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目的：研究没食子酸激活核因子E2相关因子-2（Nrf-2）通路减轻高糖诱导的NIH-3T3细胞炎症反应与氧化应激，恢复NIH-3T3细胞功能的效应机制。方法：不同浓度葡萄糖及没食子酸干预24h后CCK-8法检测NIH-3T3细胞增殖活力，以确定最佳高糖损伤造模浓度及没食子酸干预浓度；以CCK-8法检测没食子酸对高糖诱导下NIH-3T3细胞增殖活力；以DCFH-DA荧光探针检测NIH-3T3细胞活性氧（ROS）含量；免疫荧光法检测Nrf-2入核；RT-PCR 和Western Blot法检测Nrf-2及核因κselleck NMR-B（NF-κB）信号通路相关蛋白及mRNA表达；Western Blot法检测Ⅰ型胶原蛋白（COL-Ⅰ）表达。结果：选用100 mmol/L葡萄糖为造购买BMN 673模浓度，选用5 μmol/L为没食子酸干预浓度。与正常对照组相比，模型对照组细胞增殖活性下降（P<0.01），Nrf-2信号相关蛋白及mRNA表达下调，NF-κB信号相关蛋白及mRNA上调（P<0.05或P<0.01），细胞中ROS含量升高，Nrf-2表达、核易位减少（P<0.05或P<0.01，细胞COL-Ⅰ合成能力减弱（P<0.01）；与模型对照组相比，没食子酸干预可恢复细胞增殖活性（P<0.01），Nrf-2信号相关蛋白及mRNA表达上调，NF-κB信号相关蛋白及mRNA下调（P<0.05或P<0.01）；细胞中ROS含量下调，Nrf-2表达、核易位增Hepatoblastoma (HB)多（P<0.05或P<0.01）；细胞COL-Ⅰ合成能力增强（P<0.01）。结论：没食子酸可通过激活Nrf-2信号通路清除NIH-3T3细胞ROS含量，减轻氧化应激并抑制炎症反应，促进COL-Ⅰ合成，从而恢复高糖损伤NIH-3T3细胞功能。

目的 探讨老年幽门螺杆菌(Hp)感染合并代谢综合征(MS)患者糖血脂代谢的相关性，为临床诊治MS患者提供理论依据。方法 选取2020年2月至2021年2月来四川省巴中市中心医院治疗的老年MS患者176例，采用尿毒[~(13)C]片呼气试验药盒Cicindela dorsalis media测定Hp感染情况，根据Hp感染情况分为Hp阳性组(n=59)和Hp阴性组(n=117),测定所有研究对象FBG、2hPG、HbA1c和FINS等糖代谢指标及血清TC、HDL-C和LDL-C等脂代谢指标水平水平，采用多因素logistic回归分析Hp感染合并MS的危险因素；对MS患者血清LDL-C、HbA1c和FINS水平与DOB值进行Pearson相关性分析。结果 Hp阳性组患者JNJ-42756493试剂FBG、2hPG、HbA1c、FINS、LDL-C水平明显高于Hp阴性组(P<0.05);Hp阳性组和Hp阴性组患者LDL-C和TC水平间无差异(PLBH589价格>0.05); LDL-C、HbA1c和FINS是Hp感染合并MS的独立危险因素(P<0.05);经Pearson相关性分析，MS患者DOB值与血清LDL-C、HbA1c和FINS水平呈正相关(r=0.475,0.512,0.459,P<0.05)。结论 Hp感染会影响老年MS患者糖脂代谢，Hp感染与老年MS患者LDL-C、HbA1c和FINS时水平存在密切关系。

阿尔茨海默病（AD）是一种神经系统退行性疾病，其发病机制主要有β-淀粉样蛋白(Aβ)过度沉积、神经炎症反应、Tau蛋白过度磷酸化等，目前临床还没有找到有效的治疗药物。而传统中草药可CL13900溶解度以通过多成分多靶点发挥抗AD作用成为研究热点。老鹳草作为我国的一味传统中药已有600余年的临床药用历史，其具备巨大的药用潜力和广阔的应用前景。老鹳草属药用植物的化学成分类型主要包括鞣质、黄酮、有机酸及挥发油等。研究表明，中药老鹳草中多种鞣质化学成分具有改善学习记忆能力和认知功能障碍等药理活性，其机制涉及抗Aβ、调节Tau蛋白、抗氧化、抗炎、抑制乙酰胆碱酯酶活性等，其能通过多途径、多靶点抑制神经元的退行性改变，从而有效防治阿尔兹海默病等神经退行性疾病。通过查阅分析相关文献后，着重对中药老鹳草属中多种鞣Bone infection质组分及其在防治阿尔兹海默病方面的研究进行综述。并通过探讨中药老鹳草属植物中的鞣质组分及其作用机制，筛选出潜在治疗阿尔兹海默病等神经退行性疾病疾病的药物组分，为其进Crizotinib使用方法一步开发和临床应用提供理论基础以及研究思路。

