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乳房炎是制约奶牛养殖业发展的主要疾病之一,由于其常用的抗生素治疗方法存在药物残留和病菌耐药性等诸多安全隐患,因此迫切需要寻找应对奶牛乳房炎的新治疗措施。植物提取物富含生物活性成分,具有极大的药用潜力,能够作为抗生素替代物防治奶牛乳房炎。菊科植物黄花蒿广泛分布于内蒙古荒漠化草原地区,具有抗炎、抗氧化等多种功效。课题组前期研究结果表明,黄花蒿提取物能够有效预防大肠杆菌性奶牛乳房炎,并降低乳中体细胞数,但黄花蒿乙醇提取物(AAE)对于大肠杆菌性奶牛乳房炎的防控机理研究未见报道。因此,本论文探讨了AAE能否通过调控CD36表达进而改善LPS诱导下奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)的炎症损伤和紧密连接破坏,以期为寻找降低奶牛乳房炎发病率的抗生素替代物提供参考依据。本论文主要包括六个试验:试验1:AAE对LPS诱导损伤bMECs活力及结构的影响。研究添加不同浓度AAE对LPS诱导下bMECs细胞活力、细胞凋亡、细胞结构及超微结构的影响,筛选AAE适宜的添加浓度和作用时间。AAE中共鉴定出321种活性成分,包括56种酚酸、48种黄酮类、40种有机酸、18种生物碱、16种萜类、12种木脂素和香豆素、2种醌类和129种其他化合物。添加3-48μg/m L AAE在3至48 h内无明显毒性,其中3、6和12μg/m L的AAE预处理3 h时显著提高了细胞活力,且呈剂量依赖性。进一步构建LPS诱导炎症损伤模型,10μg/m L LPS显著降低bMECs存活率,引发细胞凋亡,损伤细胞结构和超微结构。在LPS刺激前,用3、6和12μg/m L AAE预保护bMECs后细胞活力显著升高,凋亡率显著降低,细胞结构和超微结构受损程度减轻,其中12μg/m CP-456773研究购买L AAE预保护3 h时的效果最为明显。试NSC 127716核磁验2:AAE对LPS诱导损伤bMECs紧密连接的影响。在试验1的基础上,采用免疫荧光、RT-PCR及western blotting技术进一步探究了AAE对LPS诱导损伤bMECs紧密连接蛋白的保护作用。经10μg/m L LPS处理12 h后,occludin、ZO-1、claudin-1荧光信号强度明显减弱,基因和蛋白表达水平也显著下降,说明紧密连接蛋白结构受损。3、6、12μg/m L AAE预处理3 h后明显改善了LPS对紧密连接的负面影响,逐渐增强了紧密连接蛋白occludin、ZO-1、claudin-1荧光强度,上调了其mRNA和蛋白表达量,保护了紧密连接完整性。试验3:基于转录组分析AAE对LPS诱导损伤bMECs的保护作用。采用RNA-seq技术挖掘了AAE预处理作用下LPS诱导损伤bMECs中的差异基因及差异信号通路,探索了AAE防治乳房炎的调控靶点。通过对LPS诱导损伤bMECs进行转录组深度测序,10μg/m L LPS可通过引起CD36等基因及NF-κB、MAPK等信号通路差异变化,调控TNF-α、IL-6、IL-8等炎症介质的转录,从而造成bMECs炎性损伤。进一步分析发现,在LPS诱导bMECs损伤之前,进行AAE预处理能通过上调细胞生长发育等相关基因水平,抑制炎症响应等方面的基因表达,缓解炎症进程。试验4:AAE对LPS诱导损伤bMECs炎症反应的保护作用。通过RT-PCR和western blotting技术对RNA-seq筛选出的CD36、NF-κB、MAPK等差异基因及信号通路进行验证,以揭示AAE缓解bMECs炎症反应的分子机制。3、6、12μg/m L AAE预处理能以剂量依赖性方式有效减轻LPS刺激下bMECs的炎症反应程度,降低CD36mRNA和蛋白表达量,抑制NF-κB(IKBα、p65)和MAPK(p38、JNK、ERK)信号通路蛋白活性及TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8表达,其中12μg/m L AAE预处理抗炎保护作用最佳,提示CD36可能参与了AAE对LPS诱导下bMECs炎症反应的调控过程。