Author: admin

目的:肺癌发病率在我国恶性肿瘤中位居首位,其中肺腺癌是主要病理类型。随着医学的发展,酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitor,TKIs)对于EGFR突变型的患者有良好的疗效,但是在治疗的后期,大多数EGFR突变型的患者会对TKIs产生一定程度的耐药性。有研究表明,化疗可提高患者在耐药后的总生存(Overall survival,OS)。所以对于肺腺癌患者,化疗是不可或缺的手段。遗憾的是,众多肺腺癌患者在化疗后会出现耐药现象,严重影响了化疗的疗效和患者的预后,因此化疗敏感性的降低已成为临床上治疗肺腺癌的主要障碍。本研究旨在探讨影响肺腺癌患者化疗敏感性的关键基因及相关机制,并进一步研究其对肺腺癌患者预后的影响,建立预后模型,从而预测肺腺癌患者的生存时间。方法:1.在GEO数据库中下载了A549细胞系化疗处理后的基因表达数据,利用MCC、MNC及Bottle Neck三种方法进行差异基因分析。2.通过q RT-PCR、细胞增殖抑制实验(MTS法)和Western blot等细胞实验探索其影响肺腺癌患者化疗敏感性的相关机制。3.从GEO数据库选择了39名接受化疗的肺腺癌患者,通过绘制K-M曲线来分析PGK1与化疗疗效的关系。4.从TCGA数据库中收集肺腺癌患者数据,匹配临床信息后,纳入了450例患者的样本。首先根据患者EFGR突变与否,将其分成EGFR突变型和野生型两部分人群,进行PGK1表达分析。随后通过单因素COX以Microtubule Associat抑制剂及多因素COX回归分析筛选出OS独立影响因素;并根据中位值,将PGK1分成高表达和低表达组进行K-M曲线分析其与肺腺癌患者临床病理特征的关系。同时利用R语言,观察关键因子在不同分期中表达量的差异情况;最后建立结合PGK1表达及肿瘤分期的预后模型,从而预测肺腺癌患者的生存时间。P<0.05被认为具有显著的统计学差异。结果:1.PGK1与肺腺癌患者化疗敏感性相关。我们利用MCC、MNC及Bottle Neck三种方法,在GSE144520与GSE108214两个数据集进行差异基因分析,最后筛选出了在肺腺癌耐药细胞株中均高表达PGK1基因进行后续的研究;2.PGK1可能通过AKT/m TOR通路改变LUAD患者对化疗的敏感性。(1)通过MTS试验证明了在沉默PGK1后,A549细胞和PC9细胞的存活率下降,化疗敏感性增加;(2)根据PGK1表达情况,将PGK1分成高表达组和低表达组,并进行KEGG通路富集分析。结果显示,PGK1高表达可能与AKT/m TOR通路的激活显著相关。(3)因此我们又通过Western-blot实验,观察到沉默PGK1后p-AKT、p-m TOR蛋白表达水平明显下降。3.PGK1高表达会导致肺腺癌患者化疗疗效下降。在GEO数据库中选取了GSE42127队列进行临床验证,从队列中筛选出接受卡铂联合紫杉醇方案治疗的39名肺腺癌患者进行分析,我们发现,在治疗后死亡患者的组织中PGK1有高表达趋势(P=0.051),在调整年龄、性别、种族等因素后,死亡患者组中PGK1呈高表达(P=0.0286)。并且通过生存曲线我们也得知了,在所有接受化疗患者中PGK1高表达组患者的生存时间较短(P=0.087)Z-IETD-FMK分子量。4.PGK1高表达与肺腺癌患者预后不良相关。(1)我们把在TCGA数据库收集的450例患者分成EGFR突变型和野生型两部分人群,发现PGK1的Buffy Coat Concentrate表达无明显差异(P=0.18);(2)随后又进行单因素和多因素COX回归分析,结果表明PGK1、肿瘤浸润深度和淋巴结转移是肺腺癌患者OS的独立影响因素;(3)用K-M生存曲线分析PGK1高表达和低表达两组间患者预后的差异,其中女性(P=0.028)、年龄≥65(P=0.003)、除白种人外的其他种族(P=0.005)、T2(P=0.049)、M0(P=0.05)在PGK1高表达中与预后较差相关。