结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC),作为我国最常见的癌症之一,其发病率及死亡率一直以来都位居恶性肿瘤前列。CRC产生除遗传因素外,还受生活方式(如抽烟、喝Blebbistatin采购酒、久坐等)、饮食习惯(高脂饮食、缺乏膳食纤维等)多种因素的影响。近年来社会发展导致我国国民生活作息的变动,也让CRC由50岁以上高发的老年患者逐渐向青年、中年群体转移。早期CRC可直接手术切除,但大多患者确诊CRC时已经处于中晚期,此时极易发生周围组织浸润和远处转移,因而常结合放疗用于术前术后照射提高疗效、清扫病灶周围淋巴结和晚期的姑息治疗。但由于CRC具有较高的辐射抗性,单纯放疗作用下降,严重影响了放疗患者的预后。丝切蛋白Cofilin-1作为ADF/Cofilin家族的一员,能特异性结合肌动蛋白丝并切割生成G-actin从而调节肌动蛋白动力学,由此通过重塑细胞骨架参与调节细胞。细胞骨架作为真核生物细胞中最广泛存在的细胞成分之一,参与多种生命活动,如细胞迁移、细胞增殖、周期调控、凋亡坏死、损伤修复等。已有实验报道人类部分恶性肿瘤细胞中Cofilin异常表达,且Cofilin-1参与了具有辐射抗性的癌细胞的DNA修复从而影响肿瘤患者放疗预后。但结直肠癌细胞辐射后的生物效应与Cofilin-1在其中发挥的作用仍不完全清楚。因此本研究以人结直肠癌细胞为主要研究对象,以Cofilin-1为目标,探究Cofilin-1对人结直肠癌细胞的辐射应答反应中的调节作用及可能的机制。目的:以Cofilin-1蛋白为研究切入点,通过cytochalasin D(以下简称cytoD)的Cofilin-1抑制调节作用,探究Cofilin-1在人结直肠癌细胞中辐射生物效应中的作用,从而为优化结直肠癌放疗方案和临床诊断治疗提供理论依据。方法:1.分别用 0.1(0.0134 Gy/min)和 2、4、6、8 Gy(1.02 Gy/min)剂量的 X射线辐照HCT116、HT29细胞,在照射后的24 h收集细胞,WB检测辐射对其Cofilin-1及其磷酸化蛋白的表达影响。2.通过CCK8法检测上述剂量X射线辐射下24 h后结直肠癌细胞的增殖能力。3.使用phNSC 119875aNucleic Acid Purification Accessory Reagentslloiding鬼笔环肽染色法检测结直肠癌细胞的骨架变化。4.采用γH2AX免疫荧光法检测结直肠癌细胞的DNA损伤水平。5.使用JC-1探针法检测结直肠癌细胞线粒体膜电位。6.通过DCFH-DA探针法检测辐照前后结…