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PM2.5是造成全球大气污染的重要污染源,尽管其在地球大气组分中占比较低,但因其包含多种毒性成分、在空气中滞留时间久、输送距离远等特点,能够增加急性肺损伤(ALI)、慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)等多种呼吸系统疾病的发病率或死亡率。在细胞层面,PM2.5导致ALI的机制十分复杂,涉及多种细胞死亡方式和信号通路的改变。近期有研究报道PM2.5能够通过诱导内皮细胞氧化应激和铁超载导致细胞发生铁死亡,然而PM2.5是否能够通过诱导细胞铁死亡导致ALI及其分子机制尚不明确,需要进一步研究。方法:本实验主要包括两部分:第一部分主要体外构建PM2.5诱导的ALI模型,确立铁死亡在PM2.5诱导ALI中的主要作用。我们选取支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞)作为研究对象,制备不同浓度的PM2.5有机萃取溶液,与细胞共培养后检测细胞活性、脂质过氧化、铁离子水平以及铁死亡特征性蛋白的表达水平,阐明PM2.5体外诱导ALI的毒理作用。第二部分在第一部分实验的基础上,探究PM2点击此处.5诱导铁死亡发生的具体分子机制,应用分子生物学(敲低、过表达、q PCR)、免疫学(Western Blot、免疫共沉淀)等方法探究铁死亡发生时AMPKBeclin1信号通路起到的主要作用,阐明PM2.5通过激活AMPK-Beclin1信号通路促进细胞铁死亡的分子机制。另外,本实验使用PM2.5滴鼻方式诱导小鼠体内ALI模型,通过体内实验证实PM2.5激活AMPK-Beclin1信号通路诱导铁死亡导致小鼠ALI的新机制。结果:1、在体外,PM2.5以剂量依赖性方式导致细胞活性下降、脂质过氧化增强、铁死亡相关蛋白表达紊乱,具体表现为铁贮存蛋白(FTH-1、FTL)和铁内向转运蛋白(TFR)表达增强、铁外向转运蛋白(FPN)表达减弱、脂质过氧化蛋白(COX-2、NOX-4)表达增强、铁死亡特征性蛋白(氨基酸转运蛋白x CT/SLC7A11)表达受抑制。铁死亡抑制剂(DFO、Fer-1)能够部分缓解PM2.5造成的细胞活性下降,减轻脂质过氧化水平,降低不稳定铁和稳定铁水平。2、PM2.5造成铁死亡过程中,AMPK-Beclin1信号通路被激活,SLC7A11的表达被抑制。敲低Beclin1后,PM2.5触发的铁死亡被抑制,表现为脂质过氧化和铁超载程度下降,细胞活性较非敲低组明显升高。体内实验显示敲低Beclin1可以改善肺损伤,使炎症水平下降。过表达Beclin1后,显示出与敲低相反的结果,即脂质过氧化水平和铁超载水平较对照组加重,细胞活性下降,小鼠肺损伤程度更严重。免疫共沉淀结果显示Beclin1通过直接与SLC7A11结合,抑制System XC-活性,导致转运进入细胞的胱氨酸减少,GSH合成不足,导致铁死亡发生。同样,给予AMPK抑制剂Compound C和激活剂AICAR,通过影响AMPK活性来调控Beclin1表达,与上述敲低和过表达Beclin1显示出相似的实验结果LY2835219。这些结果表明AMPK-Beclin1信号通路在促进PM2.5诱导的铁死亡中起到重要作用。实时荧光定量PCR结果证实低剂量PM2.5激活SLC7A11的转录,高剂量时轻度抑制其转录,表明System XC-的活性抑制主要发生在蛋白质水平,而非转录水平。3、在体内,PM2.5造成明显的肺部病理损伤,表现为肺泡内液体渗出、水肿、大量炎性细胞浸润;肺组织铁沉积增多;线粒体皱缩变圆、膜增厚、嵴破坏。