目的 探讨清热化痰活血方加减治疗急性缺血性卒中的疗效及其抗炎作用。方法 选取2014年1月-2016年12月无锡市中医医院及宿迁市中医院60例急性缺血性卒中患者，采用随机数字表法将患者分为研究组（30例，接受常规西药联合清热化痰活血方加减治疗）与对照组（30例，接受常规西药治疗），疗程10 d。对比2组plant ecological epigenetics治疗前后的中医证候积分、脑卒中专用生活质量量表（SS-QOL）、白细胞计数（WBC）、Fugl-Meyer运动功能评定量表（FMA）、中性粒细胞比率（NEUT）、美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、C-反应蛋白（hs-CRP）水平，临床疗效及不良反应。结果 治疗前2组患者的中医证候积分、SS-QOL、NEUT、FMA、WBC、NIHSS、hs-CRP比较，差异无统计获悉更多学意义（P> 0.05）；治疗后研究组的hs-GW4869细胞培养CRP、WBC、NEUT水平低于对照组，NIHSS评分低于对照组，SS-QOL、FMA评分高于对照组，差异具有统计学意义（P <0.05）；研究组总有效率高于对照组（P <0.05）;2组的总不良反应率差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 清热化痰活血方加减治疗可有效改善急性缺血性卒中患者神经功能，减轻患者局部炎症反应并提高患者生活质量。

【目的】通过转录组测序筛选猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus typeⅡ,PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞系(3D4/2)差异表达基因，为了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和抗PCV2感染药物研发奠定基础。【方法】用感染复数(multiplicity of infection, MOI)为1的PCV2 NJ2002株处理3D4/2细胞，利用Illumina NovaSeq 6000测序平台进行转录组测序。使用DeSeq 2.0软件进行差异表NSC 119875试剂达基因分析，并对差异表达基因进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能分析及转录因子靶向分析，选取免疫及凋亡相关基因进行实时荧光定量PCR验证，用Western blotting技术检测细胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)及磷酸化胞内磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平。【结果】转录组测序结果显示，与对照组相比，PCV2感染组共获得713个差异表达基因，其中313个上调，400个下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示，差异表达基因与免疫应答等相关，主要富集在细胞外基质受体互作通路、新陈代谢通路、HIF-1信号通路、病毒致癌作用、PI3K-Akt等信号通路。实时荧光定量PCR结果与转录组测序的基因表达水平保持一致。Western blotting检测结果显示，PCV2感染3D4/2细胞24 h后PI3K和Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。转录因子靶向分析表明，差异表达基因与核转录因子Y亚基β(NFYB)和ETS转录因子(ELK4)联系紧密。【结论】PCV2可能通过PI3K-Akt信号通路影响下游炎症信号通路和凋亡信号通路增强自身复制能力。NFYB和ELK4转录因子在PCV2感染过程中可能发挥重要作用，可考虑作为抗PCV2药物靶点。研究结果为深入PI3K/Akt/mTOR抑制剂了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和相关Excisional biopsy药物开发提供了理论基础。

