基于“成分-靶点-通路”桑叶质量标志物的辨识与测定

目的 基于“成分-靶点-通路”预测分析桑叶质量标志物(quality markers,Q-Marker)并测定其含量。方法 应用高效液相色谱法,建立15批桑叶药材的指纹图谱,对共有峰进行指认并进行相似度评价;通过多元统计分析结合网络药理学方法辨识桑叶质量标志物,且对相关成分进行含量测定。结果 15批桑叶药材的指纹图谱共确认了9个共有峰,经对照品指认出6个色谱峰,各桑叶样品的相似度在0.908~0Optimal medical therapy.999之间。15批样品经聚类分析聚为两类,采用OPselleck NSC 119875LS-DA以变量投影重要性(variable importance in projection, VIP)值>1为标准筛选出绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、隐绿原酸、新绿原酸等6个成分,为潜在的生物标志物。基于网络药理学研究发现该6个成分主要通过T细胞受体信号通路、c型凝集素受体信号通路、MAPK信号通路等发挥降糖降脂、抗炎等作用,可作为桑叶的质量标志物。经测定,桑叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷等6个质量标志物的含量分别为0.075~1.463 mg·g~(-1)、2.AMG510 NMR511~11.940 mg·g~(-1)、0.842~2.921 mg·g~(-1)、0.214~2.546 mg·g~(-1)、0.330~2.822 mg·g~(-1)、0.113~0.828 mg·g~(-1)。结论 通过多元统计、“成分-靶点-通路”网络以及多指标定量预测分析的桑叶质量标志物,为桑叶药材的质量评价体系建立以及药效物质研究奠定基础。

胃癌组织中PVT1基因水平与胃癌细胞生物学行为及化疗药物对胃癌组织抑制率的关系

目的 研究胃癌肿瘤组织中PVT1基因水平与胃癌细胞生物学行为及化疗药物对胃癌hepatic impairment组织抑制率的关系。方法 采取前瞻性研究,以120例胃癌患者作为研究对象,分析癌症组织以及癌旁组织的PVT1水平,分析不同TNM分期、分化程度、抑癌率、生物学行为患者的癌症组织PVT1水平之间的差异。结果 癌症组织的PVT1水平显著高于癌旁组织(t=126.112,P=0.000)。Ⅰ~Ⅱ期的PVT1水平显著低于Ⅲ~Ⅳ期患者(t=4.919,P=0.000);不同分化程度患者的癌症组织PVT1水平之间的差异存在统计学意义(F=1selleck1.023,P=0.000);不同深肌层浸润、脉管浸润、侵犯转移患者的PVT1水平差异显著(t=10.986,10.462,3.174,P=0.000)。不同抑癌率患者的PVT1水平之间的差异存在统计学意义(F=15.381,P=0.000)。结论 胃癌肿瘤组织中PVT1基因水平与化疗药物对胃癌组织的Trichostatin A供应商抑制率及与胃癌细胞生物学行为均呈现显著的相关性,可作为日后治疗的重要靶点。