试验5:基于CD36过表达研究了AAE的抗炎损伤机制。在试验4的基础上,以差异基因CD36为研究对象,通过腺病毒转染构建CD36过表达模型,研究AAE能否通过调控CD36抑制炎症反应,缓解LPS诱导下细胞生长抑制和紧密连接破坏。在CD36正常表达bMECs中,12μg/m L AAE可显著抑制LPS诱导下CD36表达以及NF-κB和MAPK信号通路活性,降低炎症因子水平,从而改善bMECs炎症损伤程度。过表达CD36后,10μg/m L LPS能显著激活NF-κB和MAPK信号通路,并诱导下游ILqatar biobank-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的高效表达,而bMECs活力和紧密连接蛋白受到更明显的抑制作用。但CD36过表达部分减弱了12μg/m L AAE对LPS诱导bMECs炎症反应的抑制作用,以及对细胞活力和紧密连接的保护作用,说明AAE对于LPS诱导损伤bMECs的保护机制与CD36相关联。试验6:基于CD36干扰研究了AAE的抗炎损伤机制。在试验5 CD36过表达基础上,进一步采用CD36-si RNA技术,探讨了CD36是否在AAE抗炎保护机制中发挥了核心调控作用。在进行CD36-si处理后,添加或未添加LPS处理并未明显影响细胞活力及occludin、ZO-1、claudin-1 mRNA和蛋白表达量,而12μg/m L AAE也并未表现出明显的预保护效果。CD36干扰阻碍了LPS作用下bMECs NF-κB和MAPK信号通路的活化,未显著影响TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 mRNA表达水平,同时也在一定程度上消除了AAE对于LPS诱导下NF-κB和MAPK信号通路及炎症因子的抑制作用。综上所述,本论文探讨了AAE对LPS诱导炎症损伤bMECs的预保护机制。AAE能通过调控CD36表达量,抑制LPS刺激下bMECs NF-κB通路IκBα和p65,以及MAPK通路ERK、JNK、p38磷酸化,减少TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8 mRNA水平,进而保护细胞活力和紧密连接。因此,AAE能保护bMECs免受LPS引发的炎症损伤和紧密连接破坏,对奶牛乳房炎具有一定的预防作用。

目的:观察陈皮茱萸和胃汤联合铋剂四联疗法治疗幽门螺杆菌(Hp)感染消化性溃疡(PU)的临床疗效。方法:选取台州市中医院2020年6月～SAHA研究购买2022年2月收治的100例Hp阳性的PU患者为研究对象,采用信封法分为对照组和观察组。对照组给予铋剂四联疗法治疗,观察组给予陈皮茱萸和胃汤联合铋剂四联疗法治疗。统计两组疗Emricasan分子量效、Hp清除率、Hp复发率,比较两组黏膜形态评分、中医症状评分的差异,检测两组胃酸分泌相关指标、H~+-K~+-ATP酶活性及VEGF、bFGF、PGE_2水平。结果:观察组总有效率为96.08%,显著高于对照组(81.63%),(P<0.05)Hp清除率(94.12%)与对照组(85.71%)差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前两组患者各指标差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者黏膜形态评分、中医症状评分及基础、最大及高峰胃酸分泌量显著降低,VEGF、bFGF、PGE_2显著升高,H~+-K~+-ATP水平显著降低,且观察组各指标改善显著优于对照组(P<0.05)。观察组Hp复发率为10.42%显著低于对照组(3Regulatory intermediary0.95%)(P<0.05)。结论:陈皮茱萸和胃汤联合铋剂四联疗法治疗Hp感染PU可改善症状,促进黏膜愈合,降低Hp复发,其机制可能与改善胃酸分泌功能,促进溃疡病灶血管生成有关。