目的:1、县级医院由于受到地域因素和社会经济条件的限制,临床实践与大、中城市的医院存在着一定差异。辽宁省地处中国东北部,经济发展水平相对欠发达,城乡及地区间差异明显,通过研究辽宁省县级医院急性冠脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)接受经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)患者的临床特征与预后关系,为辽宁省县级医院胸痛中心的建设和发展提供因地制宜的客观依据。2、在本研究中,ACS行PCI患者远期全因死亡组的样本数量和存活组的样本数量具有严重的不平衡性。为了能够充分利用全部随访患者信息,减少样本信息损失,解决样本不平衡问题,本研究从数据层面入手,应用混合采样策略进行模型构建工作,建立适宜辽宁省县级医院ACS行PCI患者远期死亡风险的预测模型,准确预测患者发生远期死亡的概率,为个体化干预高危患者提供临床依据。3、通过将平衡交叉熵和焦点损失引入集成算法,在不改变数据分布的前提下提升模型识别死亡风险高的患者的能力,并通过探索到的最佳建模策略构建以再发心肌梗死为结局的风险预测模型。4、为解决机器学习模型内部复杂度高、缺乏可解释性、难以直观理解的问题,基于合作博弈论理论构建加性解释模型,分别从基于患者整体和基于患者个体的角度进行可解释性分析,从而为模型使用者提供更加清晰完整的决策逻辑,辅助医生做出医疗决策。研究方法:1、本研究根据地理位置进行立意抽样,在辽宁省范围内选取6家县级医院,采集了2018年9月—2019年8月期间所有因ACS在县级医院就诊并接受PCI的患者的病历资料。收集社会人口学资料、出院诊断、既往史、临床基本特征、冠状动脉造影特征、PCI手术相关因素、医疗资源的使用情况、各项实验室指标、超声、住院期间辅助用药等观察指标。分别于患者出院后的第1年、第2年、第3年进行定期随访,若发生死亡事件则不再进行下一次随访。随访的内容包括随访期间的复查情况、用药信息、日常BI 10773抑制剂行为习惯及结局事件。主要研究终点为远期全因死亡,次要研究终点包括随访期间发生的如下事件:心衰、脑卒中、再发心肌梗死、远期心源性死亡、靶血管血运重建、因心源性原因再次住院。采用倾向性评分进行病例组与对照组(1:3)匹配,全因死亡情况作为分组因素,年龄、性别作为协变量。采用多因素logistic回归分析探索影响ACS行PCI患者远期全因死亡风险的因素。2、应用机器学习的方法进行模型构建。在应用树模型时,对于经过判断后可以确定为客观存在的离群值进行保留,以达到不损失信息的目的,不影响树模型训练效果;对于本研究使用的其他模型,经过判断后认为确应修正的离群值,根据实际情况采用最近值或平均值(或中位数)替代离群值,以达到减少信息损失的目的。采用基于随机森林的链式方程式多重插补法(multiple imputation by chained equations,MICE),通过预测均值匹配(predictive mean matching,PMM),对分类变量及连续变量进行插补。在应用K-近邻法(k-nearest neighbor,KNN)时,对数据进行归一化处理以消除量纲的影响;支持向量机(support vector machine,SVM)则根据需要,决定是否进行归一化处理;其他模型不对数据进行归一化处理。分别采用低方差过滤法(low variance filter)、递归特征消除法(recursive feature elimination,RFE)、弹性网络回归(elastic net regression)的方法来进行特征筛选。将不结合数据增强策略、单纯应用合成少数类过采样技术(synthetic minority oversampling technique,SMOTE)、联合应用SMOTE和编辑最近邻规则(edited nearest-neighbor,ENN)后的训练集输入相应模型进行训练。通过SMOTE算法随机选择少数类样本及其k近邻,在该样本与其近邻样本之间用线性插值的方式生成新的少数类样本,在均衡建模样本的同时实现缓解过拟合;通过ENN算法以数据清洗的方式删除边界样本与噪声样本,解决过采样过程中生成的少数类样本容易与周围的多数类样本产生类间重叠区域的问题。