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以蓝莓为代表的浆果在我国资源丰富,分布广泛。花色苷(ACNs)作为浆果中重要的活性成分,不仅能够为果实提供鲜艳的颜色,也具有很强的生理活性功能,如清除自由基、抗炎抗肿瘤、保护视力等,近年来逐渐成为研究热点。然而,花色苷易受p H、温度、添加剂、消化酶等因素的影响而降解,导致其在加工过程中活性损失严重、体内吸收利用率低,制约了花色苷在浆果制品的产业化应用。将花色苷负载在以生物大分子为基础的纳米复合物中可以有效地缓解这些问题。因此本研究通过改性蛋白与多糖构建递送花色苷的复合物提高花色苷在加工、储藏和消化过程中的稳定性,探讨不同多糖对复合物形成和保护作用的影响,利用Zn~(2+)交联形成更稳定的复合物,在细胞和动物模型中评价复合物载体对花色苷细胞抗氧化能力以及体内抗炎能力的增效作用。本文为实现花色苷的加工储藏稳态化和体内活性增效提供了新思路,也为花色苷递送体系的深度研究提供了理论基础。主要结论如下:(1)探究超声预处理联合糖基化改性对蛋白质结构和功能性的影响通过超声预处理联合糖基化对牛血清白蛋白(BSA)和酪蛋白(CA)lifestyle medicine两种蛋白质进行改性修饰,发现超声预处理(40%振幅,10 min)能分别将BSA和CA的接枝度提高10.57%和6.05%,并且影响了蛋白质的表面疏水性、Zeta电势等理化性质。结构分析显示,超声预处理能够促进蛋白质的解螺旋,暴露出更多结合位点,从而提高蛋白质的接枝程度。与结构相对无序的CA相比,超声和糖基化对结构有序程度更高的BSA的影响更大。此外超声和糖基化处理也改善了蛋白质的水溶性、热稳定性、发泡能力和乳化性能等功能性。(2)探究基于改性酪蛋白的二元和三元复合物的构建及对花色苷稳定性影响基于改性的酪蛋白(UGCA),通过自组装形成负载花色苷的二元和三元复合物(ACNs-UGCA、ACNs-UGCA-CMC)。适当的超声处理能够促进形成尺寸更小、分布更均匀和包封率更高的复合物。向二元复合物中加入带负电的羧甲基纤维素(CMC),ACNs包封率从27.36%提高至46.74%。ACNs-UGCA-CMC能够通过组分间的疏水作用和氢键等作用力维持较好的胶体稳定性。两种复合物均能有效缓解ACNs在热处理、抗坏血酸和蔗糖共存的环境中的降解,且ACNs-UGCA-CMC的效果更好,使ACNs的损失率分别降低了20AZD6738体内实验剂量.83%、45.96%、18.94%。两种复合物将ACNs在模拟消化过程中的保留率分别提高12.03%和27.11%,并控制ACNs在模拟消化液中的缓慢释放。(3)探究不同多糖对负载花色苷的三元复合物稳态化作用的影响通过分别将羧甲基纤维素(CMC)、海藻酸钠(SA)、κ-卡拉胶(CRG)和硫酸软骨素(CHS)与改性酪蛋白和ACNs复合,制备了4种ACNs-改性蛋白-多糖三元复合物。研究显示,多糖的链长、基团类型和带电量综合影响了复合物的尺寸、包封率以及对花色苷的保护作用。基于SA形成的ComplexⅡ具有最优的包封率(63.27%)和最佳热稳定性,而CHS与改性酪蛋白形成了粒径仅有96.7 nm,且分布更均匀的ComplexⅣ。4种复合物均能提高ACNs对p H、模拟储藏(避光和室内光)、添加剂共存(抗坏血酸、蔗糖和山梨酸钾)条件下的稳定性,且ComplexⅡ的保护效果最佳。在模拟消化过程中,复合物同样保护了花色苷,降低了其在消化介质中的释放量。(4)探究Zn~(2+)交联的复合物对花色苷细胞内抗氧化能力的影响通过Zn~(2+)交联制备出了包封率更高的ACNs-改性酪蛋白-海藻酸钠复合物,当Zn Cl_2/SA的比例为1/10时,包封率最高可达到69.98%。并且在此比例下,复合物将ACNs在PBS及细胞培养液中的保留率分别提高21.71%和24.68%。以20 mmol/L的丙烯酰胺(AA)诱导建立Caco-2和RAW 264.7细胞氧化损伤模型评价ACNs、空白复合载体(CS Carrier)以及负载花色苷的复合物(ACNs-CS)的细胞内抗氧化能力。