目的:验证布鲁氏菌是否诱导成骨细胞焦亡,并评估褪黑素对布鲁氏菌成骨细胞感染的抗焦亡作用,为褪黑素治疗布鲁氏菌性脊柱炎奠定理论基础。方法:(1)通过布鲁氏菌与成骨细胞共孵育构建布Timed Up and Go鲁氏菌成骨细胞感染模型。(2)裂解感染后的成骨细胞提取细胞全蛋白,通过免疫印迹实验(Western Blot)检测布鲁氏菌是否诱导成骨细胞焦亡相关蛋白表达上调;制备成骨细胞细胞爬片,与布鲁氏菌共孵育,固定后在扫描电子显微镜(SEM)下观察细胞是否发生了焦亡形态学变化。(3)通过CCK-8实验检selleck化学测布鲁氏菌对成骨细胞活力的影响;通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测布鲁氏菌感染是否导致成骨细胞发生膜破裂和细胞内容物释放。通过CCK-8实验、LDH释放实验、Western Blot实验综合评价褪黑素对布鲁氏菌感染成骨细胞的抗焦亡作用。结果:(1)布鲁氏菌可以入侵成骨细胞并在胞内繁殖,模型构建成功。(2)Western Blot实验结果显示,布鲁氏菌感染诱导成骨细胞焦亡相关蛋白表达上调;扫描电子显微镜下观察到布鲁氏菌感染的成骨细胞发生了细胞焦亡的形态学变化,证明布鲁氏菌感染导致成骨细胞发生了细胞焦亡。(3)CCK-8实验结果显示布鲁氏菌感染成骨细胞导致其点击此处活力下降;LDH释放实验结果显示布鲁氏菌感染成骨细胞诱导其发生膜破裂和细胞内容物释放。以上结果综合证明布鲁氏菌感染导致成骨细胞活力下降并诱导其发生了细胞焦亡,而褪黑素治疗可明显缓解上述变化。结论:布鲁氏菌感染导致成骨细胞活力下降并诱导其发生细胞焦亡,而褪黑素具备良好的抗布鲁氏菌感染引起的成骨细胞焦亡的作用,可为布鲁氏菌性脊柱炎的治疗提供新思路。