分别使用随机森林、自适应增强、XGBoost、朴素贝叶斯、支持向量机、K近邻六种机器学习算法进行模型构建。3、通Panobinostat作用过在集成算法中引入代价敏感的方式将平衡交叉熵嵌至模型,考虑不同误分类情况下代价的差异性,并通过将焦点损失嵌至模型中,给位于决策边界的难分类样本赋予不同权重,从而解决传统分类算法会更倾向于将样本预测为多数类的问题,提升模型识别死亡风险高的患者的能力。构建基于焦点损失改进的ACS患者XGBoost远期死亡风险预测模型及其亚组风险预测模型,并以再发心肌梗死为结局构建基于焦点损失改进的XGBoost风险预测模型。4、基于合作博弈论理论构建加性解释模型,通过构建不同的输入特征的组合,以这些输入特征存在或者不存在的方式,对模型输出情况进行比较,从而阐明这些目标输入特征的重要性。通过摘要图、依赖图、决策图、特征贡献图、特征动态变化图等分别实现基于患者整体和个体的模型可解释性分析。结果:1、结果显示,急诊的入院方式、左主干或三支病变、术中最大扩张压力大小是ACS行PCI患者术后随访期间发生远期死亡的独立危险因素,其中ACS患者急诊的入院方式OR为2.04(95%CI:1.01-4.10,P=0.047)、左主干或三支病变OR为3.40(95%CI:1.71-6.75,P<0.001)、术中最大扩张压力OR为1.1(95%CI:1.00-1.20,P=0.043)。LVEF≥50%、e GFR≥60ml/min/1.72m~2、ALB≥35g/L是ACS行PCI患者术后随访期间发生远期死亡的独立保护因素,其中LVEF≥50%的OR为0.07(95%CI:0.03-0.16,P<0.001)、e GFR≥60ml/min/1.72m~2的OR为0.11(95%CI:0.05-0.22,P<0.001)、ALB≥35g/L的OR为0.02(95%CI:0.00-0.06,P<0.001)。2、综合应用多种特征筛选策略,获得的模型在性能上优于单一特征筛选策略,最佳模型共计纳入29个特征。通过基于SMOTE+ENN算法的混合采样数据增强策略从数据层面给出了针对不平衡数据集的解决方案,将获得的相对平衡的训练数据作为训练集进行重新学习,其中基于随机森林的最佳模型的_2F-score、G-means、灵敏度分别达到0.6061、0.7958、0.6667。3、在不改变数据分布的前提下,从算法层面入手解决不平衡问题。当以死亡为结局进行模型构建时,最佳模型的_2F-score、G-means、灵敏度分别达到0.7547、0.9140、0.8889,并且针对各亚组构建的模型均展现出较好的性能。当以再发心肌梗死为结局进行模型构建时,模型共计纳入21个特征,其_2F-score、G-means、灵敏度分别达到0.6338、0.8035、symbiotic cognition0.7714,其特征重要性排序位列前五位的特征分别为外周血管病史、既往PCI/CABG、年龄、吸烟、高同型半胱氨酸血症。4、对ACS行PCI患者远期死亡风险的预测,没有占绝对权重的单一危险因素,其中肾小球滤过率估计值、年龄、左心射血分数、白蛋白、N端脑利钠肽前体这五个特征对模型的影响相对较大。结论:1、通过对辽宁省县级医院ACS行PCI患者基线特征和三年随访结果的分析,深入了解县级医院患者临床特征与预后关系。本研究的实施可以为辽宁省县级医院胸痛中心的建设和发展提供因地制宜的客观依据。2、联合应用RFE和弹性网络回归两种特征筛选策略,构建的模型在性能上优于单一特征筛选策略。应用SMOTE+ENN混合采样策略,构建的模型在性能上优于无数据增强策略和单纯应用上采样策略。本研究构建了可及时有效的识别辽宁省县级医院死亡风险高的ACS行PCI患者模型。3、通过权重系数将代价敏感学习引入集成算法,并通过焦点参数使模型可以重点关注位于决策边界的难分类样本,实现模型性能在不平衡数据下的显著提升。当以再发心肌梗死为结局事件时,特征重要性排序位列前五位的特征分别为外周血管病史、既往PCI/CABG、年龄、现状吸烟、高同型半胱氨酸血症。模型有助于在不改变数据分布的前提下及时识别辽宁省县级医院ACS行PCI病患不良预后易感群体。4、基于合作博弈论的SHAP可解释性框架能够赋予本研究构建的机器学习模型可解释性,辅助医务工作者为患者个体提供“私人定制”的精准诊疗策略。当以远期全因死亡为结局事件时,特征重要性排序位列前五位的特征分别为肾小球滤过率估计值、年龄、左室心射血分数、白蛋白、N端脑利钠肽前体。模型能够为辽宁省县级医院ACS行PCI患者的早期干预提供科学的临床依据,对不良预后的改善具有一定的科学价值。