(4)利用R语言,得出PGK1的表达与肿瘤T分期(P=0.037)、N分期(P=0.026)以及疾病分期(P=0.0095)呈正相关。5.结合PGK1表达与肿瘤分期建立肺腺癌患者预后模型。根据上述结果,建立PGK1表达与肿瘤分期的列线图,结果可知,该预后模型的敏感性和特异性均高于其他临床因素,接近真实世界中肺腺癌患者的生存时间。结论:PGK1通过激活AKT/m TOR通路降低肺腺癌化疗敏感性,且PGK1高表达导致肺腺癌患者化疗疗效不佳及预后不良。通过PGK1表达与肿瘤分期建立了预后模型,可以预测肺腺癌患者的生存时间。

目的 探讨lncRNA SNHG4在乳腺癌中的表达以及调控乳腺癌细胞铁死亡的作用机制。方法 收集2017年1月—2018年12月于我院乳腺外科进行手术治疗的100例乳腺癌患者癌组织及距肿瘤边缘3～5 cm的癌旁组织，应用RT-PCR技术分析SNHG4在乳腺癌组织及配对癌旁组织中的表达。构建SNHG4敲降的乳腺癌MDA-MB-468细胞系及过表达SNHG4的乳腺癌Hs578T细胞系，CCK-8法测定SNHG4对乳腺癌细胞增殖能力的selleck抑制剂影响，应用铁含量测定试剂盒及MDA测定试剂盒检测铁及ROS改变，Western blot实验检测GPX4及EP300蛋白表达，分析EP300与SNHG4及SNHG4与GPX4表达的相关transrectal prostate biopsy性。结果 SNHGNirogacestat分子式4在乳腺癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.01),且在侵袭转移能力强的Basal-Like型及ER(-)乳腺癌中高表达(P<0.01),SNHG4高表达与乳腺癌患者的总生存期(OS)及无病生存期(DFS)短相关(P<0.01)。敲降SNHG4导致细胞活力降低(P<0.01),且该作用可被铁死亡抑制剂逆转。机制方面，SNHG4通过上调GPX4表达抑制铁死亡，SNHG4上游可受到组蛋白乙酰基转移酶EP300的正向调控，EP300与SNHG4的表达正相关(P<0.01)。结论 SNHG4在乳腺癌中高表达且可通过EP300-SNHG4-GPX4轴抑制乳腺癌细胞铁死亡。

目的探究祖卡木颗粒对单纯低氧及低氧+Su5416诱导的低氧性肺动脉高压（HPH）小鼠的防治作用及其可能的作用机制。方法利用多种数据库及相关文献搜集祖卡木颗粒中10种单味药的活性成分，预测药物靶点并获得HPH相关靶点，进行网络构建及富集分析。通过单纯低氧及低氧+Su5416诱导建立HPH小鼠AG-221使用方法模型，观察小鼠右心室压力等主要药效学指标，Masson染色观察肺组织病理变化，WesternBloDinaciclibt检测肺组织中bax、bcl-2、PI3K、p-PI3K、eNOS、HIF-1α蛋白表达水平。结果筛选得到祖卡木颗粒共167种活性成分，与HPH有179个交集靶点，涉及PIK3CA、HIF1等靶点。验证结果显示，祖卡木颗粒可以显著降低HPUniversal Immunization ProgramH小鼠的右心室压力，减轻右心室肥厚，下调小鼠肺组织中bcl-2、HIF-1α蛋白的表达，上调bax、PI3K、p-PI3K、eNOS蛋白的表达。结论祖卡木颗粒可能通过调节bax/bcl及PI3K-eNOS/HIF-1α信号通路对HPH起到防治作用。