ACNs和ACNs-CS能够通过提高细胞活力、降低细胞内活性氧水平、抑制细胞早期凋亡而减轻AA造成的细胞损伤;同时也降低了损伤细胞内氧化应激产物MDA含量,并提高相关内源性抗氧化酶T-SOD、CAT、GSH-px活力。ACNs-CS由于在细胞培养环境中具有比ACNs更高的稳定性,从而更有效地缓解AA诱导的细胞损伤。(5)探究花色苷及其复合物对小鼠结肠炎的缓解作寻找更多用通过3%(w/v)葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠结肠炎模型,以评估复合物对ACNs体内抗炎作用的影响。口服ACNs-CS有效减轻了造模期间小鼠饮食进水量减少、体重下降,以及便血等情况;显著改善了结肠炎小鼠结肠缩短、脾脏水肿;并缓解了炎症引发的结肠组织结构破坏、睾丸损伤等情况。此外ACNs-CS能够下调小鼠血清中的促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,升高抗炎因子IL-10的分泌水平,并降低小鼠结肠组织中的MPO、NOS的水平,以减轻炎症的浸润;并通过降低小鼠结肠组织中的MDA水平,上调T-AOC、GSH-px水平,来缓解炎症伴随的氧化损伤。另外ACNs-CS也能够提高肠道内优势菌群丰度,从而改善炎症引起的肠道内环境紊乱。

目的：探讨苗药组方熏蒸疗法Zinc biosorption对家兔早期膝骨性关节炎（knee osteoarthriti,KOA）模型差异表达基因进行层次聚类分析的意义。方法：将新西兰兔40只随机分为4组，空白对照组、模型对照组、苗药熏蒸组、清水对照组，每组10只。采用木瓜蛋白酶在兔NSC 125973供应商膝关节腔内注射的方法复制早期KOA模型，造模成功后用苗药熏蒸疗法治疗20天，运用基因芯片检测技术对软骨组织的基因表达谱进行检测，最后将得到的原始数据通过RMA算法进行预处理，通过相关基因分析软件进行差异基因（difference gene,DEG）分析，并对其基因表达谱进行聚类分析。结果：DEG分析显示，模型对照组与空白对照组比较，差异显著基因有827个，上调435个，下调392个；苗药熏蒸组与模型对照组比较，差异显著基因有208个，上调112个，下调96个；清水熏蒸组与模型对照组比较，差异显著基因有152个，上调93个，下调59个。聚类分析显示，每个实验组的标本基本为一类，每个标本重复性好，每个实验组与对照组比较，它们的基因表达各有特点。结论：基因芯片检测可以发现苗药熏蒸疗法治疗早期KOA的差异PF-6463922表达基因，而聚类分析发现其相关基因的改变及其基因表达的特殊性。

氯氟醚菊酯是目前中国市场上销量最大的卫生用杀虫剂品种之一，其环境selleck合成安全风险受到广泛关注。本研究以斑马鱼Berzosertib临床试验为试验模型，评价了氯氟醚菊酯急性暴露对斑马鱼胚胎及仔鱼心脏发育的毒性及氧化损伤作用。结果表明，氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎的急性毒性72 h-LC_(50)值为0.756μg/mL，属高毒。经氯氟醚菊酯不同剂量(0、0.2、0.4、0.8μg/mL)暴露72 h后发现：0.4和0.8μg/mL剂量处理组的仔鱼出现脊柱和尾部弯曲、心包和卵黄囊水肿等畸形特征，且心率和孵化率显著降低、胚胎发育不完整(体长变短、头部和眼睛面personalised mediations积缩小)；0.2、0.4和0.8μg/m L的氯氟醚菊酯还能够诱导仔鱼心房心室分化，心脏功能相关基因myl7、myh6、vmhc的表达水平下调，并引起丙二醛(MDA)含量增加，以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶活性的降低，使仔鱼心脏处堆积活性氧(ROS)。本研究结果表明，氯氟醚菊酯暴露对斑马鱼胚胎的心脏发育具有显著毒性，且与氧化损伤作用相关。