牛海绵状脑病(BSE)又称疯牛病,其主要病因是朊蛋白发生异常折叠并不断累积在脑部从而引起神经元和神经纤维出现异常变形和退化,最终引发牛行为和协调障碍并导致死亡,其高度传染性和致死性对牛产业和人类健康造成了重大威胁。朊蛋白由PRNP基因编码,被认为是BSE的主效基因之一,已有大量研究表明PRNP的变异与BSE易感性(抗性)增加高度关联,尤其是启动子中23bp和第一内含子上12bp的插入/缺失(Indel)与BSE的风险密切相关。然而,PRNP并不是唯一与BSE有关的基因,已有大量研究表明BSE的发生还可能受到其他基因的影响和调控,但基因指向不清晰。为进一步系统全面筛选到提高BSE抗性、影响和控制BSE的新基因及其分子标记,降低BSE威胁并提高牛品质。我们首先巧妙地选择了大量集中屠宰且可以免费获取样品的迪庆牛为研究对象,在云南迪庆州香格里拉市采集了921头黄牛样品,分析其mtDNA和SRY基因序列后进一步遴选出655头迪庆牛,分析测定其PRNP基因23bp和12bp Indel多态;然后对迪庆牛PRNP基因23I-12I和23D-12D这2种单倍型的各12个延髓样品开展了mRNA和miRNA测序,构建与解析这2种不同单倍型的mRNA和miRNA分子调控网络;最后对筛选到的关键基因以斑马鱼为模式动物采用CRISPR/Cas9技术开展基因敲除等功能验证,主要结果如下:1.迪庆牛鉴定及其PRNP基因多态性分析检测了921头黄牛的mtDNA D-loop区,构建邻接(NJ)进化树筛选出655头迪庆牛,对其中的591头公牛克隆了SRY基因编码区并绘制中介网络图,筛选同一父系起源的迪庆牛。然后鉴定了迪庆牛PRNP基因的23bp和12bp Indel多态性,23bp Indel基因型频率分别为0.162(I/I)、0.586(I/D)和0.252(D/D),等位基因频率为0.455(I)和0.545(D);12bp Indel基因型频率为0.657(I/I)、0.305(I/D)和0.038(D/D),等位基因频率为0.809(I)和0.191(D);23I-12I、23D-12D、23I-12D和23D-12I单倍型频率分别为0.433、0.168、0.022和0.377,发现这4种单倍型特别是23I-12I和23D-12D相对均衡,特别适合下一步研究开展。2.PRNP基因不同单倍型下mRNA和miRNA分子调控网络的构建与解析挑选了性别和年龄均一的23I-12I和23D-12D两个单倍型的迪庆牛各12头,对其延髓样品进行mRNA和miRNA测序,mRNA测序共获得23,031个表达基因,108个属于差异表达基因,其中,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)、核氧化还原蛋白样蛋白2(NXNL2)、趋化因子CXC配体13(CXCL13)等50个基因上调;环核苷酸门控阳离子通道蛋白CNG-1β(CNGB1)、载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物2(APOBEC2)和磷酸二酯酶1C(PDE1C)等www.selleck.cn/products/carfilzomib-pr-17158个基因下调。miRNA测序鉴定出42个差异miRNAs,其中bta-miR-1246、bta-miR-196b、bta-miR-211等24个上调;bta-miR-122、bta-miR-219、bta-miR-2316等18个下调。此外,mRNA-miRNA联合分析发现42个差异miRNA在Target Scan、miRWalk两个数据库中共预测出18647个靶向基因,随后将这些靶向基因与转录组测序获得的108个差异表达基因进一步开展分析,发现APOBEC2、PDE1C、PCDH19等52个差异表达基因与bta-miR-122、bta-miR-211等12个差异表达miRNAs存在靶向关系。