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目的:本研究旨在探讨2型糖尿病患者肾损伤指标与动态动脉硬化指数(Ambulatory arterial stiffness index,AASI)的相关性。方法:收集2017年9月-2022年9月就Hepatic fuel storage诊于新疆医科大学第一附属医院且完善肾脏穿刺组织学检查患者1671例,严格纳排后最终选择出85例患有2型糖尿病患者,依据病理结果分为糖尿病肾病(Diabetic Kidney Disease,DKD)和非糖尿病肾病(Non-Diabetic KQ-VD-Ophidney Disease,NDKD)组,回顾性搜集研究对象相关指标,所有指标用SPSS27.0进行统计学分析。结果:1.入组的85例糖尿病合并肾损伤患者中,DKD组患者占41.2%(35/85),DKD组患者糖尿病病程、血肌酐、24小时蛋白定量、ACR、24小时尿微量白蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、AASI高于NDKD组,血红蛋白、BMI、血细胞比容、eGFR、甘油三酯、血尿素氮低于NDKD组,且差异均存在统计学意义(P<0.05)。2.DKD组患者AASI值大于NDKD组(0.53±0.14vs0.45±0.15)差异存在统计学意义(P<0.05),多元线性回归分析结果提示:BMI、空腹血糖是AASI的影响因素。3.2型糖尿病患者肾损伤指标与AASI无明显相关关更多系(P>0.05)。4.ROC曲线分析:曲线下面积为0.661,AASI的截断点为0.515,即当AASI≥0.515时,2型糖尿病合并肾损伤患者为DKD的可能性较高。结论:DKD组患者动脉硬化程度较NDKD组患者重,2型糖尿病患者肾损伤指标与AASI无明显相关关系。

80只30日龄的新西兰肉兔随机分为4组：空白组(0%霉变玉米+15%正常玉米),低剂量组(5%霉变玉米+10%正常玉米)、中剂量组(10%霉变玉米+5%正常玉米)和高剂量组(15%霉变玉米+0%正常玉米),20只/组。于试验的第42天心脏采血、摘取肾脏。ELISA法检测饲料中AFimmune geneB1、ZEN、DON的含量；HE染色观察肾组织病理学变化；生化试剂盒检测血清中BUN、Cr、UA的水平及肾组织中MDA、NO、T-AOC、CAT、GSH-P3-MA采购x的含量；qPCR检测PI3K、HO-1、Nrf2、NQO-1 mRNA的表达水平。结果显示，空白组与低剂量组霉菌毒素未超标，中剂量组AFB1超标，高剂量组AFB1、ZEN超标。HE染色可见中、高剂量组肾小球呈分叶状，肾小管上皮细胞脱落，并伴有空泡变性。与空白组相比，中、高剂量组肾指数显著下降(P<0.05或P<0.01);中、高剂量组血清中BUN、UA、Cr水平及肾组织中MDA、NO水平显著升高(P<0.05或PSTM2457<0.01);中、高剂量组肾组织中CAT、GSH-Px、T-AOC含量及PI3K、Nrf2、NQO-1、HO-1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结果表明，霉菌毒素抑制了PI3K/Nrf2信号通路，降低了肾脏的抗氧化能力，导致肾脏氧化损伤。

目的 探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide, H_2S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenatselleckchem GSK2118436ion, H/R)损伤的影响，并阐明其相关作用机制。