研究背景周围神经损伤(Peripheral nerve injury PNI)是一种严重的临床疾病,好发于青壮年。它的特点是发病率高,治疗方法有限,临床预后差。严重的周围神经损伤是导致永久性功能障碍和发病的主要原因之一,给社会带来了沉重的医疗和经济负担。当PNI发生时,首先会触发一系列的细胞和分子事件,称为Waller变性;随后,增殖的巨噬细胞被激活,并被招募到损伤处以去除髓鞘碎片和坏死组织,最终启动神经再生程序。然而,过度的炎症反应会导致组织局部活性氧(reactive oxygen species ROS)水平的升高。巨噬细胞是产生ROS的主要来源之一,它在吞噬炎性坏死组织的同时会产生大量的ROS,而ROS的过度积累会引确认细节起氧化应激反应,产生神经毒性作用,使周围神经细胞损伤,抑制周围神经再生修复。由此可见,如何有效调节损伤部位的炎症反应和氧化应激是促进周围神经再生和功能恢复的关键。近年来,越来越多的研究者将目光集中于开发和设计医用高分子材料用于促进神经组织的再生和受损神经功能的恢复,取得了一些重要进展。其中,水凝胶由于独特的理化性质,常被用作神经源性细胞培养和增殖的支架材料。然而,常规的水凝胶材料缺少调控炎症微环境的能力,限制了其在PNI治疗中的应用,为此,我们开发了一种以单宁酸为交联剂的透明质酸基动态多功能水凝胶,并探讨其通过消除损伤部位ROS和调控炎症微环境促进周围神经修复(Peripheral nerve repair PNR)的治疗效果和作用机制。研究目的:本研究系列实验主要围绕以单宁酸(tannic acid,TA)为交联剂的透明质酸基动态多功能水凝胶用于PNI的修复展开探索。首先以TA作为交联剂构建了的具有抗氧化应激、抗炎能力的透明质酸(Hyaluronic acid,HA)基多功能水凝胶(HPTA)。充分表征了构成水凝胶的前体与水凝胶的理化性质,以及探究其在细胞实验中对细胞行为的影响,然后Saliva biomarker将水凝胶注射到大鼠坐骨神经挤压伤处进行治疗用于评估HPTA水凝胶对神经损伤修复的效果。随后我们在成功构建HPTA水凝胶的基础上,在水凝胶中负载甲钴胺(Methylcobalamin,MeCbl),开发出一种新型的可注射HPTA@MeCbl水凝胶用于替代MeCbl传统的注射疗法,可以Imidazole ketone erastin分子量在神经损伤局部进行持续治疗。对HPTA@MeCbl水凝胶的理化性质进行充分的表征用于验证MeCbl的加入是否会改变HPTA凝胶本身的性质。通过体外细胞实验与体内对大鼠坐骨神经横断伤的治疗所得到的结果用于评价HPTA@MeCbl水凝胶对神经再生的影响。研究方法:本研究首先构建了具有抗氧化、抗炎功能的HPTA水凝胶。对其理化性质进行充分表征,通过体外细胞实验探究水凝胶对细胞行为的影响,最后将水凝胶应用于大鼠坐骨神经挤压伤模型以验证其对大鼠坐骨神经再生与功能恢复的作用。具体研究方法如下:(1)首先利用3-氨基苯硼酸(3-Aminophenylboronic Acid,3-APBA)上的氨基(-NH2),与HA上的羧基(-COOH)进行酰胺化反应,将3-APBA接枝到HA上形成HA-PBA偶联物。对HA-PBA进行傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)表征后,以TA为交联剂与HA-PBA偶联物进行共混合成含有动态硼酸酯键的HA基水凝胶(HPTA)。对HPTA水凝胶进行形貌、流变学、粘附性、降解速率及药物释放性能等方面进行表征并筛选出最佳的水凝胶浓度。然后通过DPPH·、PTIO·自由基清除效率验证水凝胶的抗氧化能力。(2)体外细胞实验表征了HPTA水凝胶对嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PC12)细胞与雪旺细胞(Schwann cells,SCs)的细胞行为的影响。并探究了HPTA水凝胶在高ROS条件下对细胞的保护作用。(3)体内动物实验利用大鼠坐骨神经挤压伤模型对该水凝胶的神经修复效果进行评价。