目的:糖尿病肾病(DN)是糖尿病患者的严重微血管并发症,是慢性肾脏疾病最常见的形式,也是终末期肾功能衰竭的主要原因。传统的治疗方法有许多的局限性,目前没有一种有效的治疗方法可以完全治愈DN。本文旨在开发一种基于黑色素纳米粒负载达格列净(DA)并在表面包覆聚乙二醇壳聚糖(GCS)的黑色素基靶向纳米药物(CSMDNPs),在黑色素光声成像(PAI)引导下,通过降糖和抗氧化双重作用实现靶向联合治疗,为DN治疗提供一种新思路。方法:1.CSMDNPs的合成及表征根据团队前期报道的黑色素纳米粒制备方法,通过超声破碎法构建小尺寸水溶性黑色素纳米粒(MNP)。将MNP与DA过夜低温旋蒸,除去游离DA后,纳米复合物和GCS溶液搅拌过夜,水洗离心成功制备了黑色素基靶向纳米粒(CSMDNPs)。使用紫外可见分光光度计(UV-Vis)、透射电镜(TEM)和纳米粒度电位仪(Zetasizer)对CSMDNPs进行理化性质研究,采用高效液相(HPLC)法测量纳米药物中DA的负载量。2.体外实验通过CCK-8failing bioprosthesis法测定不同浓度CSMNSC 119875半抑制浓度DNPs的细胞毒性,使用共聚焦显微镜和流式细胞术检测CSMDNPs被大鼠肾小管上皮的细胞摄取情况,利用DCFH-DA试剂盒检测CSMDNPs纳米药物在细胞水平对活性氧(ROS)的清除能力。3.体内实验C57BL/6J雄性小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料构建小鼠糖尿病肾病模型。以尾静脉注射方式给药,通过PAI监测纳米颗粒在小鼠体内的代谢。定期监测小鼠体重、血糖。通过血生化、尿常规、H&E、Masson和PAS染色等方法进行血液学和病理学分析,利用酶联免疫吸附实验表征氧化因子水平,综合对纳米药物疗效进行评估,最后通过Western Blot对纳米药物的治疗机理进行探索。结果:1.TEM和Zetasizer结果表明合成的纳米粒CSMDNPs具有合适的尺寸、良好的分散性和优良的稳定性,且表面为负电荷。紫外可见吸收光谱显示有明显的DA吸收峰,证实药物成功负载,根据高效液相计算的DA负载率为5.48±1.14%。2.CCK-8细胞毒性实验结果显示:浓度为12.5-500μg/mL的纳米药物与大鼠肾小管导管上皮细胞NRK-52E孵育24 h后,细胞存活率均未见明显下降,说明其具有良好的生物相容性。细胞共聚焦和流式结果显示:细胞在相同的时间内对壳聚糖包覆的纳米颗粒具有更高的摄取效率。DCFH-DA结果显示随着CSMDNPs浓度增加,细胞内ROS逐渐减少。3.PAI结果selleck NN2211表明CSMDNPs在DN组小鼠肾脏部位滞留时间更长。与对照组相比,实验组小鼠体重减轻,血糖降低,血液学指标恢复明显,病理学检查可见肾脏病变程度明显好转,Western Blot结果说明纳米药物可以在蛋白水平抑制NAGL表达,抑制Nrf2/keap-1通路和调节HO-1发挥抗氧化作用,保护肾功能。综上表明该纳米药物能显著减缓糖尿病肾病。结论:本研究提供了一种生物相容性好,集降糖、抗氧化与光声成像于一体的黑色素基靶向纳米药物,可用于糖尿病肾病的联合治疗。本工作构建靶向、缓释及多功能纳米药物,为糖尿病肾病高效治疗提供了新思路。

目的 探讨尿IgG/尿肌酐(UGCR)、24 h尿蛋白定量(24 h UP)、尿蛋白定量/尿肌酐(UPCR)在预测IgA血管炎肾炎(IgAVN)患儿肾脏病理进展中的价值。方法 选取2018年1月—2022年10月收治的IgAVN患儿234例，均采集24 h尿液标本检测24 h UP。根据肾小球损伤程度不同将IgAVN患儿分为Ⅱ级47例、Apoptosis抑制剂Ⅲ级175例、Ⅳ级12例，分析UGCR、24 h UP、UPCR与肾脏病理分级的相关性，通过受试者工作特征曲线分析上述指标预测肾脏IgAVN病理Physiology and biochemistry分级进展为Ⅲ级及以上的价值。结果 肾脏病理分级Ⅲ级、Ⅳ级患儿UGCR、24 h UP、UPCR水平高于Ⅱ级患儿(P<0.01)。UGCR、24 h UP、UPCR与病理分级呈正相关，但相关性较弱(r=0.500、0.451、0.356,P<0.01)。UGCR、24 h UP和UPCR对IgAVN患儿肾脏病理分级进展为Ⅲ级及MRTX1133溶解度以上均具有预测价值，且三者联合检测预测价值更高(曲线下面积>0.9,P<0.01)。结论 UGCR联合24 h UP、UPCR对IgAVN肾脏病理分级进展为Ⅲ级及以上的预测价值更高。