【目的】研究不同海拔高度与云南主栽核桃品种漾濞泡核桃果实经济性状、主要脂肪酸变异程度和相关关系，以期揭示其果实形态及营养成分的变异特性，为确定该品种的最佳适生栽培区和进一步开发应用提供理论基础。【方法】以漾濞泡核桃为试材，从海拔1500 m起，海拔每上升100 m进行果实采样，测定分析果实经济性状、脂肪酸品质指标，将海拔高度与各指标变化进行相关分析、逐步回归分析和决定程度分析。【结果】在海拔2300 m坚果粒重、仁重和出仁率均达到最高值，分别为14.genetic epidemiology006 g、7.958 g和56.8%。海拔1700 m坚果粒重、PLX-4720分子式仁重和壳厚最小，分别为9.298 g、4.961 g和1.05 mm。海拔高度与壳厚呈负相关，但未达到显著水平，P值为0.128D-Lin-MC3-DMA研究购买9，与出仁率、纵径、棱径呈显著正相关，与粒重、仁重、横径、三径均值呈正相关；海拔的变化对坚果大小和仁重影响较大；相关分析得出研究区内海拔高度与油酸、花生酸、花生油酸含量呈正相关，与棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、亚油酸和亚麻酸含量呈负相关；偏相关分析表明海拔高度与亚油酸、花生酸、花生油酸含量呈极显著正相关；海拔高度的变化对花生油酸直接作用最大，对亚油酸间接作用大于直接作用，海拔变化主要影响亚油酸、花生酸、花生油酸性状变异。【结论】海拔高度变化综合影响漾濞泡核桃坚果经济性状和主要脂肪酸含量，其中对果实的大小、仁重，果仁中的亚油酸、花生酸、花生油酸影响较大，对花生油酸变异的直接作用最大。

目的:评价EndoClot~?术中止血装置对巴马小型猪肝素化消化道溃疡活动性出血模型的有效性和安全性。方法:选择12头40～45 kg巴马小型猪,随机均分为对照组[应用EndoClot~?多聚糖止血系统(polysaccharide hemostatic system,PHS)]和实验组(应用EndoClot~?术中止血装置),每组6头,行肝素化消化道(上消化道胃,下消化道结肠)溃疡活动性出血模型止血实验,每头猪创建两个溃疡活动性出血创面,上、下消化道各1个,观察并比较两组ICI 46474术中止血成功率、实现有效止血的时间、止血粉沫总量和术后不同时间(7、14、21、28 d)创面愈合情况;采用HE染色对两组胃、胰腺、淋巴结、肠创面和脑组织进行病理学评价。结果:与对CyBio automatic dispenser照组(11/12,91.7%)相比,实验组止血成功率(12/12,100.0%)高,且实现有效止血的平均时间短、止血粉沫总量少,但差异STM2457分子式均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组相比,实验组术后第7、14天创面愈合状态评分明显增高(P<0.05),第21、28天两组创面愈合状态评分相比差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,对照组和实验组胃、胰腺、淋巴结、肠创面以及脑均未见组织坏死、异物肉芽肿、缺血、栓塞、毛细血管增生、纤维包膜形成及脂肪浸润。结论:EndoClot~?术中止血装置能够实现巴马小型猪肝素化消化道溃疡活动性出血的止血,安全有效,操作便捷。

近年来的流行病学研究表明,Biopsie liquide高脂饮食摄入是导致慢性肾病(Chronic kidney disease,CKD)发病率增加的重要因素。目前,CKD己成为全球范围内的公共健康问题,其治疗费用昂贵,给社会和家庭经济带来沉重负担。因此,寻求与健康相关的功能性食品以减轻CKD的严重性显得尤为重要。红酵母红素是一种存在于微生物体内的一种类胡萝卜素,作为天然功能原料具有较强的抗氧化能力和抗菌抗炎作用。本研究旨在探究红酵母红素的提取工艺,并基于网络药理预测及验证其对高脂饮食诱导的慢性肾病小鼠的影响,研究结果如下:(1)通过经典数学模型的拟合,建立了红酵母发酵动力学模型,并进行了扩大实验验证。