)与Sham组相比,CLP组大鼠心脏收缩与舒张功能减弱,HE染色发现心肌组织节结构排列紊乱,炎性细胞浸JQ1化学结构润增加,透射电镜下可见心肌线粒体缩小、嵴减少、膜破裂,铁死亡调控蛋白SLC7A11、Ferritin、GPX4表达水平下降,p-BECN1表达水平升高(p<0.05)。(5)与CLP组相比,Na HS给药干预后大鼠心功能障碍有所缓解,心肌组织病理形态学有所改善,线粒体结构损伤减轻,心肌组织中SLC7A11、Ferritin、GPX4蛋白表达升高,p-BECN1表达水平下降(p<0.05)。结论:外源性H_2S供体Na HS通过抑制BECN1/SLC7A11通路介导的铁死亡途径改善脓毒症心肌损伤。

目的 观察八珍汤口服在减少全髋关节置换（THA）术后低分子肝素（LMWH）用量方面的疗效。方法 THTezacaftor试剂A术后患者103例随机分为3组，对照组32例给予LMWH皮下注射，八珍汤组36例加用八珍汤口服，1/2联合组35例给予1/2标准剂量LMWH皮下注射，并给予八珍汤口服。比较3组的活化部分凝血活酶时间（APTT）、血浆凝血酶原时间（PT）、血浆纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT）、D-二聚体（D-dimer）、血小板（PLT）、血液黏度（PV）、全血高切黏度（WBHV）、血栓弹力图数值[TEG，包括凝血反应时间（R）、凝血时间（K）、凝固角（α）、最大振幅（MA）及血凝块（MA）出现30 min内TEG曲线下降面积（Ly30）]、术中出血量、输血量、术后引流量、患肢最大肿胀率、DVT及不良反应发生情况。结果 与术前相比，八珍汤组、1/2联合组均能延长术后APTT、PT、TT，缩短FIB、D-dimer，降低PV、WBHV、R值、K值，升高α角、MA(P <0.05)；术后14 d时，八珍汤组、1/2联合组延长APTT、PT、TT，降低PV，改善R值、α角、MA的疗效均优于对照组（P <0.05），八珍汤组缩短FIB、WBHV，改water disinfection善K值的疗效均优于对照组（P <0.05），八珍汤组、联合组比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。PLT方面，3组组间、组内均未见明显差异（P> 0.05）。术中出血量、输血量、术后引流量及DVT发生情况比较，3组均未见明显差异（P> 0.05）。患肢最大肿胀率方面，与对照组相比，八珍汤组、联合组能减轻患肢最大肿胀率（P <0.05）；两组间未见明显差异（P> 0.05）。并发症发面，八珍汤组腹泻2例、大腿青紫5例；联合组腹泻1例，未出现青紫瘀斑；对照组药物过敏1例，大腿青紫6例，3组并发症发生率比较，差异有统计学意义（P <0.05），其中1/2联合组发生率低于对照组（P <0.Dinaciclib研究购买05），八珍汤组与联合组、对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 THA术后应用八珍汤口服可减少LMWH用量，疗效与联合标准剂量相当，均优于单纯LMWH，且能减少相关并发症的发生。

研究背景:脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)造成感觉、运动和植物神经功能紊乱或丧失,且预后通常不良,最终导致患者Immune composition瘫痪甚至死亡。SCI患者平均年龄不到40岁,大部分患者此后终生需要瘫痪卧床,随之产生的高昂治疗护理费用为其家庭和社会带来巨大负担。同时我国每年还会新增大量的SCI患者(据统计我国每百万人口中SCI发病率达40人次/年),因此亟待发展有效的SCI治疗方法,而到目前为止脊髓损伤修复仍是世界级的临床难题。脊髓受损伤后,大量神经细胞在几分钟到几小时内死亡丢失。在原发性损伤之后产生的继发性损伤包括炎症反应、细胞凋亡、血管异常、谷氨酸兴奋毒性、自由基形成和脂质过氧化等,导致神经元细胞和神经胶质细胞的继发性死亡,胶质和纤维瘢痕形成,造成永久性的功能退化。其中,炎症反应被认为是继发性损伤的关键组成部分。大量促炎因子在损伤区释放如肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)、白介素1(interleukin-1,IL-1)、IL-6等促炎因子进一步诱导趋化炎症细胞的聚集,加重局部炎症反应。原发性和继发性损伤还会产生大量损伤相关模式分子(damage associated molecular patterns,DAMPs),被释放到血液和组织液中,直接或间接地参与到各种炎症反应和血栓并发症中。