方法 H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细胞活力，荧光探针技术分别检测H_2S和活性氧(ROS)含量，生化试剂盒检测超氧化D-Lin-MC3-DMA配制物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率；Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶(cystathione-gamma-lyase, CSE)、细胞凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Cyt c和Bcl-2)表达及信号通路相关蛋白(ERK1/2、Phospho-ERK1/2)活性。结果 与对照(Control)组相比，缺氧/复氧(H/R)组细胞活力、内源性H_2S含量CSE蛋白表达、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均明显降低；细胞凋亡率、MDA和ROS含量、Cyt c及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高；同时，磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)活性明显降低。与H/R比较，H/R+NaHS(外源性H_2S供体)逆转了H/R对上述指标的影响。另外，Multi-functional biomaterialsPD98059(ERK1/2抑制剂)减弱了NaHS对磷酸化ERK1/2的作用。结论 肾小球系膜细胞H/R损伤与内源性CSE/H_2S系统下调有关；外源性H_2S通过上调ERK1/2通路抑制氧化应激和细胞凋亡，减轻肾小球系膜细胞H/R损伤。

目的:探讨USPs家族成员USP3在胆管癌中的作用,USP3可以通过促进胆管癌细胞的糖酵解激活Wnt/MYC途径,并通过与MYC结合抑制其泛素化水平,最终促进胆管癌的增殖和侵袭性转移。以证实USP3可能是胆管癌的潜在预后标志物,并能够调节癌细胞的生存和侵袭性,有望成为治疗胆管癌的一个新的分子靶点。方法:选取2015年7月至2022年5月在海南医genetic ancestry学院第一附属医院采集临床样本,共采集45对胆管癌组织和相应的正常组织。所有的手术标本都被冷冻并储存在-80℃下进行进一步的RNA和蛋白质分析,并嵌入蜡块中进行后续的IHC实验。统计学分析:使用Graph Pad Prism 8.0(Graph Pad Software,La Jolla,CA,USA)分析并呈现数据。使用SPPS-341体内实验剂量SS软件构建Kaplan-Meier生存曲线。通过t检验分析两组之间的统计差异,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1)USP3高表达的胆管癌患者预后较差,两种胆管癌细胞中USP3的表达均高于正常胆管上皮细胞。2)敲除USP3表达可显著抑制胆管癌细胞的增殖能力和侵袭与迁移能力。3)敲除USP3后,肿瘤代谢中的糖酵解途径发生了显著改变,胆管癌细胞的葡萄糖摄取显著降低。此外,胆管癌细胞中的乳酸浓度和ATP浓度亦显著降低。因此,降低USP3的表达水平可以显著降低肿瘤细胞的糖酵解能力,GLUT1、HK2、PDM2和LDHA靶基因的表达下调。4)裸鼠成瘤实验,与对照组相比,USP3基因敲除后癌细胞的增殖能力显著降低,皮下成瘤实验显示肿瘤体积和肿瘤重量均显著减少。实验组的增殖相关指数Ki67、PCNA、GLUT1、HK2、PKM2和LDHA显著降低。5)USP3过度表达,MYC的泛素化水平显著增加,而USP3敲低或过度表达后MYC m RNA没有显著变化。USP3显著激活了Wnt/MYC信号通路的活性,促进了Cyclin D1、c-Myc、VEGF和Survivin的m RNA表达。6)敲除MYC或添加MYC抑制剂逆转了USP3过表达诱导的胆管癌细胞增殖和侵袭性转移。,USP3的过表达可以促进细胞内葡萄糖摄取和乳酸生成,并促进细胞内糖酵解,该过程可以通过敲除MYC或添加抑制剂来逆转。类似地,观察到细胞内产生的ATP也有相同的趋势,其主要代谢相关靶基因GLUT1、HK2、PKM2和LDHA的m RNA水平在USP3过表达后IACS-010759上调,而在MYC敲除或添加抑制剂后下调。结论:USP3高表达的胆管癌患者预后较差,降低USP3表达可显著抑制肿瘤细胞的增殖能力和侵袭与迁移能力。敲除USP3基因后,胆管癌细胞的葡萄糖摄取显著降低,表明USP3促进肿瘤细胞的糖酵解,提高能量生产,上调肿瘤内代谢GLUT1、HK2、PDM2和LDHA靶基因的表达,从而促进肿瘤生长。