目的:研究帕金Medical tourism森病组和对照组之间同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,Apo-A1)、载脂蛋白B(Apolipoprotein B,Apo-B)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、中性粒细胞、中性粒细胞与高密度脂蛋白比值(Neutrophil to high-density lipoprotein ratio,NHR)、单核细胞、单核细胞与高密度脂蛋白比值(Monocyte to high-density lipoprotein ratio,MHR)、淋巴细胞(lymphocyte,LYM)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血小板、血小板淋巴细胞比值(Platelet lymphocyte ratio,PLR)、总胆红素、血红蛋白(Hemoglobin,Hb)、谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,GR)、尿酸的差异性,探讨帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血液生物标志物中的独立危险因素和保护性因素以及上述指标与PD严重程度的相关性分析。方法:回顾性收集南昌大学第一附属医院2020年10月至2023年3月期间住院的166例诊断为帕金森病的患者,以及同期在院住院的171例非帕金森病患者作为对照组。PD组按照Hoehn和Yahr(H&Y)分期分为早期PD组和晚期PD组。收集所有纳入患者的个人资料和实验数据,进行统计学分析。对性别这一分类变量采用c2检验或Pearson精确检验进行分析;符合正态分布的连续性变量采用独立样本t检验分析,以平均值±标准差表示;不遵从正态分布的连续型变量采用Mann-Whitney U检验分析,以中位数(四分位数)表示;由于TC、NHR、NLR、MHR、PLR与上述其他指标存在共线性,TC将不纳入统计分析,考虑到NHR、NLR、MHR、PLR与PD之间具有研究意义,将NHR、NLR、MHR、PLR单独进行Mann-Whitney U检验分析;将经过单因素分析得到的具有统计学意义的指标再进行多因素Logistic回归分析评估其与PD之间的关联,绘制受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评估LYM、HDL-C、Hcy预测患者发生PD的能力;将上述血液生物标志物及性别、年龄与PD严重程度进行斯皮尔曼相关性分析并绘制箱式图。结果:1.PD组LYM为(1.51±0.47)′10^9/L,对照组LYM为(1.65±0.51)′10^9/L,PD患者的LYM低于对照组,差别具有统计学意义(P=0.01);PD组NLR为2.24(1.64–2.96),对照组NLR为1.95(1.43–2.50),PD组NLR高于对照组,差别具有统计学意义(P=0.036);PD组Hcy为12.05(10.31–14.57)μmol/L,对照组Hcy为10.20(8.70–12.46)μmol/L,PD组Hcy高于对照组,差别明显具有统计学意义(P<0.001);余下指标在PD组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。2.多因素LRSL3说明书ogistPS-341化学结构ic回归分析发现LYM、Hcy、HDL-C仍然具有统计学差异性。结果显示LYM的降低和Hcy、HDL-C的升高可能是PD的独立危险因素。Hcy每升高1个单位就会导致PD患者的患病风险增加21.2%;HDL-C每升高1个单位,PD患者的患病风险增加260.7%。3.ROC曲线预测LYM、Hcy、HDL-C对PD患病风险,LYM曲线上面积为0.421(95%CI,0.355–0.486),Hcy曲线下面积为0.669(95%CI,0.609–0.730),HDL-C曲线下面积为0.585(95%CI,0.520–0.650)。