此外,SCI炎症反应期间微环境中的活性氧(reactive oxygen species,ROS)显著增加,协同加重神经细胞死亡、轴索变性和运动功能障碍。近年来,包括细胞移植、纳米药物和生物组织工程学等多种策略应用于SCI的治疗。其中纳米材料能够有效清除SCI后DAMPs和ROS,调控局部微环境变化;生物支架材料能够为SCI修复提供温和的条件。研究目的:基于明胶(gelatin,GL)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)天然材料来源的水凝胶体系具有良点击此处好的生物相容性,能够填补损伤后的物理缺损,促进SCI后内源性神经干细胞的迁移与成熟,并提供生物活性分子、药物和细胞递送的基质体系。因此构建能够模拟生理脊髓环境状态,同时具有稳定递送活性因子、药物和细胞的水凝胶体系是治疗全横断脊髓损伤病变的基础。SCI的修复依赖于脊髓损伤微环境,因此,为了更有效地促进SCI后神经网络重建和功能恢复,需要改善和重塑损伤后的微环境,使其不仅可以降低神经细胞死亡水平并且促进神经再生。单一清除或调控微环境中的某一因子含量对SCI后诱发的炎症反应仅能起到有限的调控作用,因此,本研究拟构建具有神经保护和组织再生双重功能的氧化铈纳米材料体系,用于改造损伤后的炎症微环境,从而提高脊髓损伤治疗修复效果。利用阳离子高分子修饰的氧化铈纳米粒子(cationic polymer modified-cerium oxide nanoparticles,cCONPs)能够清除微环境中的损伤相关模式分子和活性氧等,降低相关炎症反应水平,发挥神经保护作用。此外,利用该阳离子高分子修饰的氧化铈纳米粒子负载递送并缓慢释放促进轴突生长、神经再生的脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF),在调节炎症微环境的同时,更好地促进神经损伤的修复和组织再生。研究方法:1、首先构建优化明胶-透明质酸可见光交联混合水凝胶体系。采用扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM),红外傅里叶光谱分析,溶胀实验对构建的GL/HA水凝胶进行表征。通过将优化后的GL/HA水凝胶原位移植入T9全横断脊髓损伤大鼠模型中观察其治疗效果。分组情况:CON组,GL/HA混合水凝胶比例10/0组,9/1组,8/2组,7/3组。术后第10天、60天两个时间点进行取材,采用免疫荧光染色技术重点观察移植治疗后对内源性神经发生、迁移、成熟和分化,对损伤后炎症反应调控,胶质瘢痕形成的影响,利用Basso,Beattieand Bresnahan(BBB)评分、运动电生理检测和斜板试验对SCI大鼠运动功能恢复进行评估。综合评价GL/HA水凝胶体系治疗完全性SCI的效果,并为后续双功能纳米材料提供稳定的基础材料体系。2、设计并制备同时具有清除ROS和DAMPs以及缓释细胞因子的双功能纳米材料体系。通过水热法合成CONPs,在表面修饰阳离子高分子(PAMAM-G3)获得cCONPs,随后通过物理相互作用方法负载细胞因子BDNF,将纳米颗粒包封于GL/HA水凝胶中得到本项目所述的GL/cCONPs-BDNF双功能纳米水凝胶材料体系。采用动态光散射(Dynamic light scattering,DLS),透射电镜(Transmission electron telescope,TEM),SEM对cCONPs纳米颗粒大小、电位进行表征。体外试验,首先采用elisa法检测了不同浓度cCONPs纳米颗粒清除ROS和DAMPs,以及BDNF缓释的能力。其次利用细胞活死染色实验检验了GL/cCONPs体系的生物相容性。随后在H_2O_2模拟的过氧化应激条件中,测试了GL/cCONPs体系对细胞的保护作用与降低细胞内ROS水平。最后,通过qPCR、IF染色探究了GL/cCONPs体系对模拟损伤条件下对炎症反应的抑制作用。体内实验部分,同样应用T9全横断SCI大鼠模型,分四组进行(CON组,GL组,GL/cCONPs组和GL/cCONPs-BDNF组)。通过术后10天、60天取材评价GL/cCONPs-BDNF双功能水凝胶支架体系治疗SCI疗效。分别采用IF染色、多因子抗体芯片技术重点观察GL/cCONPs-BDNF体系移植治疗后损伤区微环境变化,神经再生、轴突延伸情况,瘢痕形成影响和血管再生作用。另外通过对重要器官脏器H&E染色评估治疗体系的安全性。最后对SCI大鼠运动功能评价评测运动功能的恢复情况。研究结果:1、构建并优化了可见光交联GL/HA混合水凝胶体系。其具有良好的生物相容性,并通过原位成胶的方式填补脊髓损伤区的缺损。我们发现将HA加入到GL水凝胶后,呈HA浓度依赖性减轻SCI后炎症反应与抑制瘢痕形成。