[目的]慢性肾病(Chronic kidney disease,CKD)、非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholic steatoheGNE-140半抑制浓度patitis,NASH)等代谢综合疾病人数呈上升态势,但是目前临床用药十分有限。凋亡信号调节激酶1(Apoptosis Signal Regulating Kin ase 1,ASK1)是MAPK信号通路中受应激因素激活的MAP3K激酶,并引发下游的炎症、凋亡等生物效应。本研究拟使用ASK1抑制剂CS17919探究其在慢性肾病和非酒精性脂肪肝中的药效作用。[方法]通过高通量筛选得到本次研究的ASK1抑制剂CS17919。体外率selleck AY-22989先完成ASK1酶学抑制活性实验后,细胞实验使用油酸(OA)和棕榈酸(PA)分别对L02进行刺激,然后添加CS17919进行共培养,CTG法检测其对细胞的保护作用,同时转录组学检测其对相关基因的调控。进—步实验将CS17919与多种细胞系共培养验证细胞毒性。体外细胞验证后,在酶学层面和体内验证CS17919的代谢稳定性,并通过药代数据确定药效模型的给药方式和剂量。体内药效部分采用3种动物模型进行验证,分别为高脂饲料结合CCL4的NASH模型、输尿管结扎肾间质纤维化(UUO)模型、STZ诱导新生小鼠糖尿病肾病(DKD)模型,通过血液生化指标、组织病理学等与临床相关的指标评价药效。[结果]体外ASK1激酶活性抑制确定其半抑制浓度(IC50)为22.24nM,且其抑制活性与进入临床阶段的ASK1抑制剂Selonsertib(GS4997)相当。L02细胞在CS17919的保护下减弱了OA、PA的刺激作用,而不同浓度(1μM、3μM、10μM)CS17919对细胞的毒副作用均低于GS-4997。RNA-seq转录组学发现CS17919对压力因素或应激因子相关RNA的表达进行了调控。后续与人肾、肝、肺胚细胞共孵肓未见明显的活性抑制现象。CYP1及CYP2酶抑制活性IC50均大于10μM,CYP3A4提示存在低风险的药物相互作用。肝微粒体和血浆稳定性确定CS17919在体内能够稳定存在。体内药代动力学研究结果表明CS17919在50-80mg/kg剂量下吸收达到饱和,且确定肝脏和肾脏中药物分布较高可作为药效的靶器官。体内药效方面,CS17919改善了肾病模型中的血液尿素氮、肌酐水平,在糖尿病介导的肾小球损伤模型中改善了肾小球的硬化指数,提高了肾脏的滤过率功能。在非酒精性脂肪肝模型中CS17919治疗降低了肝损相关的转氨酶指标,同时改善了血脂水平,组织病理Normalized phylogenetic profiling (NPP)中可看到炎症和纤维化水平得到了显著的改善。[结论]CS17919作为新型的ASK1酶学研究证实其为特异性ASK1抑制剂,在细胞学层面可以降低外部病理因素带来的细胞损伤。进—步的体内研究发现其具有良好的代谢稳定性。在3种体内模型中CS17919均表现出了积极的治疗作用,表明CS17919在慢性肾病和非酒精性脂肪肝上具有积极的治疗前景。