以PRNP基因为基础构建了差异表达基因之间的蛋白互作网络(PPI),采用最大团中心性(MCC)、最大领域分量密度(DMNC)和最大领域分量(MNC)等5种算法,筛选到肌球蛋白重链2(MYH2)、原钙粘蛋白19(PCDH19)、肌球蛋白轻链2(MYL2)、转化受体电位阳离子通道亚家族V成员6(TRPV6)、瘦素受体(LEPR)、驱动蛋白家族成员12(KIF12)、CDKN2B、C型凝集素结构域家族5成员A(CLEC5A)、环核苷酸门控阳离子通道1β(CNGB1)和动力蛋白轴丝重链11(DNAH11)这10个候选基因;进一步使用机器学习算法缩小并锚定到PCDH19、MYL2、TRPV6、LEPR、CDKN2B、CNGB1、DNAH11这7个关键基因;随后构建了这7个关键基因与牛转录因子(TFs)的共表达调控网络,开展了这7个关键基因与剩余的101个差异表达基因单基因的基因集富集分析(GSEA)及GO和KEGG富集,发现在TF-mRNA调控网络中PCDH19基因具有最多转录因子结合位点且高达74个,并富集到751个GO术语和79条KEGG通路,还关联到帕金森病相关的通路;最后发现在23D-12D单倍型组内,PCDH19正向调控了PRNP,相关系数为0.43,但二者的表达量差异显著(P<0.05),表明PCDH19可能作为PRNP不同单倍型内分子调控网络的核心基因。3.抗BSE相关新基因的分子克隆及功能验证通过实时荧光定量PCR测定8个差异表达基因(PRNP、APOBEC2、PCDH19、PDE1C、DCX、BNC2、BCO2和OR9Q2)和5个差异表达miRNA(bta-miR-2316、bta-miR-211、bta-miR-449a、bta-miR-196b和bta-miR-122)的表达量,对比mRNA和miRNA测序结果均得到了相同的表达趋势。利用双荧光素酶报告基因的靶向试验证实了bta-miR-196b、bta-miR-2368-3p负调控PRNP,bta-miR-196b负调控PCDH19,bta-miR-122、bta-miR-499a负调控APOBEC2,bta-miR-211负调控PDE1C,过表达的miRNA能够靶向抑制目标基因的表达。为进一步确认PCDH19的功能,我们挑选了PRNP基因中23I-12I和23D-12D单倍型的各52个样本(已包含上述各12个转录组测序样本),克隆了PCDH19基因5’调控区约2300bp序列,找到了6个SNPs位点,分别为-1597A>G、-1495G>T、-1415C>G、-923A>C、-855C>T和-176C>T,它们构成了12个单倍型,其中,GTCACC在2组中为优势单倍型(23I-12I组中频率为0.297,12D-23D组中频率为0.338),单倍型AGCACT的频率在23I-12I组中为0.150,在12D-23D组中为0.047,单倍型AGGATC频率在23I-12I组中为0.058,12D-23D组中为0.0001,频率均差异显著(P<0.05)。最后我们使用CRISPR/Cas9技术敲除了斑马鱼PCDH19基因5’调控区1400bp片段,观测斑马鱼胚胎受精后20小时(hpf)、30 hpf、48 hpf和72 hpf时间段的脑部发育状况并检测相关基因表达量,结果显示基因敲除成功并获得杂合突变体PCDH19~(+/-),与野生组相比,各时期的PCDH19基因mRNA表达均下调,其中20 hpf和72 hpf差异不显著(P>0.05),但30 hpf(P<0.01)和48 hpf(P<0.05)差异显著。同时对7个关键基因(PRNP(PRNPa和PRNPb)、MYL2a、TRPV6、LEPR、CDKN2B、CNGB1a、DNAH11)进行了q RT-PCR验证,发现它们在不同发育时期的表达量均存在差异,特别是CDKN2B基因在上述4个时期均在敲除后高表达且差异极显著(P<0.01);此外,敲除PCDH19基因的斑马鱼在胚胎发育早期(30 hpf),其大脑前神经板区出现了形态破坏,再次证实了PCDH19基因在前神经板的正常发育和形态维持中具有重要作用。综上所述,本文首次以牛PRNP基因不同单倍型为组别,进行了mRNA和miRNA测序,构建了以PRNP基因为基Fecal microbiome础的分子调控网络,筛选出可能与BSE相关的PCDH19、MYL2、TRPV6、LEPR、CDKN2B、CNGB1和DNAH11这7个基因和bta-miR-219、bta-miR-2316、bta-确认细节miR-211等8个miRNAs,随后通过双荧光素酶报告基因技术和CRISPR/Cas9技术进一步发现PCDH19基因极有可能参与黄牛BSE的调控。总之,本文系统全面发掘了影响BSE的基因,获得了可能在BSE中起关键作用的新基因,该结果对降低潜在的BSE威胁和提高牛品质具有重要的理论意义和实践价值。