分别选用Logistic模型和Luedeking-Piret方程进行非线性拟合,建立了菌体生长和红酵母红素生成的动力学模型方程,二个模型方程的R~2值分别为0.9952和0.9771,拟合效果良好,能较好的反映出红酵母发酵过程中各项指标的动态变化趋势。15 L发酵罐放大实验验证得出发酵所得红酵母红素的浓度为16.54×10~(-3) g/L。(2)优化了红酵母破壁提取工艺,并研究了不同种类酶对红酵母破壁效果的影响。结果表明红酵母的破壁效果,溶菌酶>β-甘露聚糖酶>碱性蛋白酶>纤维素酶>β-葡聚糖酶。复合酶(溶菌酶、β-甘露聚糖酶、碱性蛋白酶、纤维素酶和β-葡聚糖酶)的破壁效果更好。通过单因素和响应面实验发现,复合酶添加量为10 g/L、酶解温度50°C、酶解时间6 h时,提取率最高,总类胡萝卜素的提取率可达81.09%±1.40%。高压均质与酶解法联用破壁效果最佳,提取率可达87.00%±0.29%。破壁后的红酵母菌体呈现不规则形状,表面褶皱且不光滑,细胞壁失去完整性,电导率增加,比表面积增大,孔体积增加。(3)基于网络药理学预测红酵母红素干预慢性肾病的机制。根据基因本体论和京都基因与基因组百科全书分析表明,红酵母红素干预慢性肾病的生物功能和关键信号途径主要与炎症反应和脂质应答等生物功能相关,主要涉及Toll样受体(Toll Like Receptor,TLR)信号、丝裂原活化蛋白激酶信号与核因子κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号传导等11条关键途径;此外,通过分子对接技术验证,红酵母红素具有靶向TLR4等蛋白干预慢性肾病的潜力。(4)红酵母红素通过调节TLR4/NF-κB信号通路来干预由高脂饮食引起的慢性肾病。红酵母具有抗氧化作用,显著增加慢性肾病小鼠肾脏中总超氧化物岐化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量,同时抑制丙二醛积累。红酵母红素在一定程度上修复了高脂饮食引起的肾功能和肾结构损伤。此外,红酵母红素还能显著降低肿瘤坏死因子α、白介素-6与白介素-1β等炎症因子含量与m RNA表达,抑制TLR4/NF-κB信号通路关键Z-IETD-FMK抑制剂靶点TLR4、髓分化因子88、β干扰素TIR结构域衔接蛋白与NF-κB等的转录VP-16化学结构和表达,从而发挥抗炎作用。并且,在包含红酵母红素的两组复合物中,小肠靶向释放组总体干预效果优于快速释放乳液组。

杂草稻(Oryza sativa f.spontanea)是世界稻田的恶性杂草,对栽培稻生产带来极大挑战。杂草稻具有很强的落粒性,通过散落种子的传播,建立持续繁衍的群体,极难防控。同时,栽培稻中的耐除草剂基因(包括转基因)也可以通过花粉介导的基因漂移转移到杂草稻,导致更严重的杂草稻问题。前人报道利用转基因弱化技术,可以通过基因漂移进入杂草稻的干扰基因作用,降低种子落粒性,避免通过基因漂移而获得除草剂抗性杂草稻种子的扩散,从而降低杂草稻的危害,对于杂草稻防治有巨大的应用潜力。目前已有一些利用修饰落粒调控基因减少杂草稻种子落粒的研究报道,但是对这些基因位点在杂草稻落粒基因弱化技术中的深入分析和应用潜力的挖掘,还缺少必要的研究与评价。为填补上述研究空白,本研究运eggshell microbiota用CRISPR-Cas9基因编辑工具对杂草稻中SH4与q SH1主效落粒基因进行了编辑,分别获得并筛选出SH4基因编辑、q SH1基因编辑以及SH4/q SH1双基因编辑的杂草稻转化事件13个。通过对基因编辑植株的种子落粒性检测、小穗轴节离层部位的组织切片观察、种子产量相关性状的检测、转录组测序、基因表达量检测、植物激素含量检测等研究,分析和评价了SH4与q SH1基因编辑对杂草稻落粒性以及对种子产量相关性状的影响,初步探索了杂草稻SH4与q SH1基因编辑突变体MRTX1133供应商对其种子落粒性的影响及其可能调控机制。