目的通过观察芪蛭益肾方对原发性膜性肾病高凝状态气虚血瘀证的疗效,进一步研究芪蛭益肾方对原发性膜性肾病高凝状态病变防治的安全性,对预防患者血栓栓塞的发生、提高预后水平、减少药物毒副作用及提高生命质量等有着重大作用,并提供理论依据于临床治疗及临床推广应用。方法1.选取2021年12月至2022年11月就诊于山西省中医药研究院肾病一科且符合中、西医纳入标准的90例门诊及住院部患者。选用随机对照的办法,将其分为对照Bacterial cell biology组及治疗组。2.两组予以基础治疗联合醋酸泼尼松龙片+环孢素软胶囊标准疗程治疗,嘱患者晨起口服醋酸泼尼松龙片0.5 mg/(kg·d),每日1次,进服环孢素软胶囊3mg/(kg·d),分早晚两次空腹进服。对照组选用双嘧达莫,治疗组在对照组基础上加服中药免煎剂芪蛭益肾方。观察时间均为12周。3.观察两组患者的24小时尿蛋白定量(24h UTP)、血浆白蛋白(ALB)水平、血脂水平(总胆固BI 10773醇(TCH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL))、凝血指标(活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB))、D-二聚体(DD)、血小板计数(PLT)及中医证候积分,进行统计学数据分析及安全性评价。结果1.本研究结束后,观察两组患者24h UTP、ALB、PLT、DD、凝血指标(APTT、FIB、PT)、血脂水平(TCH、TG、LDL)较治疗前均得到改善(P<0.05)且治疗组优于对照组(P<0.05),另外,治疗组中的24h UTP、TCH的下降水平显著优于对照组(P<0.01)。2.本次试验结束后,观察到治疗组及对照组的中医证候积分均有所下降(P<0.01),且治疗组在治疗后的证候积分优于对照组(P<0.05)。3.试验结束后,通过观察两组患者治疗前后的中医证候总有效率,将其进行对比,对照组为74.41%,治疗组为90.91%,治疗组明显优于对照组,具有显著统计学差异(P<0.01)。4.本次试验结束后,通过对治疗后的两组临床总有效率进行比较,对照组是72.09%,治疗组是93.18%,治疗组明显优于对照组(P<0.01)。5.本次试INCB28060细胞培养验研究结束后,对照组及治疗组患者的基本生命体征平稳,肝肾功能等安全指标未出现有明显异常,仅对照组中的2例患者在治疗初期有头晕及轻微头痛症状。结论1.芪蛭益肾方适用于治疗原发性膜性肾病高凝状态气虚血瘀证患者,不仅能够改善凝血功能,减轻激素的毒副作用,在治疗高凝状态的同时亦可降低蛋白尿,显著缓解临床症状。2.芪蛭益肾方在治疗原发性膜性肾病高凝状态气虚血瘀证患者中没有出现不良反应,说明其疗效确切,方法安全。

目的：探讨赤芍总苷（TPG）对糖尿病肾脏病（DKD）大鼠肾纤维化的改善效果及可能作用机制。方法：从60只雄性Wistar大鼠中随机选择10只作为对照组，剩余50只大鼠利用尾静脉注射链脲佐菌素（55 mg/kg）诱导DKD大鼠模型。成功建模43只，随机选择40只并随机分为模型组、TPG低剂量组、TPG高剂量组及二甲双胍组，每组10只。各给药组分别灌胃给予相应药物，模型组和对照组灌胃给予等体积生理盐水，连续给药12周观察大鼠一般状态，计算肾脏指数（KI）；采用ELISA法测量24 h尿白蛋白（Alb）含量；采用生化分析仪检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平；HE染色观察肾脏组织形态学变化；高碘酸-希夫（PAS）染色观察系膜基质、基底膜组织学变化；Masson染色观察胶原蛋白沉积情况；采用比色分析法检测大鼠肾组织中氧化应激因子丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性；采用Western blotting法检测总转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、核Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）的相对表达量。结果：成功构建DKD大鼠模型；模型组大鼠一般体征失常，肾组织出现明显病理变化，肾组织结构改变，炎症细胞浸润明显，肾小球系膜基质扩张、基底膜增厚，胶原蛋白过度沉积，Lapatinib MW肾纤维化严重。TPG低、高剂量组及二甲双胍组大鼠一般体征逐渐恢复正常，病理损伤逐渐好转，肾小球系膜基质范围减小、基底膜变薄，胶原蛋白沉积减弱，肾纤维化逐渐改善。