肺泡灌洗液姬姆萨染色显示中性粒细胞和淋巴细胞大量浸润聚集;ELISA结果表现为炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平显著升高。铁贮存蛋白(FTH-1)表达增强、铁死亡特征性蛋白(SLC7A11)表达受抑制。使用AAV-sh RANBeclin1体内敲低Beclin1,结果发现小鼠肺部损伤和炎症水平有所减轻,线粒体损伤得到缓解,铁超载和脂质过氧化也相应减轻。相似的,体内腹腔注射AMPK抑制剂Compound C后,抑制下游Beclin1的表达,与体内敲低Beclin1表现出相似的结果。4、Beclin1与自噬密切相关,但自噬抑制剂羟氯喹(HCQ)和巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1)仅轻度逆转了PM2.5造成的细胞存活率下降,而脂质过氧化和铁超载程度未见显著缓解。PM2.5能够激活自噬,自噬抑制剂阻断自噬流,但并没有抑制铁死亡发生,表明PM2.5激活Beclin1主要通过诱导铁死亡导致ALI,并非自噬。结论:综上所述,本研究探究了AMPK-Beclin1信号通路介导的铁死亡在PM2.5诱导的ALI中的作用及其分子机制,为理解PM2.5对呼吸系统疾病的毒理作用提供新思路,为肺损伤的治疗microbiome composition提供新靶标。

目的探讨自噬介导铁死亡在苯诱导大鼠血液毒性中的作用。方法 100只Wistar大鼠随机分为4组:对照组、染苯组、染苯组+铁死亡抑制剂组和染苯组+自噬抑制剂组,每组20只。染苯组按照200μl/100 g大鼠给药量于背部皮下注射苯油混合物,染毒剂量为800 mg/kg;对照组注射等量玉米油;抑制剂组按照400μl/100g大鼠给药量进行腹腔注射,剂量为10 mg/kg,每周注射三次,连续注射4周。于第0、7、14、21、28天观察大鼠体重变化,并内眦静脉取血,用血细胞计数仪检测各组大鼠白细胞(WBC)数量、红细胞(RBC)数量和血红蛋白(Hgb)水平变化。染毒四周后,HE染色法观察各组大鼠股骨的病理学变化;铁离子试剂盒检测各组大鼠血清Fe~(2+)含量;丙二醛(MDA)试剂盒检测各组大鼠血清MDA含量;Western Blot法检测各组大鼠股骨骨髓单个核细胞(BMMNCs)铁死亡相关蛋白(Photoelectrochemical biosensorTFRC、、ACSL4、GPX4、FTH1)和自噬相关蛋白(p62、LC3B)的表达水平。结果与对照组相比,染毒21天、28天后的模型组大鼠体重下降显著(P<0.05)。在第14天、第21天、第28天,染苯组大鼠外周血WBC数量较对照组显著下降(P<0.05),提示大鼠造血障碍毒性模型建立成功;股骨病理结果显示,与对照PLX-4720试剂组比,染苯组大鼠造血细胞减少;与对照组比,染苯组大鼠血清中MDA水平、Fe~(2+)水平显著增高。Western Blot结果显示,与对照组相比,染苯组大鼠BMMNCs TFRC、ACSL4、LC3B蛋白表达水平显著增高,GPX4、p62、FTH1蛋白表达水平显著降低;与染苯组比,自噬抑制剂和铁死亡抑制剂组大鼠MDA、Fe~(2+)水平、TFRC、ACSL4、LC3B蛋白表达显著性降低,GPX4、FTH1、p62显著增高。结论苯可诱导大鼠造血障selleck产品碍,自噬抑制剂3MA可抑制苯诱导的大鼠骨髓细胞铁死亡水平,减轻苯诱导的大鼠造血障碍;铁死亡抑制剂Fer-1也减轻了苯诱导的大鼠造血障碍。提示自噬介导的铁死亡在苯诱导大鼠血液毒性发生中有重要作用。