超声睫状体成形术对青光眼患者眼前节结构的影响及眼前节各参数变化与眼压的关系

目的 探讨超声睫状体成形术(UCP)对青光眼患者眼前节结构的影响及眼前节各参数变化与眼压的关系。方法 选取2020年3月至2022年5月就诊于新乡医学院第一附属医院眼科行UCP治疗的青光眼患者23例(23眼)作为研究对象。记录患者术前及术后1周、1个月、3个月及6个月的眼压,术前及术后1个月、3个月及6个月行超声生物显微镜检查,记录保存四个方位的图像,记录患者前房深度、瞳孔直径、前房角开放距离(AOD_(500))、小梁虹膜夹角(TIA)、巩膜睫状突夹角(SCPA)、睫状体面积(CBA)等眼前节参数,分析各参数的变化量及其与眼压变化的相关性。结果 手术前后患者眼压总体比较差异有统计学意义(F=32.039,P<0.01);术后1周[(23.21±5.38)mmHg, 1 kPa=7.5 mmHg]、1个月[(24.59±5.64)mmHg]、3个月[(24.63±6.68)mmHg]、6个月[(26.21±6.32)mmHg]患者眼压均较术前[(48.70±6.77)mmHg]明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。术前与术后不同时间患者房角参数(上侧、下侧、颞侧、鼻侧各个方向的AOD_(500)、TIA)比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术前与术后不同时间患者上侧和下侧SCPA、CBA比较差异均有统计学意义(均为P<0.01);无CHIR-99021体外论上侧和下侧,术后1个月、3个月、6个月患者SCPA均较术前增大(均为P<0.05),CBA均较术前减小(均为P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,术后6个月患者眼压变化量与上侧、下侧的睫状体参数SCPA变化量均存在负相关性(均为P<0.05),与上侧、下侧的睫状体参数CBA变化量均无相关性(均为P>0.05)。结论 UCP手术可有效控microbiota stratification制青光眼患者眼压,使治疗区域的SCPA增大,CBA减少,且术后6个月患者眼压变化量与上侧、下侧的睫状体参KD025说明书数SCPA变化量呈负相关。

某儿童医院住院患儿H_1受体拮抗剂的应用分析

目的 分析本院住院患儿H_1受体拮抗剂(限口服制剂)的应用情况,为临床合理用药提供参考。方法 收集2019年7~12月本院2064份使用H_1受体拮抗剂住院患儿的病历资料,统计年龄、药品名称、规格、诊断等情况,分析本院患儿使用H_1受体拮抗剂的年龄分布情况、抗组胺药的剂型(口服液、颗粒剂和片剂)、抗组胺药超年龄使用情况、抗组胺药超适应证使用情况。结果 2064例使用抗组胺药患儿中,采用二代抗组胺药的患儿共1828例(88.57%),采用一代抗组胺药的患儿共236例(11.43%)。抗组胺药在0~17岁各年龄段均有分布,主要分布在2~5岁,共1012例(49.03%)。0~5个月患儿采用第一代抗组胺药为156例,多于第二代抗组胺用药的39例,其他年龄段均为第二代抗组胺用药居多。2064份抗组胺药使用患儿病genetic assignment tests历中口服液、颗粒剂和片剂排序依次为口服液(1489份)、颗粒剂(295份)、片剂(280份)。排在前5位的分别为西替利嗪口服液、地氯雷他定糖浆、西替利嗪滴剂、地氯雷他定干混悬剂、赛庚啶片,占比分别为32.03%、25.48%、14.63%、14.29%、8.77%。第一代抗组胺药说明书均未推荐儿童使用,第二代抗CL13900核磁组胺药说明书中未推荐<6个月龄儿童使用。超年龄用药共275例(13.32%),其中超年龄用药占比较高的药品分别为赛庚啶片、酮替芬片、西替利嗪滴剂,占比分别为65.82%、14.91%、10.55%。超适应证用药共1144例(55.43%),其中超适应证用药占比较高的药品分别为西替利嗪口服液、西替利嗪滴剂、地氯雷他定干混悬剂,占Mirdametinib体内实验剂量比分别为38.11%、18.01%、16.96%。结论 本院H1受体拮抗剂使用基本合理,但存在一定的超年龄、超适应证用药情况,超适应证用药的比例较大,临床中应加大处方审核和不良反应监控力度。超说明书用药应基于询证医学证据支持,在医院做好备案的情况下使用。