将所有大鼠随机分组后进行造模,然后在术后2周与4周时通过大鼠的足印分析、神经电生理学测试、肌肉组织学分析、神经组织学评价、免疫蛋白荧光、免疫蛋白印迹及神经组织的炎症因子表达来评估大鼠下肢功能恢复效果并进一步探讨HPTA水凝胶对神经修复的影响。随后,我们在成功构建HPTA水凝胶的基础上加入甲钴胺(MeCbl),开发出新型的HPTA@MeCbl水凝胶。(1)先对HPTA@MeCbl水凝胶进行形态学、流变学、粘附性、体内、外降解性、MeCbl的释放等方面的表征,并将获得的结果与空白对照(HPTA)组进行对比。(2)在体外使用PC12细胞进行细胞活力、增殖、细胞活死染色等实验验证其细胞相容性。(3)最后,我们将HPTA@MeCbl水凝胶应用于大鼠坐骨神经横断伤的治疗。术后2个月时进行大鼠的足印分析、神经电生理学测试、肌肉组织学分析、神经组织学评价、免疫蛋白染色等一系列实验来评价下肢功能恢复与坐骨神经再生情况。研究结果与结论:(1)本研究首先通过500 MHz氢谱质子核磁(1H NMR spectra)对HAPBA偶联物进行信息采集,图上的多重峰表明了苯硼酸基团成功地修饰到了透明质酸的分子链,并计算得到接枝率为:23.4%。合成HPTA水凝胶后,通过红外光谱分析(FTIR)可知位于1326 cm~(-1)处的特征峰主要归因于硼酸酯键(BOH)的拉伸震动,证明TA与HA-PBA偶联物成功交联形成水凝胶网络。随后对HPTA水凝胶的形貌、储能模量、粘附性、降解速率及释放性能进行表征,筛选出HPTA-3为最优的成胶浓度,并继续后续实验。当HPTA-3水凝胶在浓度为20mg/m L时,对DPPH·与PTIO·的自由基清除率分别达到(76.23±0.75%)与(66.95±0.13%),证实了HPTA-3优异的抗氧化能力。(2)随后在细胞实验中,HPTA-3水凝胶的抗氧化能力同样得到了体现。我们使用20mg/m L的HPTA-3水凝胶提取液与0.5m M的H_2O_2溶液混合后共孵育PC12细胞,细胞活力均大于80%,也说明了HPTA-3水凝胶可以有效消除细胞内ROS,以此来达到保护细胞免受ROS伤害的作用。体内降解实验的结果显示,在术后4周水凝胶附近的皮肤组织均未出现明显的炎症反应,说明HPTA-3水凝胶具有良好的体内生物安全性。体内动物实验通过步态分析、坐骨神经指数(SFI)、神经电生理测试、肌肉组织学、神经组织学、透射电镜(Transmission electron microscope,TEM)下观察的轴突直径与髓鞘厚度,以及4种特异性蛋白染色、ELISA法炎症因子表达和免疫蛋白印迹等实验结果证明了虽然HPTA-3治疗组与Sham组相比结果仍有差距,但相比于未进行水凝胶治疗的Crush组则取得了更好的结果。并且ELISA法测定神经组织的趋化因子,证明应用HPTA-3水凝胶可以上调抗炎因子水平并抑制促炎因子的表达,可以帮助神经组织损伤后巨噬细胞从M1表型向M2表型转型,也证实了HPTA-3的抗炎特性。通过对MBP与NF200的免疫蛋白印迹表达结果与免疫蛋白荧光染色相对应,再次证明了HPTA-3水凝胶可以有效地促进损伤后神经轴突的再髓鞘化及轴突再生。随后我们进一步在HPTA水凝胶基础上负载MeCbl合成可注射的HPTA@MeCbl水凝胶。(1)首先通过SEM对HPTA@MeCbl水凝胶进行微观形貌的观察可以发现MeCbl结晶沉积在水凝胶的网络结构中。然后我们对HPTA@MeCbl水凝胶进行了流变学、粘附性、降解性等一系列表征,并与未负载MeCbl的空白HPTA组进行对比,发现两组水凝胶在材料表征结果上并无显著差别,因此也说明MeCbl的加入对凝胶的交联度与硼酸酯键的形成没有干扰,不会对水凝胶的理化性质造成实质性改变。随后我们通过标准曲线回归方程:y=181.94x-0.1471对MeCbl的释放率进行计算,释放率在前6天增长快速,6-10天则明显放缓,HPTA@MeCbl水凝胶的这种释放规律有望在早期达到治疗所需浓度,可以更早地帮助受损神经进行修复。(2)我们通过细胞实验也证明HPTA@MeCbl水凝胶具有良好的细胞相容性,并且在与细胞共孵育48小时后可以观察到有明显的促进细胞增殖的作用。