目的：骨髓检验诊断再生障碍性贫血，血小板白细胞血红蛋白水平分析。方法：选取在2017年3月—2023年1月期间我院诊治的30例再生障碍性贫血患者作为实验组，再选取同期医院接受治疗30例非血液病患者作为对照组，对于两组研究样本均实施骨髓检验，对比骨髓检验血小板、白细胞、血红蛋白水平。结果：30例Wnt-C59体外再生障碍性贫血患者和30例非血液病患者外周血常规血小板、白细胞、血红蛋白水平对比，实验组再生障碍性贫血患者血小板、白细胞、血红蛋白水平均低于对照组非血液病患者（P<0.05）。两组患者骨髓增生程度比较，实验组再生障碍性贫血患者骨髓增生程度Ⅰ级、Ⅱ级占比低于对照组非血液病患者（P<0.05），实验组再生障碍性贫血患者骨髓增生程度Ⅲ级、Ⅳ级和Ⅴ级占比高interstellar medium于对照组非血液病患者（P<0.05）。结论：诊断再生障碍性贫血疾病，应用骨髓检验具有较高的应用价VP-16细胞培养值，属于临床比较可靠的诊断措施。

研究背景、目的脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是一种极其严重的中枢神经系统创伤性疾病,会导致患者永久的神经功能障碍和运动功能障碍,且目前尚无有效的治疗手段。血脊髓屏障(Blood-spinal cord barrier,BSCB)是位于血液和脊髓实质之间的屏障,可以防止有害物质进入脊髓。损伤早期保护血脊髓屏障对限制脊髓损伤的继发性破坏和促进脊髓损伤的修复至关重要。铁死亡主要发生在脊髓损伤早期,在脊髓微环境失衡中具有关键作用。本课题组前期研究表明,系统性抑制铁死亡能有效改善脊髓损伤的远期恢复效果。然而铁死亡与脊髓损伤后血脊髓屏障继发性破坏之间的关系尚不清楚。因此,本研究进一步探究铁死亡在血脊髓屏障的继发性破坏中的作用,揭示血管内皮细胞(Endothelial cell,EC)发生铁死亡的关键通路,阐明铁死亡抑制剂早期给药保护血脊髓屏障免于继发性破坏的关键机制,为脊髓损伤的修复提供新靶点和新思路。研究方法1.应用Impactor Model Ⅲ打击器建立大鼠中度脊髓挫伤模型,造模条件为打击高度25 mm、打击重量10 g。实验动物分组:体重在220-240 g之间的8周龄雌性Wistar大鼠,随机分为3组:假手术组(Sham组),单纯损伤组(SCI组),Liproxstatin-1(Lip-1)干预组(Lip-1组)。1 mL Lip-1在造模后30 min通过腹腔注射给药,每日1次,持续3天。2.伊文思蓝(Evansblue,EB)渗漏实验检测血脊髓屏障的通透性;紧密连接蛋白ZO-1(Zonula occludens-1)的免疫荧光实验检测血脊髓屏障的功能。3.建立脑微血管内皮细胞(bEnd.3)铁死亡模型,检测其铁死亡相关指标的含量及其表达的紧密连接蛋白的变化。基于大鼠脊髓损伤模型,将血管内皮细胞(标志物:RECAI)分别和铁死亡关键酶ACSL4、15-LOX做免疫荧光共染,RECA1与ACSL4、15-LOX荧光的共定位分析揭示Lip-1对血管内皮细胞铁死亡的抑制作用。4.使用CD68标记大鼠脊髓组织中巨噬细胞、MPO标记中性粒细胞,检测损伤部位CD68和MPO的荧光强度观察免疫细胞的浸润情况。5.通过对大鼠脊髓组织星形胶质细胞(GFAP)和神经元(NeuN)的免疫荧光染色检测Lip-1的神经保护作用。通过行为学评价(BBB评分、CatWalk步态分析),电生理检测(感觉诱发电位、运动诱发电位)和组织学染色(H&E染色)等观察Lip-1的修复效果。研究结果1.铁死亡抑制剂Lip-1减轻大鼠脊髓损伤后血脊髓屏障的继发性破坏伊文思蓝染色结果显示损伤后3天,大鼠脊髓组织有明显的蓝色染料渗漏,Lip-1治疗后,血脊髓屏障的渗漏明显减轻。