4.晚期PD患者的年龄高于早期PD患者(P<0.05);晚期PD患者的Apo-B、LDL-C低于早期PD患者(P<0.05);早晚期PD在性别及其他血液生物标志物之间无显著差异。5.年龄与PD严重程度的斯皮尔曼相关系数r_s为0.264(P<0.01),年龄与PD的严重程度呈正相关;LDL-C、Apo-B与与PD严重程度的r_s分别为-0.160、-0.196(P<0.05);LDL-C和Apo-B与PD的严重程度呈负相关。结论:1.LYM可能是PD的保护性因素;Hcy和HDL-C可能是PD的独立危险因素;2.LDL-C和Apo-B与PD的严重程度呈负相关,年龄与PD的严重程度呈正相关;3.PD组NLR高于对照组,NLR可能是PD的危险因素。

目的 探讨单侧肾动脉狭窄支架治疗后Laduviglusib体内血压变化情况及核素肾动态显像总肾小球滤过率(GFR)的变化。方法 选取2018-01至2023-01在武警特色医学中心接受经皮单侧肾动脉支架置入的40例患者为研究对象，在支架置入前和支架置入后6个月行核素肾动态显像测定GFR,所有患者于术前和术后6个月检测SCr和Cys-C水平，采用不同GFR计算公式同步计算GFR,与核素肾动态显像进行对比分析。所有患者在支架置入后均完成6个月随访，并观察血压变化情况。结果 40例患者在肾动脉支架治疗后6个月，24 h动态血压检测收缩压和舒张压明显下降，使用降压药种类减少。支架治疗前核素肾动态显像GFR为(61.38±5.72) ml/min,支架治疗后6个月，核素肾动态显像GFR为(70.07±6.53) ml/min,和治疗前比较，GFR明显提高，差异有统计学意义(P<0.01)。核素肾动态显像测定的G寻找更多FR,与采用MDRD公式、CKD-EPISCr公式和CKD-EPICys C公式计算的GFR结果，差异有统计学意义(P<0.01)。CKD-EPICys C公式计milk microbiome算的GFR与核素肾动态显像测定的GFR差值最小。结论 核素肾动态显像测定GFR准确度高，利用核素肾动态显像指导严重单侧肾动脉狭窄支架治疗，可明显改善患者预后。

目的：探讨乌头汤对佐剂型关节炎（AIA）风寒湿痹证大鼠血管翳形成的抑制作用及其port biological baseline surveys潜在作用机制。方法：将无特定病原体（SPF）雄性SD大鼠40只，按随机数字表法分为空白组、AIA风寒湿痹证组[完全弗氏佐剂（CFA），200 μg]、乌头汤组（15 g·kg~(-1)·d~(-1)）、吲哚美辛组（10 mg·kg~(-1)），除空白组外，其余各组注射CFA前给予风寒湿刺激。连续给药30 d，期间观察AIA风寒湿痹证大鼠的基本情况、发病时间、关节炎评分、足容积。最终取外周动脉血、踝关节和滑膜组织。酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子-A（VEGFEmricasan分子式-A）蛋白含量和风湿三项，包括抗O（ASTorin 1O）、C反应蛋白（CRP）和类风湿因子（RF）；苏木素-伊红染色（HE）观察关节组织形态学改变；免疫组化检测踝关节通路关键蛋白HIF-1α和VEGF-A；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠滑膜组织中HIF-1α、VEGF-A、血管生成素-1（Ang-1）、血管生成素2（Ang-2）mRNA表达。结果：与空白组比较，AIA风寒湿痹证大鼠足肿容积和关节炎评分明显升高（P<0.01）；血清CRP、RF、ASO阳性显著（P<0.01）。HE染色可见踝关节滑膜炎性增生，血管新生、血管翳形成，骨破坏程度加重，提示模型构建成功。乌头汤干预后，发病时间延迟（P<0.01）；足容积和关节炎评分降低（P<0.01）；血清CRP、RF、和ASO含量显著下降（P<0.01）；滑膜组织炎性增生明显缓解，血管新生及血管翳减少，骨破坏减轻；滑膜HIF-1α、VEGF-A、Ang-1、Ang-2 mRNA明显降低（P<0.05，P<0.01）；血清与踝关节HIF-1α和VEGF-A蛋白表达下降（P<0.01）。在吲哚美辛组中，大鼠发病时间延迟（P<0.01）；足容积和关节炎评分降低（P<0.01）；血清CRP、RF、和ASO含量显著下降（P<0.01）；HIF-1α/VEGF-A/Ang信号通路激活，病理组织损伤改善。结论：乌头汤可延缓AIA风寒湿痹证大鼠发病时间，降低足容积、关节炎评分、风湿活动度，改善关节组织病理情况，对血管翳形成具有抑制作用，其作用机制可能与下调HIF-1α/VEGF-A/Ang通路表达有关。