(3)最后将HPTA@MeCbl水凝胶进行坐骨神经横断伤的治疗。结果表明,与空白的HPTA组和Transection组相比HPTA@MeCbl组的结果更接近Sham组,治疗效果更好。值得注意的是术后2个月时NF200、Tuj-1的特异性蛋白染色的半定量分析结果显示HPTA@MeCbl组与Sham组的结果比较无统计学差异,也证明了HPTA@MeCbl水凝胶可以使神经轴突的再生效果明显提高,能够恢复到类似于正常神经组织的结果。综上所述,本研究成功构建了以TA作为交联剂的HA基动态多功能水凝胶,在未与其他治疗剂联合使用的情况下,HPTA水凝胶凭借自身抗氧化、抗炎作用可有效促进PNI后的神经修复。并且作为药物的递送载体,实现了MeCbl在神经组织损伤局部的持续性治疗,验证了这种“经典药物新用法”的可行性,对未来高性能神经损伤修复材料的设计和开发提供了新的思路与方向。

为进一步验证有机肥对烟株生长代谢的影响，寻找有机肥施用下化肥减施的最佳比例，以云烟85为试材，研究烟草专用肥930 kg·hm~(–2) (N:P_2O_5:K_2O=10:10:25,CK)、减肥15%+300 kg·hm~(–2)油菜籽饼肥(T1)、减肥30%+300 kg·hm~(–2)油菜籽饼肥(T2)和减肥45%+300kg·hm~(–2)油菜籽饼肥(T3)等4种施肥方式对烟株不同生育时期碳氮代谢酶活性、碳氮积累量以及烤后烟叶的经济状况的影响AZD6738浓度。与纯施化肥(CK)相比，移栽80 d后，T2处理干物质积累量、叶绿素含量、光合速率、碳含量、碳积累量、氮含量、氮积累量分别提高了5.49%、33.86%、32.79%、23.43%、16.89%、17.09%、11.03%。各处理的烟株淀粉酶和硝酸还原酶活性均随生育时期表现为先升高后降低趋势；移栽20 d，两种酶的活性均表现为CK高于减肥配施油菜籽饼肥处理；移栽35 d后，T1、T2两处理的两种酶活性较CK有显著提升。T1处理烟叶产量最高，但均价及中上等烟叶率显著降低；T2处理产值、均价及中上等烟叶率Cell-based bioassay最高，较CK提高了14.58%、8.94%、6.0获悉更多8%。该研究明确了减肥30%+300 kg·hm~(–2)油菜籽饼肥效果最佳，为维持烟草产量与品质稳定及发展可持续绿色友好型农业提供理论依据。

目的 基于网络药理学和分子对接技术探究甘草泻心汤（GancaoXiexinDecoction，GXD）抗溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）的潜在药效物质基础及作用机制。方法 利用高效液相色谱法建立GXD指纹图谱，指认其中的活性成分。采用网络药理学方法构建“活性成分-靶点-通路”网络并分析，对主要活性成分与核心靶点进行分子对接验证。体外实验采用不同浓度GXD含药血清、GXD冻干粉、GXD混合标准品处理脂多糖（LPS）诱导的人结直肠腺癌（Caco-2）细胞炎症模型。CCK-8法检测细胞存活率，Westernblot法检测细胞中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子-κB（NF-κB)蛋白表达水平。结果 高效液相色谱法指认出GXD指纹图谱中的9个活性成分。网络药理学筛选得出甘草苷、黄芩苷、黄连碱、槲皮素、姜辣素5个主要活性成分及关键蛋白β连环蛋白（βBerzosertib-catenin）、细胞肿瘤抗原p53（TP53），可能通过调节TNF-α、NF-κBp65等蛋白起到抗UCneuromedical devices的作用，分子对接结果显示抗UC药效成分均与靶点蛋白分子对接结果良好。CCK-8实验证明，不同浓度的GXD含药血清、冻干粉、混标均能够显著提高LPS诱导炎症模型的Caco-2细胞的存活率，Weste确认细节rnblot法证明不同浓度的GXD含药血清能够降低细胞中TNF-α、NF-κBp65蛋白的表达，起到治疗UC的作用。结论 本研究初步阐明了GXD的潜在药效物质基础，探讨了GXD抗UC的作用机制，为其临床应用提供了一定的理论参考。