血管内皮细胞(RECA1)和紧密连接蛋白(ZO-1)的免疫荧光共定位染色显示脊髓损伤后3天ZO-1在血管内皮细胞Dorsomorphin molecular weight中的表达减少,Lip-1可以增加血管内皮细胞中ZO-1的表达量。2.Lip-1抑制bEnd.3细胞铁死亡并增加其紧密连接蛋白的表达7.66 μM的RSL3(CC50)诱导bEnd.3细胞发生铁死亡后,细胞中GSH含量减少,GPX4表达减少;ACSL4和15-LOX表达增加;氧化态的BODIPY 581/591 C11表达增加;且bEnd.3细胞ZO-1的表达量也大量减少。用Lip-1和RSL3联合干预bEnd.3细胞,结果发现细胞中GSH含量升高、GPX4含量也明显增加、ACSL4和15-LOX表达降低、还原态的BODIPY 581/591 C11大量增加,最重要的是,细胞表达的ZO-1明显增多。3.Lip-1抑制大鼠脊髓损伤后血管内皮细胞的铁死亡损伤后3天,脊髓selleck NMR组织免疫荧光染色结果显示SCI组RECA1与ACSL4、15-LOX的共定位较Sham组增高,即血管内皮细胞表达的ACSL4和15-LOX在损伤后3天升高。给予Lip-1治疗后,RECA1与ACSL4、Medical Help15-LOX的共定位减少,即Lip-1可以降低血管内皮细胞中ACSL4和15-LOX的水平。4.Lip-1减轻脊髓损伤后巨噬细胞和中性粒细胞的浸润组织免疫荧光显示脊髓损伤后7天CD68荧光强度增加,损伤后3天MPO荧光强度增加。而Lip-1组组织中CD68和MPO的荧光强度明显比SCI组弱,表明Lip-1可以抑制损伤后脊髓组织中巨噬细胞和中性粒细胞的浸润。5.Lip-1减少胶质瘢痕的产生并增加脊髓损伤后神经元的存活数量损伤后8周大鼠脊髓的免疫荧光结果显示,SCI组损伤边缘GFAP阳性的荧光强度明显比Sham组高,表明损伤后8周有大量胶质瘢痕产生。Lip-1治疗后,GFAP阳性的荧光强度降低,即Lip-1可以减少损伤后8周脊髓组织中的胶质瘢痕。此外,Lip-1组损伤周围区域NeuN阳性的细胞数量比SCI组显著增加,表明Lip-1可以增加损伤后脊髓中的神经元数量。6.Lip-1可以促进大鼠脊髓损伤的功能恢复大鼠脊髓损伤后8周的H&E染色结果显示,Lip-1组的大鼠比SCI组保留更多的脊髓组织。BBB评分结果显示,Lip-1组的分数比SCI组升高,差异具有统计学意义。CatWalk步态分析的足印结果可以看出,Lip-1组大鼠的双后肢足印明显较SCI组清晰、完整,即双后肢有较好的恢复。电生理检测结果显示,Lip-1组运动诱发电位和感觉诱发电位的潜伏期较SCI组短、波幅较SCI组高。以上结果表明,Lip-1可以有效改善脊髓损伤后大鼠的功能恢复。研究结论1.铁死亡抑制剂Lip-1减轻血脊髓屏障的继发性破坏,减少外周炎症细胞浸润,降低脊髓损伤继发性损伤介导的微环境失衡。2.铁死亡抑制剂Lip-1通过脂质过氧化途径抑制血管内皮细胞铁死亡,稳定血脊髓屏障结构。3.铁死亡抑制剂Lip-1可以有效地抑制胶质瘢痕生成,保护残存神经元,修复脊髓损伤后大鼠的运动功能和神经传导功能。

Ⅵ型分泌系统(Type Ⅵ secretion systems,T6SS)作为双层跨膜分泌系统参与细菌的不同生物过程,与竞争细菌、宿主和其它环境因素等相互作用中发挥重要作用。T6SS效应蛋白Tae4作为一种裂解酶主要通过作用于细菌细胞购买RSL3壁上的肽聚糖的特殊键位使其断裂从而起到了杀灭细菌的作用。近年来,抗生素的长期使用加速了畜禽体内病原耐药性的产生,给人类及动物性食品安全带来了一定的隐患和潜在威胁,因此加强对Tae4蛋白的研究,对后续抗生素减量替代具有重要的意义。