色烯与含氮杂环的结合显示出显著的药物活性,不仅广泛存在于各种植物和天然药物中,还是当前许多重要药物的核心骨架,同时在农业与食品化学及材料领域都有重要应用。因此,研究新型的色烯并氮杂环骨架的构建方法已成为新药研发领域的重要课题。2-氨基色烯酮上氨基的存在关键性地改变了 γ-吡喃酮环相对于亲核试剂的反应能力,双亲核位点为2-氨基色烯酮的参与环加成反应构建含氮杂环提供一大助力,并为2-氨基色烯酮提供了广泛的合成潜力。因此选用了具有双亲核位点的2-氨基色烯酮作为有效的合成砌块,设计和合成了三种不同含氮杂环单元的化合物。第一部分:氯化锌促进取代2-氨基-4H-色烯酮、取代芳LBH589作用醛和2,5-环己substrate-mediated gene delivery二烯-1-酮的环加成反应得到1-羟基-4-甲氧基-5-苯基-5,6-二氢-12H-色烯并[2,3-c]异喹啉-12-酮衍生物。在最佳条件下,合成了 24个化合物,所有产物均经过红外光谱、高分辨质谱、核磁共振谱表征,并培养了单晶验证了其中3个化合物的立体结构。第二部分:氯化锌促进取代2-氨基-4H-色烯酮、取代芳醛和1,3-环己二酮的三组分反应一锅法得到11-GDC-0973苯基-7,8,9,11-四氢-10H-色烯并[2,3-b]喹啉-10,12(6H)-二酮衍生物。在最佳条件下,合成了 20个化合物,所有产物均经过红外光谱、高分辨质谱、核磁共振谱表征,并培养了单晶验证了其中2个化合物的立体结构。第三部分:碳酸铯促进取代2-氨基-4H-色烯酮、(Z)-4-苯亚甲基-2-苯基恶唑-5(4H)-酮的[3+3]环加成反应得到N-(2,5-二氧代-4-苯基-1,3,4,5-四氢-2H-色烯并[2,3-b]吡啶-3-基)苯甲酰胺衍生物。在最佳条件下,合成了 23个化合物,所有产物均经过红外光谱、高分辨质谱、核磁共振谱表征。

目的:比较应用小切开联合球囊扩张(endoscopic sphincterotomy plus balloon dilation,ESBD)与小切开联合球囊扩张后钛STI sexually transmitted infection夹www.selleck.cn/products/SB-203580缝合(endoscopic endoclip papilloplasty,EEPP)治疗胆总管结石的疗效及并发症。方法:选取2020年6月至2022年6月在河北医科大学第三医院因胆总管大结石(直径>1cm)取石的患者48例,随机分为ESBD组(24例)及EEPP组(24例)。分别对两组之间取石情况(取石成功率、取石时间、机械碎石使用率等)、近期并发症(胰腺炎、出血、穿孔等)、远期并发症(胆总管复发结石、胆管炎、胆囊炎、肝脓肿、胆管癌等)、住院时间的差别进行比较。结果:本研究纳入的48例患者中,ESBD组与EEPP组手术时间中位数分别为38分、45分,无统计学意义(P=0.053);ESBD组与EEPP组一次性取石成功率分别为88%、79.2%,无统计学差异(P=0.699);机械碎石使用率分别为3%、4%(P=0.683),平均住院日分别为9±2.9日、8±2.8日(P=0.321);7例患者(14.6%)手术时内镜下有出血,但血红蛋白无变化,未出现血红蛋白明显下降的严重出血患者;ESBD组与EEPP组急性水肿型胰腺炎发生率分别为12.5%、29.2%,无统计学差selleck BMN 673异(P=0.286);两组均无穿孔并发症发生。ESBD组与EEPP组结石复发率分别为20.8%、8.3%(P=0.413),胆管炎发生率分别为16.7%、8.3%(P=0.663),胆囊炎发生率分别为8.3%、4.2%(P=0.551)。结论:对于胆总管大结石,ESBD和EEPP均为较安全有效的取石方法,两者均可能预防一系列近期及远期并发症,在保留Oddi括约肌功能、预防远期并发症方面EEPP并未表现出优势,仍需要进一步深入研究。

