稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用

为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞，研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒（H7N购买GW48699 AIV）HA蛋白的细胞株，并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒（ADCML）活性的检测方法。结果显示成功包装了一株重组慢病毒，滴度可达10~8FU/mL；构建了稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的29NSC 127716核磁3T细胞株，HA蛋白主要在细胞膜上表达。基于新城疫病毒（NDV）载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡后，诱导产生的HA结合性IgG抗体滴度为2 180。以稳定细胞株为靶细胞，载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著persistent infection高于空载体与未免疫鸡血清（P<0.001）；补体灭活后，载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著降低（P<0.001）。研究表明，基于NDV载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡血清具有较强的ADCML活性，稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的细胞株可作为评价H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清Fc免疫效应的靶细胞。