本试验先将重组质粒pET-28a-Tae4导入BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,通过诱导表达得到重组蛋白Tae4,后通过PyMol等软件对Tae4蛋白进行3D结构建模,经过稳定性试验及注射安全性试验检测重组蛋白的储存性能及安全性。最后评价其对金黄色葡萄球菌及单核增生李斯特氏菌的抑菌效果,MIC以及与抗生素联用效果。本研究为抗生素减量替代提供新的思路,主要研究内容和结果总结如下:1.Tae4蛋白的原核表达纯化及稳定性和安全性测定通过化转将重组质粒pET-28a-Tae4导入BL21感受态细胞中,PCR检测后取阳性菌株进行诱导表达,使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对目的蛋白的表达情况进行检测,经条件优化,Tae4蛋白在上清液进行表达诱导最佳条件为:IPTG浓度为0.5mmol/L,温度为16℃,诱导时间为16 h至18 h。利用磁珠对重组蛋白进行纯化,使用终浓度为250mmol/L的咪唑可洗脱分子量大小约为21.5 kDa的单一目的蛋白。使用PyMol等软件成功对Tae4蛋白进行3D模型构建,后续的稳定性试验表明重组蛋白在4℃和37℃条件下处理5 d内未观察到有明显的降解现象。为了评估Tae4的安全性,对小鼠进行注射安全性试验,结果表明各试验组动物的食欲和精神状况良好,未出现死亡情况,皮肤注射部位无炎症、坏死和过敏反应,各器官无出血点、积液等异常反应,各组织均未出现明显病理变化,初步证明了Tae4对小鼠机体无不良影响。2.重组蛋白Tae4对金黄色葡萄球菌Hepatic resection的抑菌作用为了探究重组蛋白Tae4对金黄色葡萄球菌(Staphylococcu saureus,S.aureus)的抑制菌效果,首先通过琼脂孔扩散试验进行测试,观察结果发现重组蛋白对3株标准株及3株分离株均有抑菌圈。后续对其进行了最小抑菌浓度(Minimal Inhibit Concentration,MIC)测定,结果显示重组蛋白Tae4对金黄色葡萄球菌的MIC为250μg/mL。选取实验室保存的6株耐药菌株(S.aureus(ATCC 6538)、S.aureus 63、S.aureus 67、S.aureus 76、S.aureus 92、S.aureus 93)通过重组蛋白与抗生素联用抑菌试验评价Tae4的抗生素替代效果,结果表明当联用时,对金黄色葡萄球菌Etoposide临床试验的抑制作用得到了一定的增强,在低浓度蛋白与低浓度的青霉素(重组蛋白浓度125μg/mL和PG浓度为200 U/mL)联用时,抑菌效果得到不同程度的提升,且抗生素的使用量得到了降低。3.重组蛋白Tae4对单核增生李斯特氏的抑菌作用为了研究重组蛋白Tae4对单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,L.Monocytogenes)的抑菌效果,经过琼脂扩散试验进行测定,结果表明重组蛋白对4株分离株都有抑制作用,而后使用点板法及微量肉汤稀释法对重组蛋白的MIC进行了测定,得出其对单增李斯特的MIC为125μg/mL。最后通过重组蛋白及与抗生素联用试验,将重组蛋白浓度和PG浓度分别调整为125μg/mL和200 U/mL进行效果评价,结果显示抑菌效果均得到了一定的提升。综上所述,本试验成功对T6SS效应蛋白Tae4进行了表达与纯化,并构建了蛋白3D结构,后初步证明了蛋白对小鼠无不良影响且安全无毒害。后续测定了其对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用且与青霉素联用时起到了减少抗生素使用量的作用,Tae4对单核增生李斯特氏菌也具有抑菌效果,与青霉素联用时也降低了抗生素的用量,证实了其在抗生素减量方面的可行性。其结果为后续Tae4进一步应用提供理论依据和数据支撑。