异常应力诱导软骨细胞发生铁死亡促进TMJOA进展的研究

目的:本研究旨在探索异常流体剪切力(FFSS)促进软骨细胞发生铁死亡,并探究软骨细胞发生铁死亡的FFSS阈值;在此阈值之下,研究铁抑制剂(Fer3-Methyladenine半抑制浓度-1)缓解异常流体剪切力对软骨细胞铁死亡的程度,为TMJOA的病理机制及靶向治疗提供理论依据。方法:(1)动物实验研究:通过单侧前牙反(UAC)干预构建SD大鼠TMJOA动物模型,使用免疫组织化学检测技术在组织学水平上测定了GPX4、Nrf2、HO-1、Xc-、ACSL4的组织分布及表达水平;(2)细胞学研究:通过Erastin刺激,建立软骨细胞铁死亡的模型,使用Fer-1干预该模型;分离培养SD大鼠软骨细胞,设定(4、8、12、16)dyn/cm~2的流体剪切应力分别干预软骨细胞1h,采用未进行流体剪切力干预的软骨细胞培养作为对照组,检测细胞中铁死亡相关基因GPX4、Nrf2、HO-1、Xc-、ACSL4,在初始确定的四组FFSS中,筛选出软骨细胞铁死亡相关基因表达较为明显的力值αdyn/cm~2,取(α-4,α)dyn/cm~2范围内的FFSS值,即FFSS分别为(α-3)dyn/cm~2、(α-2)dyn/cm~2、(α-1)dyn/cm~2,在(α-4,α)dyn/cm~2FFSS力值范围之间,继续检测铁死亡相关基因及IL-1β、IL-18、Collage II、MMP13表达水平,最终确定软骨细胞发生铁死亡的FFSS阈值βdy/cm~2;使用Fer-1干预加载不同type III intermediate filament proteinFFSS后的软骨细胞,检测铁死亡相关蛋白表达水平,探究Fer-1缓解FFSS干预后软骨细胞铁死亡的程度;结果:(1)UAC模型干预下的颞下颌关节髁突软骨免疫组化结果显示:软骨细胞中散在分布GPX4阳性细胞,经UAC刺激后其表达水平呈现递减趋势,而ACSL4、Xc-、Nrf2和HO-1与对照组相比,其阳性细胞表达逐渐增多,且分布逐渐趋向于软骨细胞深层区域;(2)FFSS促进软骨细胞铁死亡,它能抑制GPX4及Xc-,诱导ACSL4、Nrf2和HO-1的过度表达,且当FFSS力值为11dy/cm~RepSox采购2时,上述基因表达最为明显,因此可以确定软骨细胞发生铁死亡的流体剪切力阈值在11dy/cm~2范围内;(3)FFSS干预下软骨细胞线粒体膜密度增加,体积减小;(4)FFSS促进软骨细胞内Fe~(2+)的积累;(5)FFSS促进软骨细胞内ROS的聚集;(6)Fer-1提高了铁死亡关键蛋白GPX4的表达,抑制相关蛋白ACSL4、Nrf2、和HO-1的表达;结论:异常应力诱导软骨细胞发生铁死亡,诱发炎症并破坏软骨细胞,软骨细胞发生铁死亡的流体剪切力阈值范围为11dy/cm~2,Fer-1可通过缓解软骨细胞的铁死亡来减轻异常流体剪切力诱发的软骨细胞炎症和基质破坏。软骨细胞铁死亡是促进OA发病和发展的重要因素,Fer-1通过抑制软骨细胞铁死亡来缓解软骨细胞损伤,缓解OA的进展。

