目的研究γ射线辐照后辐射旁效应对HepG2细胞的影响,探讨In Situ HybridizationAKT参与调控辐射诱导辐射旁效应的相关机制。材料和方法实验采用人肝癌HepG2细胞,利用转移辐射条件刺激液模式建立辐射诱导的细胞旁效应模型,用0.5、1、1.5、2μmol·L-1MK2206抑制AKT。实验分组为:空白组(NC组)、辐射旁效应组(ICM组)、辐射旁效应+MK2206组(ICM+MK2206组)、单纯辐照组(IR组)。MTT法检测细胞存活率;生长曲线实验检测细胞增殖能力;微核实验检测细胞内微核形成数;流式细胞仪检测细胞凋亡;用微板法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;用活性氧试剂盒检测细胞内活性氧水平;荧光分光光度法测定线粒体膜电位(MMP);Western blot检测AKT、p-AKT、Nrf2、HO-1、Bax、Bcl2、Cleaved-caspase3蛋白表达水平。结果 (1)2μmol·L-1MK2206作用HepG2细胞24、48、72小时,与空白组相比,细胞存活率降低(P<0.05);与ICM组相比,ICM+MK2206组细胞存活率明显下降(P<0.05)。(2)与空白组相比,辐射旁效应组、IR组细胞生长速度、SOD活力、线粒体膜电位降低,细胞内ROS、MDA含量、微核形成数、细胞凋亡率升高(P<0.05);与辐射旁效应组相比,ICM+MK2206组细胞的生长速度、SOD活力、线粒体膜电位降低(P<0.05),细胞内ROS、MDA含量、微核形成数、细胞凋亡率升高。(3)与空白组相比,辐射旁效应组、辐照组p-AGSK J4KT、Nrf2、HO-1、Bax、Cleaved-caspase3蛋白表达明显增加,IR组表达最高(P<0.05),Bcl2蛋白表达明显下降,辐照组表达最低(P<0.05)。与辐射旁效应组相比,ICM+MK2206组Bax、Cleaved-caLaduviglusib研究购买spase3蛋白表达明显增高,p-AKT、Nrf2、HO-1、Bcl2蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论 (1)辐射旁效应使细胞发生氧化损伤,细胞存活率、细胞内SOD活力、细胞增殖能力、线粒体膜电位降低,细胞内微核形成数,ROS、MDA含量升高。(2)辐射旁效应促使细胞发生凋亡,凋亡蛋白Bax、Cleaved-caspase3表达增加,激活PI3K家族DNA损伤修复蛋白ATM,ATM激活后,其调控的下游AKT被激活,辐射损伤以及辐射产生的ROS等损伤因子激活Nrf2,下游抗氧化酶HO-1表达增加,发挥抗氧化作用。(3)抑制AKT可抑制其调控的Nrf2表达。(4)ATM-AKT-Nrf2通路参与辐射旁效应的调控,抑制AKT导致DNA损伤修复受到抑制,加重细胞氧化损伤,提高细胞辐射敏感性,使细胞内微核率、凋亡率增加,细胞增殖受到抑制。