目的 观察普拉洛芬联合玻璃酸钠滴眼液治疗青光眼术后干眼症的临床效果。方法 选取2019年7月—2020年7月北京首颐矿山医院诊治的青光眼术后干眼症患者70例，采用信封随机化分组模式分为研究组和对照组，每组35例，对照组给予玻璃酸钠滴眼液治疗，研究组给予普拉洛芬联合玻璃酸钠滴眼液治疗，2组患者均治疗1个月。比较2组患者治疗前后泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SⅠt)、视觉相关生存质量量表(VFQOL)评分、血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平、血selleck HPLC清视黄酸诱导蛋白6(STRA6)水平、医院焦虑抑郁情绪测量表(HAD)评分、视网膜中央区域动脉收缩期峰值血流速度、舒张期峰值血流速度及阻力指数。结果 治疗1个月后，2组患者BUT均长于治疗前，且研究组长于对照组(P<0.01);研究组患者SⅠt长于治疗前及对照组(P<0.01),对照组患者SⅠt与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05);2组symbiotic bacteria患者各项VFQOL评分均高于治疗前，且研究组高于对照组(P<0.05或P<0.01);2组患者血清MMP-2及STRA6水平均低于治疗前，且研究组低于对照组(P<0.01);2组患者焦虑及抑郁评分均低于治疗前，且研究组低于对照组(Torin 1分子量P<0.01);治疗1个月后，2组患者视网膜中央区域动脉收缩期峰值血流速度及舒张期峰值血流速度均较治疗前增加，阻力指数均较治疗前降低，且研究组变化幅度大于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 普拉洛芬联合玻璃酸钠滴眼液治疗青光眼术后干眼症可控制眼表反应，调节眼血流状态，提升生存质量，值得应用。

肝细胞癌（hepatocellular caselleckchem Docetaxelrcinoma,HCCantitumor immune response）是临床常见的恶性肿瘤之一，该病具有起病隐匿、恶化率高、预后极差等特点，临床早期诊断和治疗缺乏特异性分子标志物。近年来越来越多的调节性细胞死亡（regulated cell death,RCD）方式逐渐被认识，研究者发现多种RCD在HCC发生、发展的过程中发挥着促癌和抑癌的双重作用，不同RCD之间能够相互作用、相互调控，早期阶段通过促进炎症反应、纤维化形成和血管侵袭以加重对肝细胞的损伤，但晚期阶段却能提高抗癌药物的敏感性以限制肿瘤生长。基于肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）的RCD靶向干预治疗也日趋成为研究热点，目前针对HCC不同阶段的治疗方获悉更多案已有不同的RCD靶向抗癌药物。该文着重介绍了凋亡、坏死性凋亡、焦亡、自噬和铁死亡等不同类型RCD调控HCC作用机制的研究进展，归纳总结了RCD对TME的靶向干预作用，以期为深入研究HCC中RCD的复杂调控机制和临床靶向治疗药物的研发应用提供理论参考和指导。