聚丙烯、硅橡胶等高分子材料具有化学惰性好、易加工以及价格低廉等特点,广泛应用在人类生活的方方面面。然而,由于细菌易在聚合物表面附着从而大量繁殖,严重限制了其应用。因此,开发抗菌材料赋予聚合物抗菌性能受到了学者和市场的青睐。铜基纳米材料作为一种新型抗菌剂具有广谱抗菌特性,然而纳米级铜基材料由于表面能高、易团聚等问题,导致抗菌semen microbiome性能下降。基于此,本文采用二氧化硅作为载体,将铜基纳米材料(纳米铜、纳米氧化铜)负载于二氧化硅的表面,开展了二氧化硅负载抗菌粉体及其抗菌聚合物的制备及性能研究,系统考察了材料的抗菌性能、力学性能和热稳定性。主要内容和结果如下:1.氨基功能化二氧化硅负载纳米铜的制备及其在聚丙烯中的应用本章以氨基功能化的二氧化硅为载体,硫酸铜为铜前驱体,水合肼为还原剂,利用氨基和铜离子形成铜氨络合物,通过液相原位沉积技术制备了二氧化硅负载铜纳米粉体。研究了Cu~(2+)浓度、N_2H_4·H_2O与Cu~(2+)摩尔比、p H、温度等条件对粉体材料形貌和沉积量的影响;研究了二氧化硅负载铜/聚丙烯复合材料中纳米粉体添加量对复合材料的抗菌性能、Belnacasan体内力学性能和热稳定性能的影响。结果表明:在70°C、p H为10和N_2H_4·H_2O与Cu~(2+)摩尔比为1:1条件下,改变铜离子添加量可制备出铜负载量为3.33 wt%、2.55 wt%、1.79 wt%的系列样品。二氧化硅负载铜纳米粉体抗菌测试显示铜浓度为0.895μg/m L时,杀菌率为99.99%,其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)所对应的抗菌剂铜浓度分别是0.042 mg/m L和0.666 mg/m L。复合材料的抗菌性随着抗菌纳米粉体添加量的增加逐步提高,6 wt%和8 wt%添加量下杀菌率分别为96.99%和99.00%,符合塑料Ⅱ型和Ι型标准(杀菌率≥90%和≥99%);拉伸强度逐渐降低,断裂伸长率先增大后减小,在6 wt%的添加量下,断裂伸长率为336%;复合材料的热分解温度,在添加量为8 wt%时提高了10°C。2.氨基功能化二氧化硅负载纳米氧化铜的制备及其在聚丙烯中的应用与纳米铜相比,氧化铜稳定性高,生产成本低,为了进一步考察氧化铜和铜的抗菌差异性,本章将负载铜离子的二氧化硅粉体经过高温煅烧成功制备了高负载量的二氧化硅负载氧化铜纳米粉体。研究了煅烧温度对Cu O晶型和分布影响,考察了二氧化硅负载纳米氧化铜的添加量对复合材料的抗菌性能、力学性能和热稳定性能的影响。结果表明:800°C下煅烧2 h可得到二氧化硅负载纳米氧化铜颗粒。二氧化硅负载纳米氧化铜粉体抗菌测试显示氧化铜浓度为1.665μg/m L时,杀VE-822 MW菌率为98.01%,其MIC和MBC所对应的氧化铜分别是0.083 mg/m L和2.664 mg/m L。复合材料抗菌性随着二氧化硅负载氧化铜样品添加量逐渐提高,8 wt%添加量杀菌率可达到97.41%,符合塑料П型标准;拉伸强度逐渐降低至10.06 MPa,断裂伸长率先增大后减小,6 wt%添加量下的断裂伸长率为345%;8 wt%添加量下复合材料的热分解温度提高了8°C。总体而言,二氧化硅负载氧化铜粉体和负载氧化铜复合材料的抗菌性略低于二氧化硅负载铜粉体及其复合材料。3.双键和氨基共修饰二氧化硅负载纳米铜的制备及其在硅橡胶中的应用抗菌硅橡胶同样具有较好的市场前景。考虑到双键改性二氧化硅有利于改善硅橡胶力学性能,本章在前文工作基础上,利用氨基和双键共修饰的二氧化硅为载体,制备了二氧化硅负载铜纳米粉体样品。研究了N_2H_4·H_2O与Cu~(2+)摩尔比、反应时间对二氧化硅负载铜纳米粉体晶型及分布的影响,测试了粉体抗菌性能、复合材料的抗菌性能、力学性能和热稳定性能。结果表明:水合肼和铜离子摩尔比值为3,反应时间为0.5 h,温度为70°C,p H=10时可制备出二氧化硅负载铜纳米粉体。二氧化硅负载铜粉体抗菌测试显示铜浓度为0.895μg/m L时,粉体杀菌率为99.99%,其MIC和MBC所对应的铜浓度分别是0.042 mg/m L和0.666 mg/m L。复合材料的抗菌性随着二氧化硅负载铜纳米粉体添加量的增加逐渐提高,粉体添加份数15份时杀菌率为和99.99%。添加份数≤15份,复合材料热稳定性,拉伸强度和断裂伸长率变化和空白复合材料相差不大,添加份数超过15份时,该性能逐渐下降。综合分析,在二氧化硅负载铜样品添加份数为15份时,复合材料的抗菌性能、力学性能和热稳定性能最佳。