目的：探讨丙泊酚复合不同剂量布托啡诺对内镜下黏膜切除术（EMR）患者麻醉效果的影响。方法：选取徐州市中心医院2021年4月至2021年11月期间行内镜下肠黏膜切除术患者90例，按数字随机表法分为B1组（丙泊酚1.5～2 mg·kg~（-1）+布托啡诺10μg·kg~（-1））、B2组（丙泊酚1.5～2 mg·kg~（-1）+布托啡诺5μg·kg~（-1））、F组（丙泊酚1.5～2 mg·kg~（-1）+芬太尼1μg·kg~（-1）），每组30例，比较三组患者苏醒后（T1）、苏醒获悉更多30 min后（T2）的认知评分、疼痛程度及术中术后不良反应发生率。结果：F组T2的平均动脉压（MAP）高于麻醉前10 min（T0），差异具有统计学意义（P <0.05）；三组患者T2的蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评分均低于T0，且F组MoCA评分低于B1、B2组，差异具有统计学意义（P <0.05）;F组患者视觉模拟Cathodic photoelectrochemical biosensor评分法（VAS）评分均高于B1、B2组，差异具selleck化学有统计学意义（P <0.05）;B2组患者低血压发生率低于F组，低氧血症发生率低于B1组、F组，差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：EMR患者采用丙泊酚复合5μg·kg~（-1）布托啡诺方案有助于减少早期认知功能损害及不良事件发生，具有良好的麻醉效果。

旨在探究BEEC α7nAChR经由JAK2/STAT3信号通路调控炎症反应机制。应用间接免疫荧光技术鉴定BEEC α7nAChR的表达；α7nAChR非特异激动剂烟碱、特异激动剂PUN282987及特异性抑制剂MLA预处理BEEC后使用终浓度0.1 mg/L LPS刺激BEEC,ELISA检测IL-6、IL-8、IL-10分泌水平；Western blot检测α7nAChR、JAK2、P-JAK2、STAT3和P-STAT3的表达水平。PUN282987及烟碱显著抑制IL-6、IL-8的分泌，促进IL-10的分泌，MLA可拮抗上述效应；PUN282987显著上调STAT3磷酸化水平，α7nAChR表达水平与STAT3磷酸化水driveline infection平则呈负相关，烟碱显著抑制STAT3磷酸化，α7nAChR表达水平与STAT3磷酸化水平呈正相关；α7nAChR激动剂对JAK2磷酸化水平无显著影响。结果表明：激活BEEC α7nAChR通过调控STAT3磷酸化、抑制促炎细胞因子分泌和促进抗炎因子分泌进而抑制炎症反应，BEEC α7nAChR是防治奶牛子宫内膜炎潜在靶点。研究表明PUN2829BAY 73-450687与烟碱调控STA更多T3磷酸化及α7nAChR表达均存在药理学差异，而在其他有关BEEC或α7nAChR的研究中暂未见报道。

研究背景与目的:在近些年的研获悉更多究中指出至少11%-16%儿童和青少年患有一种或多种精神障碍,我国的研究也指出有17.5%的总体患病率在我国6-16岁的儿童青少年群体中,但仅有部分儿童青少年能得到诊治。在我国的多项官方数据中也指出在因精神疾病而住院的患者中,儿童青少年的占比存在增加趋势。近些年国家也愈加重视儿童青少年的心理健康,多次发布文件要求加强儿童青少年精神障碍的识别诊疗水平。但国内外关于儿童青少年精神疾病的调查多为社会层面的发病率调查,而很少涉及因精神疾病而住院的儿童青少年的情况。但从临床角度来看,精神疾病住院率可能更能表现疾病的严重程度,本研究主要调查了儿童青少年主要精神疾病的住院占比、住院时间、入院年龄及性别占比等情况,为疾病的早期干预及医院的医疗资源分布提供参考。方法:本研究筛查了2001-202mouse bioassay2年安徽省精神卫生中心儿童青少年病房的5807例患者,依据所患疾病,纳入了占总体比例前四(83.1%)的疾病,分别为精神分裂症(SCZ)(37.2%)、抑郁障碍(DD)(20.3%)、双相情感障碍(BD)(11.0%)、童年情绪障碍(CED)(14.6%),对每种疾病进行住院占比、住院时间、入院年龄及性别占比分析。