基于生物信息学分析IgA肾病中铁死亡相关基因和免疫浸润

目的:综合生物信息学相关技术,从免疫角度探讨铁死亡参与IgA肾病(IgAN)的发病机制,确定铁死亡相关的枢纽基因和功能通路。方法:获取GSE93798的差异表达铁死亡相关基因(DE-FRGs),进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因本体论(GO)分GSK1120212体内实验剂量析。使用STRING和Cytoscape构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,运行degree和MCODE算法。联合LASS0回归、SVM-RFE和PLS-DA机器学习构建最优特征集筛选枢纽基因。使用Cibersort、ssGESA算法评估免疫浸润,探索枢纽基因与免疫浸润之间的关系。单细胞数据(scRNA-seq)分析枢纽基因在IgAN细胞群的位置。对枢纽基因进行基因集富集分析(GSEA)。利用HPA数据库获取枢纽基因特定蛋白的位置,利用DsigDB数据库预测靶点药物。在GSE37460、GSE116626和GSE73953中验证枢纽基因和诊断效能评估。收集IgAN和健康肾组织,行免疫组化实验检测枢纽基因表达情况。结果:确定了94个DE-FRGs和3个枢纽基因(JUN、EGR1和DDR2)。KEGG和GO分析表明DE-FRGs集中在在铁死亡、活性氧、自噬、对氧化应激和金属粒子的反应、线粒体、转录调节复合体方面。GESA分析表明枢纽基因主要富集于氨基酸和脂肪酸代谢通路。免疫细胞浸润分析显示IgAN中幼稚B细胞,肥大细胞和静息CD4T细胞浸润比例升高,免疫功能分析发现IgAN中趋化因子受体,人类白细胞抗原,炎症促进等免疫功能比例In Situ Hybridization升高。且免疫细胞、功能和Emricasan说明书枢纽基因之间存在相关性。ScRNA-seq分析证明了枢纽基因主要定位于单核巨噬细胞、近曲小管细胞、主细胞、内皮细胞、和平滑肌细胞。验证集分析提示JUN、EGR1有一定的诊断价值。HPA数据库显示JUN主要定位于胞核,EGR1则位于胞膜和胞质。预测了2278种可用于治疗IgAN的潜在药物。免疫组化检测和生信分析结果一致。结论:在IgAN发生和发展过程中,铁死亡与免疫细胞的异常浸润和免疫相关功能可能存在相关性。