通过上述系列研究,获得以下结果:1.单独或同时对SH4与q SH1基因进行编辑显著降低了杂草稻种子的落粒性。与野生型杂草稻亲本(落粒指数为100%)相比,单独编辑SH4基因、q SH1基因以及同时编辑SH4和q SH1双基因,导致杂草稻的落粒指数显著降低(落粒指数为11%～28%),并且显著低于寿香1号栽培稻的落粒性(落粒指数为54%);在基因编辑杂草稻植株小穗轴节切片中未观察到完整发育的离层组织。上述结果表明,通过对SH4与q SH1基因编辑影响了小穗轴节离层的正常发育和形成,有效降低了杂草稻的种子落粒性。2.单独编辑SH4或q SH1基因没有显著改变种子的产量相关性状。结果显示,单独编辑SH4或q SH1基因均没有显著影响杂草稻种子的千粒重,但种子的长度减少2%～17%;同时编辑SH4与q SH1双基因杂草稻,则显著降低了杂草稻种子的千粒重与长度。上述结果表明,单独编辑SH4或q SH1基因,不会对杂草稻产量相关性状产生明显不利影响,落粒基因具有用于研发栽培稻转基因弱化技术的潜力。3.单独或同时编辑SH4与q SH1基因显著抑制了杂草稻中落粒相关基因的表达。转录组测序分析与荧光定量PCR检测的结果一致表明,与杂草稻亲本相比,基因编辑杂草稻小穗轴节组织中的落粒性状相关数量性状位点(QTLs),包括CPL1、SH4、SHAT1、Os SH1、Os SH15、q SH1、SH5和SH8;脱落酸(ABA)合成及信号传导基因ZEP、NCED1.1、NCED1.2、SDR1、SDR、PYL3、PYL4、PP2C39、SAPK5和BZIP23等;细胞壁水解酶基因PME34、PG、XTH28和MAN4的转录水平均发生显著下调;表明SH4与q SH1基因表达受抑制后,脱落酸的合成与信号传导受到抑制,细胞壁水解酶转录表达降低,离层组织发育受阻,进而降低了杂草稻种子的落粒性。4.单独或同时编辑SH4与q SH1基因显著降低了杂草稻种子的脱落酸含量。与杂草稻亲本相比,基因编辑杂草稻的小穗轴节组织在种子发育后期阶段的脱落酸含量发生了显著的降低,但同时与种子大小相关的生长素(auxin a,auxin b)与细胞分裂素(t Z,c Z,t ZR,c ZR)含量则没有发生一Nirmatrelvir致的显著变化。这些结果表明,脱落酸含量的降低是导致杂草稻种子落粒性降低的重要原因之一。综上所述,种子落粒相关基因SH4与q SH1的编辑,可能是通过抑制脱落酸的合成及其信号通路影响小穗轴节中离层组织的形成,从而显著降低杂草稻的落粒性,本研究得出的上述结论,有助于杂草稻落粒性及其调控机制的深入探究。此外,由于单独编辑SH4或q SH1基因未对种子产量造成显著不利影响,因而推断对栽培稻上述基因进行编辑也不会影响产量,因此落粒基因编辑在研发转基因弱化技术和降低转基因向杂草稻基因漂移风险的应用中具有良好前景,为利用转基因弱化技术来防治杂草稻提供了科学依据和有效策略。

抑郁症是危害人类健康生活的常见精神类疾病，其发病机制尚未明确。目前认为神经炎症假说与抑郁症病理生理关系密切。该假说提出，在抑郁症病程中，持续的刺激过度激活小胶质细胞（Microglia，MG）的M1极化表型，通过分泌大量促炎因子，造成脑部病理损伤，加重抑郁的病理发展。因而通过调maladies auto-immunes控MG极化表型，可能是改善抑郁症的一种有效干预策略。临床会应用抗www.selleck.cn/products/r428炎药物改善患者Integrase抑制剂抑郁情绪，虽然有一定的疗效，但存在适用范围窄，不良反应明显等局限性。中药具有多靶点、多途径的特点，其药性内容丰富与复杂。近年来，研究发现诸多中药通过修复线粒体功能障碍、促进脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor，BDNF）、调节蛋白表达、调节神经炎症反应等机制发挥了抗抑郁作用。因此，本文以MG为治疗靶点，对中药和复方减轻神经炎症改善抑郁症的文献研究进行梳理和探讨，期望为临床治疗抑郁症提供新的治疗思路。