同时以新型冠状病毒流行年份为选定时间点,比较时间点前后住院情况的变化。结果:1.在住院占比上,2001-2022年精神分裂症住院占比存在明显的下降趋势(Tj-t=26.5,z=-5.021,P<0.001),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=-0.772,P<0.001)。抑郁障碍的住院占比存在明显的上升趋势(Tj-t=202.0,z=4.882,P<0.001),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=0.752,P<0.001)。双相情感障碍的住院占比无明显的变化(Tj-t=147.5,z=1.805,P=0.071)。童年情绪障碍的住院占比存在明显的上升趋势(Tj-t=198.5,z=4.809,P<0.001),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=0.768,P<0.001)。2.在住院时间上,精神分裂症的住院时间明显长于另外三种疾病(χ~2=667.640,P<0.001),而抑郁障碍、双相情感障碍及童年情绪障碍之间并没有显著差异。精神分裂症的住院时间存在AY-22989化学结构下降趋势(Tj-t=65.0,z=-2.835,P=0.004),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=-0.441,P=0.004)。抑郁障碍的住院时间无显著的变化趋势(Tj-t=20.5,z=0.524,P=0.600)。双相情感障碍的住院时间无显著的变化趋势(Tj-t=113.0,z=-0.141,P=0.888)。童年情绪障碍的住院日无显著的变化趋势(Tj-t=13.5,z=-0.943,P=0.345)。3.在入院年龄上,精神分裂症的入院年龄无显著变化趋势(Tj-t=123.0,z=0.423,P=0.672)。抑郁障碍的入院年龄有显著的下降趋势(Tj-t=2.0,z=-3.336,P=0.001),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=-0.889,P=0.001)。双相情感障碍的入院年龄存在显著的上升趋势(Tj-t=181.0,z=3.697,P<0.001),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=0.570,P<0.001)。童年情绪障碍的入院年龄无显著变化趋势(Tj-t=13.0,z=-1.043,P=0.297)。4.在性别占比方面,精神分裂症的住院性别占比上,女性占比存在显著的上升趋势(Tj-t=180.0,z=3.667,P<0.001),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=0.564,P<0.001)。抑郁障碍的女性住院患者存在明显的上升趋势(Tj-t=33.0,z=3.128,P=0.002),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=0.833,P=0.002)。双相情感障碍的女性住院患者无明显的变化趋势(Tj-t=118.0,z=0.142,P=0.887)。童年情绪障碍的女性住院患者存在上升趋势(Tj-t=32.0,z=2.919,P=0.004),Kendall‘sτ-b相关系数(rτ=0.778,P=0.004)。5.在选定时间点前后,四种疾病的住院占比趋势均无在原有基础上再次升高的表现,在住院时间上,精神分裂症及童年情绪障碍的住院时间存在由时间点前的升高趋势转为下降趋势,而抑郁障碍及双相情感障碍的住院时间的下降趋势存在下降幅度的增加表现。在入院年龄上,精神分裂症与双相情感障碍的入院年龄存在在原有基础上趋势幅度增加的表现,而抑郁障碍与童年情绪障碍的入院年龄存在下降趋势的缓和。在入院性别上,精神分裂症与双相情感障碍的女性占比存在由上升趋势转为下降趋势,抑郁障碍与童年情绪障碍的女性占比存在上升趋势的缓和。结论:精神分裂症住院占比虽然存在明显的下降趋势,但仍为儿童青少年的主要精神疾病。需要注意的是,抑郁障碍及童年情绪障碍存在明显的上升趋势。且住院患者占比中,女性患者占比呈升高趋势,需加以持续关注。而新型冠状病毒对住院情况的影响还需后续进一步研究。