此外,当GL/HA比例为9/1和8/2时能够显著促进内源性神经干细胞的迁移与发生,提高神经分化成熟和轴突再生。通过GL/HA混合水凝胶移植治疗方法,促进了T9全横断脊髓损伤大鼠运动功能恢复。2、制备了直径大小为243.29 nm的高分子阳离子修饰的cCONPs纳米颗粒。体外实验结果显示,GL/cCONPs体系在5 mg/mL浓度下对NSCs、raw 264.7细胞无明显毒性。cCONPs纳米颗粒具有良好的清除ROS、结合游离DAMPs的能力,能够减少H_2O_2诱导损伤条件下的细胞损害。降低DAMPs模拟诱导的炎症反应。且cCONPs-BDNF纳米颗粒能够稳定长效缓释BDNF因子。在全横断SCI损伤模型中,通过GL/cCONPs-BDNF移植治疗能够促进大鼠运动功能恢复。与CON组对比,GL/cCONPs体系可以通过调节损伤后炎症反应改善微环境;GL/cCONPs-BDNF通过长效缓释BDNF因子,促进了损伤后的内源性神经元的再生、成熟;同时抑制长期瘢痕形成。研究结论:综上所述,我们成功构建并优化了明胶-透明质酸水凝胶体系,并在此基础上构建了同时具有神经保护与促进组织再生修复的双功能纳米氧化铈颗粒水凝胶体系,通过清除损伤区ROS、DAMPs显著降低了损伤区的炎症反应,改善了损伤后的微环Dorsomorphin小鼠境。同时利用双功能材料体系长效释放生长因子的特性,给予损伤区营养支持,促进神经分化、再生与成熟,最终促进SCI损伤后运动动能恢复,为SCI治疗提供了新的思路。

水稻(Oryza sativa L.)属稻属谷类作物,是我国重要的粮食作物。但是长期以来,水稻在生产过程中一直遭受稻瘟菌的危害,影响了水稻的产量。稻瘟菌属于真菌性病害,在各大水稻产区均有发生,稻瘟菌的大规模侵染会造成水稻减产40%-60%。因此,为了保证水稻的产量和品质,从稻瘟菌的角度深入研究androgenetic alopecia其致病基因,为提高不同水稻品种抗病性提供新的参考。我们通过对稻瘟病菌的生物信息学分析,发现了两个编码Jumonji C(Jmj C)结构域的蛋白MoJMJD3和MoJMJD2可以靶向调控稻瘟菌的致病力,以此为基础探究不同水稻品种对稻瘟菌的抗病性。通过Split-PCR基因同源重组敲除策略得到ΔMojmjd2和ΔMojmjd3敲除菌株,表型分析发现ΔMojmjd3在稻瘟菌附着Wnt-C59体外胞形成过程中存在缺陷;而ΔMojmjd2在稻瘟菌分生孢子的萌发、附着胞形成、侵染性菌丝形成等方面都出现了明显抑制作用。selleck NMR以野生型P131菌株为对照进一步对ΔMojmjd2和ΔMojmjd3菌株的生长速率进行观察,发现ΔMojmjd2菌落的生长率显著降低,菌落生长直径减少50%左右。将ΔMojmjd2和ΔMojmjd3敲除体菌株接种至水稻叶片,P131菌株的侵染使水稻叶片呈现大面积的典型纺锤形病变,而突变体的病变面积较小呈点状,表明突变体对水稻的致病力显著减弱。MoJMJD2是一个影响稻瘟菌分生孢子萌发,附着胞形成,侵染性菌丝生长和致病力的重要因子,同时参与稻瘟菌中孢子的生成和菌落的生长。同时为了测定MoJMJD3和MoJMJD2去甲基化酶活性研究,通过体外蛋白纯化、Dot Blot和Western Blot等实验对其进行生化层面的分子研究,为研究组蛋白甲基化修饰在稻瘟菌生长发育及致病机制中的调控作用提供一些新的见解。综上所述,MoJMJD2和MoJMJD3在稻瘟菌的致病过程中发挥了重要的作用,为稻瘟病的防治提供一些新的思路,为进一步鉴定水稻对稻瘟菌去甲基化酶的抗病性鉴定与功能研究提供了重要依据。

研究目的:经皮冠状动脉介入术后支架内再狭窄仍是临床亟待解决的重点问题,炎症反应是其核心机制之一。本课题组前期研究发现“毒瘀互结”理论与炎症反应关系密切,此次研究是将基于毒瘀互结理论的解毒活血方运用于血管内再狭窄的机制研究,通过球囊损伤大鼠血管建立胸主动脉内膜增生模型,探究解毒活血方在Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路中的作用机制,明确解毒活血方在血管再狭窄中的机理作用。研究方法:选取72只8周龄(250—300g)雄性SPF级SD大鼠,随机分为6组,每组12只,分别是假手术组、模型组、解毒活血方低剂量组、解毒活血方中剂量组、解毒活血方高剂量组Baf-A1抑制剂、阿司匹林组。按照课题组既往方法建立大鼠胸主动脉内膜增生模型,造模后根据设计方案分别灌服蒸馏水,不同剂量解毒活血方,阿司匹林药物,灌胃结束后分批次解剖取材。Masson染色观察胸主动脉内膜;ELISA法检测血清中ICAM-1和VCAM-1浓度;Western blot检测血管组织中PCNA、TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB的蛋白表达。