目的 探讨CT评估culinary medicine自身免疫性肝病(AILD)患者腹部淋巴结肿大的临床价值。方法 选取2015年1月-2019年12月在天津医科大学总医院就诊的136例AILD患者(设为AILD组)，并以65例其他慢性肝病患者作为对照组。回顾性分析两组患者的腹部CT资料，统计腹部不同区域淋巴结的体积及数目分布，应用受试者工作特征曲线下面积(AUROC)评估腹部淋巴结肿大对AILD的诊断价值，并采用logistic回归分析肝周淋巴结肿大的危险因素。结果 AILD组腹部淋巴结的平均体积LY294002[(0.47±0.61) cm~3 vs.(0.25±0.20) cm~3]及数目[(8.10±4.97)个vs.(4.26±3.25)个]均较对照组增大或增加(P<0.001)。肝周淋巴结数目联合肠系膜淋巴结体积诊断AILD的AUROC为0.816(P<0.001)。77例行肝组织活检的AILD患者中，肝周淋巴结阳性组肝组织中界面性肝炎的发生率高于肝周淋巴结阴性组(52.31%vs. 16.67%，χ~2PEG300浓度=5.169,P<0.05)。多因素logistic回归分析显示，血清IgG抗体水平增高是肝周淋巴结肿大的独立危险因素(OR=1.012,95%CI 1.000～1.024,P<0.05)。结论 肝周及肠系膜淋巴结肿大有助于AILD的鉴别诊断，肝周淋巴结肿大与AILD肝炎性活跃度相关。

目的 探讨富血小板血浆(PRP)对脂多糖(LPS)诱导的BV2细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法 BV2小胶质细胞分成正常组、10%PRP组、LPS组和10%PRP+LPS组。用LPS(1μg/ml)激活后，光学显微镜查看细胞Ascomycetes symbiotes形态变化，TUNEL法测定细胞凋亡selleck MK-1775水平。Western印迹检测p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p-蛋白激酶B(AKT)、P53、B细胞淋巴瘤(Bcl)-相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、Cleaved-胱天蛋白酶(Caspese)-9、Cleaved-Caspese-3和自噬相关蛋www.selleck.cn/products/rsl3白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ蛋白表达。结果 与正常组相比，LPS组BV2细胞因被激活而呈现明显的阿米巴样改变，TUNEL阳性细胞数明显增加(P<0.01)。与LPS组比较，不同浓度PRP(3%、5%、10%)显著降低了BV2细胞的活化和凋亡水平(P<0.01)。与正常组相比，10%PRP组p-PI3K和p-AKT表达明显增加(P<0.01);LPS组P53、Bax、Cleaved-Caspese-9、Cleaved-Caspese-3和LC3Ⅱ表达明显升高，p-PI3K、p-AKT和Bcl-2表达显著下调(P<0.01)。与LPS组比较，10%PRP+LPS组P53、Bax、Cleaved-Caspese-9、Cleaved-caspese-3和LC3Ⅱ表达明显降低，p-PI3K、p-AKT和Bcl-2表达明显升高(P<0.01)。结论 PRP能通过P53/Caspase-3途径改善LPS诱导的BV2小胶质细胞凋亡。