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是一种高异质性、高发病率和高死亡率的恶性肿瘤,基于HCC相关的分子特征建立分子分型方法,对改善患者预后具有重要意义。细胞焦亡和铁死亡作为两种新近发现的调节性细胞死亡方式,与HCC的发生、发展和治疗都密切相关,具有用于HCC分子分型的潜力。本文通过对大型肿瘤基因组数据库进行生物信息学分析,探究细胞焦亡和铁死亡用于HCC分子分型的潜力。具体如下:1、基于细胞焦亡的肝细胞癌分子分型生物信息学研究(1)基于与HCC相关的细胞焦亡基因的表达,我们将HCC患者分成了两个具有显著异质性的细胞焦亡分子亚型,Py High和Py Low,Py High亚型具有更高的细胞焦亡表达。(2)单因素和多因素Cox分析表明我们所建立的细胞焦亡分子分型方法是HCC的潜在独立预后指标,Py High亚型可能预示着患者的更差预后(单因素Cox:HR=1.668,P=0.011;多因素Cox:HR=1.633,P=0.020)。分层生存分析结果显示,该细胞焦亡分子分型方法还可用于TNM(III+IV)期和MYC非扩增型亚群患者的预后预测(Log-rank检验,P<0.01)。(3)基于癌症药物敏感性基因组学数据库的数据,我们为Py Low亚型和Py High亚型分别预测到了5个和31个不同的敏感化合物,其中分别有2个和13个已被文献报道有抗HCC活性,其中又有三个上市药物已有HCC相关临床实验,包括吉非替尼、吉西他滨和福瑞替尼(前者对Py Low亚型敏感,后两个对Py High亚型敏感),表明该分子分型方法有望助力HCC的敏感化合物合理选择。(4)机制分析表明细胞焦亡亚型在HCC中的预后和化合物敏感性异质性可能与肿瘤免疫,特别是细胞因子相关。Py High亚型具有更丰富的淋巴细胞浸润和更高水平的细胞因子相关基因表达。2、基于铁死亡的肝细胞癌分子分型生物信息学研究(1)基于结合前馈神经网络和Cox比例风险模型的深度神经网络模型所提取的与HCC预后相关的铁死亡特征,我们将HCC患者分成了两个具有显著异质性的铁死亡分子亚型,Fe High和Fe Low。Fe High亚型患者具有更高的铁代谢、ROS代谢和脂质代谢相关通路活性。(2)单因素和多因素Cox分析表明我们所建立的铁死亡分子分型方法是HCCProtein Biochemistry具有潜力的独立预后指标,Fe Low亚型患者的预后可能更差(单因素Cox:HR=3.784,P<0.001;多因素Cox:HR=3.816,P<0.001)。分层生存分析结果显示,该铁死亡分子分型方法的预后预测能力具有广泛的人群适用范围。在TNM(I+II)期、TNM(III+IV)期、TP53野生型、TP53突变型、MYC非扩增型和MYC扩增型特定亚群患者中,它依旧能较好地区分高低风险人群(Log-rank检验,除MYC扩增型P=0.007外,其它均P<0AM-2282体内实验剂量.001)。(3)化合物敏感性分析显示两个铁死亡亚型的化合物敏感谱也具有异质性,Fe High亚型和Fe Low亚型分别被预测到了13个和7个不同的敏感化合物,其中分别有4个和3个已被文献报道具有抗HCC活性,其中吉非替尼(对Fe High亚型敏感)已有HCC相关临床实验,这提示该分子分型方法对HCC的化合物敏感性也具有一定预测价值。有趣的是,我们还发现Fe High亚型与Py Low亚型的化合物敏感谱相似,Fe Low亚型与Py High亚型的化合物敏感谱相似,表明铁死亡分子分型和细胞焦亡分子分型可潜在联合用于HCC的化合物敏感性预测。(4)机制分析表明铁死亡分子分型影响HCC的预后和化合物敏感性异质性可能与细胞色素P450代谢、细胞外基质-受体相互作用等通路相关。综上所述,本文基于细胞焦亡和铁死亡相关功能基因,初步建立了两种具有潜在临床应Dibutyryl-cAMP体外用价值的新型HCC分子分型方法。首先,它们均可用于HCC的预后预测,其中铁死亡分子分型方法具有广泛的人群适用范围,有望助力临床工作者对患者进行风险分层管理。其次,这两种方法可联合用于HCC的敏感化合物预测,进而可能筛选到更可靠的敏感化合物,为制定个性化用药方案提供潜在参考。