牛子宫内膜炎是养殖中常见的生殖疾病之一,影响发情周期,降低生殖效率等。细菌感染是常见因素,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等,其中金黄色葡萄球菌会诱发亚临床或慢性子宫内膜炎。脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)存在于金黄色葡萄球菌细胞壁中,在诱导疾病中发挥关键作用。牛子宫内膜上皮细胞(Bovine endometrial epithelial cells,BEECs)是子宫内膜抵御的首要防线,在多种刺激下发生炎症反应,影响牛的生殖性能。抗生素在临床上广泛使用,但过度使用MRTX1133临床试验会出现耐药性、药物代谢等问题,需要寻找新的替代药物。近年来,多项研究发现非瑟酮作为一种天然黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎等生物活性,可用于防治肺PORCN抑制剂炎、乳腺炎等多种疾病。基于以上所述,本研究使用BEECs构建体外模型,使用小鼠进行在体试验,研究非瑟酮对LTA诱导的炎症和氧化应激反应。具体研究内容如下:(1)牛子宫内膜上皮细胞培养与体外炎症和氧化应激模型的建立培养牛子宫内膜上皮细胞,贴壁后形态呈“铺路石样”。免疫荧光结果显示:上皮细胞角蛋白18(CK-18)表达呈阳性,细胞系纯,为后续实验奠定基础。CCK-8检测发现,LTA浓度>25μg/m L时会显著影响细胞活力;ROS水平检测、Western blot、RT-q PCR反应进一步发现:25μg/m L的LTA诱导细胞48 h后产生大量ROS,TNF-α、IL-1β表达水平显著升高。综合表明,采用浓度为25μg/m L的LTA诱导细胞48 h来构建体外细胞炎症和氧化应激模型。(2)非瑟酮对LTA诱导的牛子宫内膜上皮细胞炎症和氧化应激反应调控作用的研究首先用CCK-8法检测非瑟酮对细胞活力的影响,发现非瑟酮浓度≥100μg/m L时会显著降低细胞活力,试验共分6组(n=3),分别为对照组、LTA组、LTA+非瑟酮(12.5、25、50μg/m L)组、非瑟酮(50μg/m L)组,采Sunflower mycorrhizal symbiosis用RT-q PCR、Western blot等方法对非瑟酮调控作用进行分析。发现不同浓度非瑟酮可抑制LTA诱导的TLR2的表达及下游NF-κB的活化,减少TNF-α、IL-1β的分泌,促进Nrf2及下游NQO1、SOD等的表达,减少ROS和MDA的积累,表明非瑟酮可缓解LTA诱导的牛子宫内膜上皮细胞炎症和氧化应激反应。(3)非瑟酮对LTA诱导下小鼠子宫内膜炎症和氧化损伤反应调控作用的研究使用昆明小鼠进行在体试验,采用子宫灌注法将5 mg/kg的LTA溶液注入小鼠子宫内诱导24 h,之后腹腔注射不同剂量的非瑟酮溶液(25 mg/kg和50 mg/kg)作用24 h,小鼠颈部处死,收集子宫样本。采用H(5)E染色、RT-q PCR、Western blot等方法进行样本分析。结果显示:LTA灌注后明显可见小鼠子宫肿大、缩短、内膜上皮细胞和深层结构可见较多中性粒细胞浸润;激活TLR2介导的NF-κB通路,增加MDA和促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的表达。不同剂量非瑟酮处理后小鼠子宫形态逐渐恢复正常,内膜上皮细胞内中性粒细胞浸润减少;抑制NF-κB通路的活化,减少TNF-α、IL-1β的产生;促进Nrf2的表达,增加NQO1、SOD等抗氧化酶的表达水平,减少MDA的积累。综合表明,非瑟酮可缓解LTA诱导下小鼠子宫内膜炎症和氧化损伤反应。综上所述,非瑟酮可通过抑制NF-κB信号通路的活化,减少促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的分泌,增加Nrf2及下游NQO1、SOD等抗氧化酶的表达,减少ROS、MDA的积累来缓解LTA诱导子宫内膜炎症和氧化应激反应。