模型组大鼠KI,24 h尿Alb含量，FBG、Scr、BUN，以及肾组织中MDA含量和α-SMA、FN蛋白相对表达量均高于对照组（P<0.05）；肾组织此网站中SOD活性、核Nrf2、HO-1蛋白相对表达量均低于对照组（P<0.05）。TPG低、高剂量组及二甲双胍组大鼠KI,24 h尿Alb含量，FBG、Scr、BUN，以及肾组织中MDA含量和α-SMA、FN蛋genetic screen白相对表达量均低于模型组（P<0.05）；肾组织中SOD活性、核Nrf2、HO-1蛋白相对表达量均高于模型组（P<0.05）。结论：TPG可改善DKD大鼠肾纤维化程度，其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

目的:了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株是否存在阿莫西林(Amoxicillin,AMX)持留菌;了解抗生素持留性在Hp耐药演化中的作用;探究Hp AMX不稳定耐药表型演化为稳定耐药表型的可能机制。方法:1.Hp AMX持留菌株的筛选和验证用改良琼脂稀释法(Modified Agar Dilution Method,MADM)从临床分离的Hp中筛选AMX持留菌,通过检测时间-杀菌曲线来确定其持留性。2.持留性在Hp对AMX耐药演化LGK-974纯度中的作用分别以相同AMX最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)的持留菌H443和敏感菌H568为亲本菌株,经体外11次不断增加浓度的AMX接触后,再次检测AMX的MIC。对获得的耐药克隆H443R与亲本菌株H443进行全基因组和转录组测序,并且通过vac A,atp D,hop B,hop C,met Q的RT-q PCR和检测细菌细胞内的ATP的含量验证转录组测序的结果,分析H443R菌株耐药性增Stroke genetics加的原因。3.Hp AMX稳定高水平耐药表型的演化及其基因突变的检测和分析以Hp经-80℃冻存后对AMX的MIC不同程度下降(不稳定耐药)的4株Hp菌株作为出发菌株,在不断增加AMX浓度的培养基上传代20～55代,筛选AMX稳定的高水平耐药克隆,检测耐药克隆的MIC,置于-80℃冻存3个月后再复苏,根据冻存后MIC是否下降判断其耐药性是否稳定。对AMX稳定耐药的克隆H390r和出发菌株H390进行基因组测序和分析。最后用外排泵抑制试验检测H390r和H390在含外排泵抑制剂时对AMX的MIC。结果:1.Hp AMX持留菌株的筛选和验证用MADM从Hp临床菌株中筛选出1株AMX-持留菌(H443),该菌株杀菌曲线具有双峰杀菌特征,证实了H443为持留菌。2.持留性在Hp对AMX耐药演化中的作用以AMX-敏感菌H568为亲本菌株,在含AMX浓度不断增加的琼脂平板上连selleckchem续传11代,第11代获得H568S(MIC 0.016mg/L)克隆,其敏感性与亲本菌株H568相似。然而,与以H568具有相同MIC的AMX-持留菌H443为亲本菌株,在含AMX浓度不断增加的琼脂平板上连续传11代,耐药性快速增加,第11代演化出低水平耐药菌株H443R(MIC 0.5mg/L),其AMX MIC高于亲本菌株的31倍以上。通过基因分析,与亲本菌株H443相比,H443R共有涉及16个基因的28个突变,其中包括与AMX耐药性相关基因pbp1a、fts I、hef C和hof H,基因表达高频可逆ON/OFF开关mod基因的突变。转录组结果显示,H443R与H443在多个KEGG富集途径上存在显著差异,其中H443R下调的基因显著富集于氧化磷酸化(与ATP产生有关)和核糖体,而H443R上调的基因显著富集于鞭毛组装、ABC转运、同源重组和错配修复,其中后两者涉及DNA错配修复程序。通过RT-q PCR验证vac A,atp D,hop B,hop C,met Q基因在H443R的表达均下调,与转录组测序结果一致。H443R细胞内的ATP水平显著低于H443。