目的：探讨老年性Biotin cadaverine白内障超声乳化术后使用重组人表皮生长因子滴眼液联合自体血清方案的疗效。方法：回顾性分析110例老年白内障超声乳化术后出现干眼症的患者资料，根据患者治疗情况分为对照组(n=55)和观察组(n=55),2组患者均接受重组人表皮生长因子治疗，观察组加用自体血清。于治疗前后对比患者泪膜厚度、泪膜稳定性[基础泪液分泌试验(SIT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素获悉更多染色评分(FL)]、泪液氧化应激指标[白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)、丙二醛(MAD)、脂质过氧化物(LPO)]、眼部修复指标[血管内皮生长因子(VEGF)、色素上皮衍生因子(PEDF)]水平差异，评价临床Telaglenastat疗效，统计眼部不良反应发生情况。根据患者干眼严重程度进一步分层分析不同治疗方案在轻、中、重不同严重程度患者中的效果差异。结果：观察组泪膜厚度、SIT、BUT高于对照组(P<0.05);观察组FL低于对照组(P<0.05);观察组IL-1β、IL-8、MAD、LPO低于对照组(P<0.05);观察组VEGF低于对照组(P<0.05);观察组PEDF高于对照组(P<0.05);观察组总有效率高于对照组(P<0.05);分层分析结果显示，重组人表皮生长因子滴眼液联合自体血清对于不同严重程度患者均有良好的疗效。结论：重组人表皮生长因子滴眼液联合自体血清可改善老年性白内障超声乳化术后干眼症患者干眼症状，提高泪膜稳定性、增加泪膜厚度、抑制炎症和应激反应、修复眼部损伤。

目的：基于网络药理学方法探讨玉屏风散治疗过敏性紫癜(HSP)的作用机制。方法：利用TCMSP、Pubchem、Swiss target prediction等数据库平台，对玉屏风散的有效活性成分和有效靶点基因进行检索、收集和筛选。通过Genec寻找更多ards、Disgenet、OMIM数据库查询和挖掘HSP的相关基因和玉屏风散治疗HSP的交集靶点，STRING数据库和Cytoscape 3.9.1软件构建活性-成分-靶点可视化网络和可视化分析。运用DAVID数据库进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果：筛选出45个玉屏风散活性成分，212个药物靶点，294个疾病靶点和35个交集靶点，对关键靶点进行蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络构建，涉及的主要基因有肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6、血管内皮生长因子A、白细胞介素-1β、肿瘤蛋白p53、基质金属蛋白酶-9、趋化因子c-c配体2、白细胞介素-10、丝氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子、CXC趋化因子配体8等。GO功能富集分析得到条目数337个，其中生物过程条目284个，分子功能条目35个，细胞组成条目22个。KEGG通路富集分析得到信号通路101条，主要涉及高级糖基化终末产物-受体信号通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化信号通路、脂质和动脉硬化信号通路Ferroptosis抑制剂、疟疾信号通路、白细胞介素-17信号传导通路、TNF信号通路、核因子-κB信号通路等。结论：玉屏风散可能通过多成分、多靶点eye tracking in medical research、多通路治疗HSP。