研究结果:1.胸主动脉Masson染色结果:假手术组血管内膜平整,纤维分布有序;模型组内膜增生明显,中层增厚,胶原纤维和平滑肌含量都大幅增加,纤维排序杂乱,部分可见炎症因子和脂质沉积。解毒活血方组和阿司匹林组,内膜以及中膜均有不同程度的增厚,但较模型组相比,胶原纤维以及平滑肌含量存有不同程度的下降。2.血清中ICAM-1、VCAM-1的比较:造模后不同时期内,M组的ICAM-1和VCAM-1浓度显著高于S组(P<0.01);JL、JM组的ICAM-1和VCAM-1浓度相较于M组无显著性差异变化(P>0.05),而JH组与A组的ICAM-1和VCAM-1浓度显著低于M组(P<0.01)。与A组相比较,造模后JH组的ICAM-1和VCAM-1浓度均无显著性差异变化(P>0.05)。造模后14天,JL、JM组的ICAM-1浓度较A组均无显著变化(P>0.05),而VCAM-1较A组升高(P<0.05);造模后28天JL组的ICAM-1和VCAM-1浓度均较A组升高(P<0.05),但JM组的ICAM-1和VCAM-1浓度无显著性差异变化(P>0.05)。3.血管组织中PCNA蛋白表达比较:造模后各个时期内,M组的PCNA蛋白表达显著高于S组(P<0.01);JL组和JM组的PCNA蛋白表达相较于M组均无显著性差异变化(P>0.05),而JH组和A组的PCNA蛋白表达显著低于M组(P<0.01)。与A组相比较,JL组PCNA蛋白表达显著高于A组(P<0.01),而JH组的PCNA蛋白表达相较于A组无显著性差异变化(P>0.05)。造模后14天JM组的PCNA蛋白表达显著高于A组(P<0.01),而造模后28天JM组的PCNA蛋白表达相较于A组无显著性差异变化(P>0.05)。4.血管组织中TLR4/NF-κB蛋白表达比较:造模后14天,M组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达均显著高于S组(P<0.01);JL、JM组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白较M组均无显著性差异变化(P>0.05),JH组和A组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达较M组有不同程度的下降(P<0.05,P<0.01);JL组IKK蛋白表达高于A组(P<0.01),JM、JH组的IKK蛋白表达oncology and research nurse以及JL、JM、JH组的TLR4、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达较A组均无显著性差异变化(P>0.05)。造模后28天,M组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达均显著高于S组(P<0.01);JL组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB以及JM组TLR4、NF-κB蛋白表达较M组均无显著性差异变化(P>0.05),JM组IKK、P-IκBα/IκBα蛋白表达以及JH、A组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达均有不同程度降低(P<0.selleck化学05,P<0.01);JL组IKK、P-IκBα/IκBα蛋白表达高于A组(P<0.05,P<0.01),JM、JH组的IKK、P-IκBα/IκBα蛋白表达以及JL、JM、JH组的TLR4、NF-κB蛋白表达较A组均无显著性差异变化(P>0.05)。研究结论:1.解毒活血方可以降低内膜增生模型大鼠血管中的胶原纤维和平滑肌含量,从而减少平滑肌细胞增殖,进而防止内膜增生。2.解毒活血方可以通过降低内膜增生模型血清中ICAM-1和VCAM-1的浓度,减轻炎症反应,减少细胞黏附。3.解毒活血方可以通过降低内膜增生模型大鼠血管组织中的PCNA蛋白表达,抑制血管平滑肌增殖。4.解毒活血方可以通过降低受体TLR4的蛋白表达,从而降低下游IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB的蛋白表达,抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活与传导,阻断NF-κB进入细胞核产生炎症反应。5.解毒活血方可以通过降低内膜增生模型大鼠中的炎症表达,进而减少血管平滑肌细胞增殖,抑制新生内膜形成,从而抑制内膜增生,最终防止再狭窄。