3.Hp AMX稳定高水平耐药表型的演化及其基因突变的检测和分析对4株AMX不稳定耐药的菌株通过AMX筛选获得4株对AMX稳定高水平耐药(MIC 12～256mg/L)的Hp克隆,分别记为H390r、H443r、H574r、H576r。H390r相比于亲本菌株H390存在多个基因的突变,包括与AMX耐药性相关的基因hef C、hop B、hop C和fts I。在不添加外排泵抑制剂时,H390r对AMX的MIC为≥256mg/L,在添加外排泵抑制剂时其MIC下降至12mg/L。而H390在有无外排泵抑制剂时对AMX的MIC均为0.5mg/L。结论:Hp临床菌株中存在AMX-持留菌;Hp持留性不是耐药性,但其可以通过体外连续的AMX接触较快的演化出AMX的耐药性,涉及的耐药突变基因与临床分离菌株获得的耐药突变基因相似;Hp AMX不稳定耐药表型通过在体外连续的AMX接触能演化出稳定高水平耐药表型,机制主要涉及药物外排。

格林-巴利综合征(Guillain-Barrésyndrome,GBS)是一种自身免疫介导的多发性神经病,其特征是四肢对称性无力,深腱反射减弱或消失。感染病原体,产生抗神经节苷脂抗体,引发体液免疫和自身免疫反应,是其主要的发病机制之一。神经系统症状的发作先于感染性疾病。格林-巴利综合征合并肾病综合征(Nephrotic Syndroselleckchem Tamoxifenme,NS)及非器官特异性自身抗体阳性相关报道少见,合并肾病综合征包括膜性肾病、微小病变型肾病、局灶节段性肾小球硬化(Focal segmental gloMedicines procurementmerulosclerosis,FSGS),合并非器官特异性自身抗体阳性主要为风湿免疫性疾病中的干燥综合征(Sj?gren’s syndrome,SS)、系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)、类风湿性关节炎。本文就格林-巴利综合获悉更多征合并肾病综合征及非器官特异性自身抗体阳性相关发病机制及治疗进展做一综述。

鞣花酸是一种植物多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎及抗微生物学等多种生物学功能。本研究旨在探究鞣花酸对顺铂暴露诱导的小鼠肾毒性的保护作用及潜在的分子机制。将C57BL/6小鼠随机分为溶剂对照组、顺铂模型组、鞣花酸1Smoothened Agonist研究购买00 mg/kg/day组、顺铂+鞣花酸25、50和100 mg/kg/day保护组。小鼠通过单次腹腔注射顺铂20mg/kg/day,连续给药2d,顺铂给药后1h,在所有含有鞣花酸的保护处理组,口服给药小鼠25、50或100 mg/kg/day的鞣花酸,顺铂模型组给药等剂量的溶剂对照,连续处理7 d;溶剂对照组给予等剂量的溶剂处理。在最后一次给药12 h后,小鼠血液和肾脏组织被收集,血清尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)被分析,肾脏组织被获悉更多用于组织病理学、蛋白和基因表达检测。结果发现,与对照组相比,顺铂暴露显著上调小鼠血清BUN和CRE水平,肾脏组织发生明显的肾小管坏死、脱落及管型结构形成,并可见一定的炎症细胞浸润。鞣花酸补充后可剂量依赖性的降低血清BUN和CRE水平,同时显著改善顺铂暴露诱导的小鼠肾脏病理学损伤。进一步的,鞣花酸补充可显著降低小鼠肾脏组织中丙二醛(MDA)水平,显著升高超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,从而显著改善顺铂暴露诱导的小鼠肾脏氧化应激损伤。通过qRT-PCR和Western BlotNew microbes and new infections技术进一步证明了鞣花酸补充能够显著激活Nrf2/HO-1信号通路,同时显著抑制TGF-β/NOX4信号通路。总之,通过上述研究,我们的结果证实了鞣花酸补充能够通过同时激活Nrf2/HO-1信号通路和抑制TGF-β/NOX4信号通路改善顺铂暴露诱导的小鼠肾脏氧化应激损伤。