骨关节炎(OA)是关节骨系统的慢性增生性炎症,又称为慢性骨关节炎。临床上常表现为关节僵硬、疼痛和肿胀等症状,严重影响动物生活质量,造成经济损失。兽医临床上多通过非甾体抗炎药(NSAIDs)进行药物治疗,但副作用较多。因此,深入研究OA的致病机制,开发安全有效的OA药物至关重要。植物提取物价格低廉、毒副作用小,并具有抗炎、抗氧化等多种药理活性,在临床上被广泛应用。研究表明自噬在治疗OA方面发挥着重要作用,适度的自噬可以维持软骨细胞正常的生理功能,PI3K/AKT/mTOR通路是体内调节细胞自噬的重要通路,同时参与OA的发生和发展。基于此,本实验以PI3K/AKT/mTOR自噬途径为切入点,探讨齐墩果酸(OLA)对OA大鼠的作用及分子机制。本实验分为体内和体外实验。在体内实验中,通过关节腔注射碘乙酸钠(MIA)建立大鼠OA模型,连续给药28天。每周进行行为学检测,Von-Frey机械疼痛检测、冷超敏检测和膝关节肿胀检测。每周采集血清样本,应用ELISA法检测大鼠血清中炎症因子和MMPs水平。实验结束后收集各组关节样本,对大鼠膝关节分别进行形态学、X线影像学和组织病理学观察及评分;免疫组化检ROCK抑制剂测大鼠软骨中i NStarch biosynthesisOS和MMP13蛋白表达,以评估OLA对OA大鼠软骨的保护作用。在体外实验中,通过甲苯胺蓝染色和免疫荧光检测鉴定ATDC5软骨细胞,CCK-8法筛选OLA、Chloroquine(CQ)和LY294002干预剂量。通过10 ng/m L IL-1β建立炎症损伤模型,免疫印迹检测i NOS、COX2、MMP3、MMP13、Beclin1、P62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白水平。MDC染色和透射电镜检测自噬小体数量和形态,m RFP-GFP-LC3腺病毒对自噬溶酶体和自噬体共定位,RT-q PCR检测Atg相关基因水平。使用自噬抑制剂CQ和PI3K抑制剂LY294002建立通路阻断模型,检测自噬和通路相关蛋白表GSKJ4达情况。明确OLA通过调节PI3K/AKT/mTOR自噬途径改善OA大鼠的软骨退变机制。结果显示:(1)在大鼠OA模型中,OLA灌胃后减轻大鼠关节肿胀,缓解大鼠疼痛,抑制软骨病理变化,降低软骨中MMP13和i NOS的表达。此外,OLA干预能够逆转OA大鼠血清中IL-1β、TNF-α、i NOS、COX-2、MMP3和MMP13的水平。(2)在IL-1β建立的炎症损伤模型中,OLA处理后降低ATDC5软骨细胞中i NOS、COX-2、MMP3、MMP13和P62的表达,促进Beclin1和LC3II/LC3I蛋白表达。OLA干预后Atg相关基因水平显著升高,自噬囊泡聚集显著增加。转染m RFP-GFP-LC3腺病毒观察OLA干预后自噬体和自噬溶酶体数量显著增加。使用CQ预处理细胞,自噬相关蛋白被显著抑制。使用LY294002预处理细胞,PI3K/AKT/mTOR通路蛋白被显著抑制,自噬相关蛋白表达升高,与OLA干预结果相似。说明OLA通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路,促进自噬,保护OA大鼠。结论:(1)OLA抑制MIA诱导的大鼠OA疼痛,降低血清中IL-1β、TNF-α、i NOS、COX-2、MMP3和MMP13水平,改善软骨病理学特征,保护软骨退变。(2)在IL-1β诱导的体外炎症损伤模型中,OLA通过调控PI3K/AKT/mTOR通路,促进自噬发挥抗炎抗基质降解作用。