超声波辅助过氧化氢法增溶酵母β-葡聚糖及其对马铃薯淀粉特性影响的研究

酵母β-葡聚糖(Yeastβ-glucan,YG)由β-1,3键相连的D-葡萄糖组成的线性骨架以及β-1,6键的分支和主干相连构成。酵母β-葡聚糖的主链和侧链在氢键作用下形成三螺旋结构,因此较其他β-葡聚糖具有更高的生物活性。然而,酵母β-葡聚糖因结构和分子量较大导致了溶解度很低,限制了其在食品、医药、化妆品行业的应用范围。因此增加酵母β-葡聚糖的溶解度有重要意义。本课题以产朊假丝酵母β-葡聚糖为原料,采用超声波辅助过氧化氢法增溶改性酵母β-葡聚糖,并对增溶前后产朊假丝酵母β-葡聚糖进行构效关系研究,探究其增溶机理,将马铃薯淀粉(PS)与不同分子量的YG结合,探究YG对马铃薯淀粉糊化特性、体外消化特性的影响,以期改善马铃薯淀粉的品质特性及功能特性,为酵母β-葡聚糖开发成功能性食品基料奠定基础。研究内容和结论如下:(1)超声波辅助过氧化氢法增溶YG的工艺优化。采用高压蒸汽协同酶法从产朊假丝酵母菌中提取YG,通过初步对比过氧化氢法、超声波法和超声波辅助过氧化氢法,发现超声波辅助过氧化氢法增溶效果最好。通过研究反应温度、反应时间、过氧化氢浓度、超声功率对酵母β-葡聚糖的表观粘度、溶解度的影响,综合分析选择溶解度为指标,进行Box-Behnken中心组合试验,得到最佳增溶工艺:反应时间为4 h,超声功率为3 W/m L,过氧化氢浓度为24%,在此条件下,YG的溶解度最大。经验证,优化模型准确有效,优化后的酵母β-葡聚糖溶解度可达到70%,与原酵母β-葡聚糖相比溶解度提高56.40%,表明所得到的优化模型具有一定的实际应用价值,可为酵母β-葡聚糖的增溶提供可行的方法。(2)增溶前后YG的结构差异及体外活性评价。采用超声波辅助过氧化氢法在最佳增溶工艺的条件下制备出可溶性酵母β-葡聚糖(YG_(UH)),并对增溶前后的酵母β-葡聚糖进行结构表征和体外抗氧化、降血糖活性评价。随着降解时间的延长,YG_(UH)的M_w由3.38×10~6Da降至1.22×10~6Da。YG、YG_(UH)的粒径分别为10.49μm、0.57μm。通过傅里叶变换红外光谱和核磁共振谱图表明YG与YG_(UH)有相似的官能团(C=O,C-H,O-H等),其主链仍是以β-(1-3)糖苷键连接的葡聚糖分子,侧链发生了取代。通过刚果红实验结果表明,YG和YG_(UH)均具有三螺旋结构。扫描电子显微镜的结果表明YG由原始的致密聚集态团簇结构降解成不规则碎片状。体外抗氧化实验表明,在多糖浓度为2.0 mg/m L时,YG和YG_(UH)的DPPH自由基清除活性分别为58.50%和80.10%。YG和YG_(UH)对ABTS~+的清除率分别为34.40%和44.00%。体外降血糖实验表明,在多糖浓度为3 mg/m L时,YG和YG_(UH)对α-淀粉酶抑制率分别为40.40%和52.26%;YG和YG_(UH)对α-葡萄糖苷酶抑制率分别为50.75%和68.10%。这些结果表明,该增溶方法未破坏多糖的一级结构,其体外抗氧化活性、降血糖活性显著提高。(3)探究超声波辅助过BMN 673体外氧化氢法增溶YG的作用机理。通过乌氏粘度计测定YG_(UH)的特性粘度,在超声波辅助过氧化氢法处理的2 h过程中特性粘度不断下降,从176.54cm~3/g下降到83.59 cm~3/g。超声波辅助过氧化氢法对酵母β-葡聚糖的降解遵循一级降解动力学模型,其方程为ln(M_t/3567595.19)=-8.72t。加入·OH、·H、H_2O_(2、)·O自由基的屏蔽剂,研究活性物质对YG的增溶效果。确定最佳屏蔽剂浓度分别为叔丁醇20%,四氯化碳20%,二氧化锰25%,苯醌8%。通过降解率的变化发现,活性物质增溶效果:·OH>H_2O_2>·H>·O。通过分光光度法测定不同超声功率、过氧化氢浓度条件下·OH的含量。结果表明,超声波的空化作用加速了H_2O_2的分解,H_2O_2浓度对·OH含量影响显著,与·OH含量呈正相关关系,H_2O_2浓度越大,·OH含量越高。(4)考察YG、YG_(UH)对PS糊化特性、结构及体外消化的影响。将不同浓度的YG、YG_(UH)(1%、3%和5%)分别与马铃薯淀粉(PS)混合进行研究。YG和YG_(UH)的加入显著降低了峰值粘度值,分别从2197 c P降至1725 c P和1453 c P。当加入3%的β-葡聚糖时,PS-YG、PS-YG_(UH)的最终粘度分别为1829 c P,selleck HPLC1772 c P。质构特性分析结果表明,随着多糖浓度的增加,硬度、咀嚼性、黏聚性逐渐降低。YG、YG_(UH)提高了PS的热稳定性,PS的起始温度为60.36℃,添加β-葡聚糖浓度为3%时,PS-YG、PS-YG_(UH)的起始温度分别为61.89℃,60.82℃,ΔH降低。通过傅里叶变换红外光谱分析结果表明PS与YG之间是通过非共价相互作用连接到一起。PS、PS-YG、PS-YG_(UH)混合物的表观粘度随着剪切速率的增加而降低,这表明所有样品都呈现非牛顿流体。通过Englyst法对其体外消化进行分析,添加5%的YG、YG_(UH)时,RDS(缓慢消化淀粉)含量由8.17%下降至4.18%、5.41%,SDS(快速消化淀粉)含量由16.95%下降至15.37%、15.57%,RS(抗消化淀粉)含量由77.79%增加至81.20%、80.56%。在120 min时,PS的水解率为55.54%,加入YG后,水解率降至43.59%。YG与α-淀粉酶分子对接的结果表明YGlung pathology与α-淀粉酶相关活性位点稳定结合。以上研究成果可为多糖的增溶提供参考,为酵母β-葡聚糖在淀粉基食品中的应用提供指导。