结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是全球第三大常见恶性肿瘤,癌症死亡率排在第二位。对于CRC晚期患者来说,化疗仍是主要的治疗手段。CRC部位高丰度的具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)导致CRC对化疗药物奥沙利铂(Ox Pt)产生耐药性。此外,Fn容Odontogenic infection易生成生物被膜,不仅能够保护细菌促进黏附和生长,还能导致肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性降低,给化疗增加难度。另一方面,传统的对抗肿瘤的策略中,诊断和治疗是互相独立的,这导致在肿瘤的治疗和监测过程中难以进行精准的控制。因此,需要在化疗过程中,消除Fn进而消除化疗药物的耐药性,同时做到诊断和治疗一体化实现更加精准和有效的抗肿瘤疗效。为此,我们将羧酸化的奥沙利铂(Ox Pt-COOH)和抗菌剂月桂酸(LA)引入到超支化缩水甘油醚(PGSI-IX溶解度G)中,并与油酸修饰的氧化铁纳米颗粒(O-SPIONs)通过自组装形成O-SPIONs@PG-Pt-LA纳米胶束,将化疗与化学动力疗法相结合,克服化疗耐药性并实现诊疗一体化。动态光散射(DLS)和扫描电镜(SEM)观察表明纳米胶束的粒径在200 nm左右,能够通过增强渗透和滞留(EPR)效应实现在肿瘤部位的富集。药物释放实验表明,该纳米胶束具有较高的载药量以及p H和谷胱甘肽(GSH)的还原刺激响应。3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)显色实验证实了该体系具有过氧化物酶活性。通过涂布平板法和结晶紫染色验证了纳米胶束对Fn具有良好的抑制能力,LA和O-SPIONs具有协同抗菌作用。体外细胞实验表明:O-SPIONs@PG-Pt-LA能够被细胞摄取,具有良好的生物相容性,并且该纳米胶束可以引发芬顿反C59抑制剂应,使细胞内的活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量增加,诱导细胞铁死亡。动物体内实验表明O-SPIONs@PG-Pt-LA具有优越的成像和抗肿瘤效果,并且具有较高的生物安全性。这种化学动力学疗法,一方面与抗菌剂协同提高材料的抗菌性能,另一方面与化学疗法协同提高其抗肿瘤活性,从而在根本上解决Fn导致的Ox Pt的耐药性问题,并对治疗过程进行实时监测和评估,为高效抗肿瘤药物载体构建及临床转化提供新的思路。

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）是一种由多因素导致的系统代谢紊乱疾病，可能由胰岛β细胞的胰岛素分泌缺陷、肌肉组织对葡萄糖的摄取减少、肝糖原输出量增加、脂代谢紊乱、肠促胰岛素效应减弱、肾脏对葡萄糖的处selleck HPLC理失调和神经递质紊乱等造成。目前，T2DM的治疗机制主要是通过增加胰岛素的分泌，减少肝糖原的输出，抑制肠道葡萄糖的摄取和吸收，改善C肽的分泌来实现。当药黄素是酸枣仁、菥蓂和淡竹叶等的主要活性成分之一，可诱导干细胞分化成胰岛素产生细胞，调节胰岛素分泌、干预肌肉组织和肝糖原的代谢过程，抑制糖脂和神经递质代谢紊乱，抑制炎症和氧化应激反应的发生LGX818配制，此外还有抗炎、抗氧化、增强记忆力等作用。通过查阅近年来国内外当药黄素治疗T2DM的作用机制，对其分析归纳整理，为后续T2DM的治疗和研究提供科Primers and Probes学的理论依据。