外源独脚金内酯对陆地棉幼苗低温胁迫的缓解作用

独脚金内酯(SLs)是类胡萝卜素衍生的新型植物激素,影响植物的生长发育,但目前独脚金内酯是否能提高棉花的耐寒性尚不清楚。本研究揭示了独脚金内酯缓解棉花低温胁迫的机制Compound C供应商,低温胁迫(4℃)显著抑制了棉花幼苗的生长,外源SLs处理可显著缓解低温胁迫对棉花幼苗生长的影响。独脚金内酯人工合成类似物(rac-GR24)处理显著缓解低温胁迫引起的氧化应激损伤,从而保护细胞结构和功能,提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化物酶(peroxidase, POD)、过氧化氢酶(catalaseGefitinib, CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase, APX)的活性,增加可溶性糖含量和可溶性蛋白含量,提高叶绿素含量,显著缓解光合效率的下降,有效缓解叶绿素荧光参数和光合气体交换参数的变化。为了进一步阐明SLs缓解低温胁迫的机制,在低温处理0和6 h时进行转录quality use of medicine组分析,结果发现常温下(0 h)差异表达基因(DEGs)主要参与类黄酮代谢和谷胱甘肽代谢,大部分基因上调表达,而低温处理6 h时主要富集到光合作用和磷酸戊糖代谢和其他糖的代谢,这与生理生化实验结果一致。综上所述,外源独脚金内酯处理在低温胁迫下可能通过抗氧化活性、光合效率和糖代谢提高来缓解陆地棉幼苗的低温胁迫。这些结果为陆地棉耐低温品种育种提供了理论依据。

超声-酶辅助碱法提取黑木耳膳食纤维及对糖尿病小鼠的降血糖作用

以提取多糖后的黑木耳残渣粉末为原料,采用超声-酶辅助碱法提取黑木耳膳食纤维(AADF),通过单因素实验和Box-Behnken设计确定了AADF的最佳提取工艺,进一步通过小鼠体内实验探究了AADF的降血糖功效。结果表明,在料液比(seed infectiong∶mL)1∶15、超声功率350 W、超声时间50 min、耐高温α-淀粉酶用量5.0%(以黑木耳残渣粉末的质量为基准,下同)的最Regorafenib溶解度佳工艺下,AADF提取率为69.18%。小鼠体内实验,28 d的经AADF干预糖尿病小鼠饮食期间,模型高剂量组〔每天的AADF灌胃量为200 mg/(kg·bw)〕与模型对照组(每d灌胃生理盐水)的糖尿病小鼠相比,空腹血糖值下降13.72%、口服糖耐量降低16.95%,血脂总胆固醇和甘油三酯含量显著降低,高密度脂蛋白胆固醇和血清中谷胱甘肽过氧化物酶的水平升高,肝脏中的过氧化氢酶以及琥珀酸脱氢酶活力得到提高,与模型阳性组〔每天的二甲双胍灌胃量为100 mg/kg·bw〕各项生理指标相近;肝脏组织病理学分析也表明,AADF对糖尿病小鼠肝损伤具有BLZ945抑制剂一定的修复作用。

向日葵FAD2-1基因克隆与功能分析

为解析向日葵Δ12脂肪酸脱氢酶基因的功能,根据前期转录组测序结果,采用RT-PCR方法克隆了向日葵Δ12脂肪酸脱氢酶基因HaFAD2-1的开放阅读框(ORF)序列,其核苷酸序列长度为1137 bp,编码378个氨基酸,生物信息学预测表明HaFAD2-NSC 1277161编码蛋白为碱性且亲水性蛋白,二级结构为α螺旋。系统进化分析发现HaFAD2-1基因与异果菊(Dimorphotheca sinuata DC.)FAD2进化关系最近。qRT-PCR分析表明HaFAD2-1基因是种子中特异高表达的基因,且在低油Immune privilege酸种子中表达量明显高于高油酸种子,相关性分析发现HaFAD2-1表达量与油酸含量呈显著负相关,与亚油酸含量呈显著正相关。亚细胞定位发现HaFAD2-1编码蛋白定位于细获悉更多胞质中,与野生型对照相比,异源表达转HaFAD2-1拟南芥种子的总不饱和脂肪酸含量显著升高,亚油酸合成下游的大部分脂肪酸含量显著升高,而亚油酸合成上游的大部分脂肪酸含量显著降低,表明HaFAD2-1可能是参与向日葵不饱和脂肪酸合成的重要基因。