目的:长期的紫外线照射会使皮肤发生光老化,导致体内胶原蛋白的断裂和合成减少,表现为皮肤干燥粗糙,最终形成皱纹。胶原蛋白多肽在被皮肤吸收利用后,可以合成胶原,起到抗衰老的作用。为了提高鹿皮胶原蛋白多肽(DCP)的皮肤渗透性和稳定性,制备鹿皮胶原蛋白多肽脂质体-水凝胶(DCPLIP-Gel),旨在提高皮肤光老化的保护作用。方法:采用酸提法提取鹿皮胶原蛋白(DC),利用比色法测定原料中DC的含量和收率,分别采用紫外分光光度法、红外分光光度法、SDS-PAGE、氨基酸组成分析对所提取的DC进行了表征研究。采用碱性蛋白酶酶解法提取了DCP,利用SDS-PAGE法进行了DCP的分子量测定,采用DPPH、ABTS自由基清除实Dorsomorphin使用方法验对DC及DCP的体外抗氧化活性进行了测定,采用CCK8细胞增殖实验测定了DCP对L929小鼠成纤维细胞的增殖活性,采用细胞划痕实验测定了DCP对L929小鼠成纤维细胞的迁移活性。采用薄膜水Drug Discovery and Development化法制备了鹿皮胶原蛋白多肽脂质体(DCP-LIP),采用透射电镜、马尔文粒径分析仪和透析等方法,对制备的DCP-LIP进行了表征研究,并应用表征的方法对DCP-LIP进行了体外释放和稳定性研究。制备了DCP-LIP-Gel,采用外观观察和扫描电镜对DCP-LIP-Gel进行了表征,利用Franz扩散池对DCP-LIP-Gel进行了皮肤渗透性研究,在体外L929小鼠成纤维细胞中进行了DCP-LIP-Gel体外抗光老化研究。采用UVB灯建立了光老化模型,在小鼠体内进行了DCP-LIP-Gel对皮肤光老化的保护作用研究。对DCP-LIP-Gel终制剂的稳定性进行selleck GDC-0068了探究,包括BCA蛋白测定法测定不同时间内多肽含量的变化,考察了DCP-LIP-Gel的物理稳定性、耐热、耐寒、离心稳定性。最后,对DCP-LIP-Gel的安全性进行了初步研究,包括急性经皮毒性试验、多次皮肤刺激性试验、皮肤变态反应试验。结果:采用酸提法提取的DC测得的收率为12.62±1.34%;通过紫外扫描测得的DC紫外吸收特征峰在234 nm处,符合Ⅰ型胶原蛋白的特征;通过红外分析测得的DC红外吸收存在酰胺A带、B带、Ⅰ带、Ⅱ带、Ⅲ带;SDS-PAGE凝胶电泳分析测得DC的分子量约为300 KD;氨基酸组成分析测得的DC含有丰富的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等。SDS-PAGE凝胶电泳测得的DCP的分子量小于14.4 KD;DPPH、ABTS自由基清除实验测得DCP具有显著的抗氧化活性;CCK8细胞增殖实验和划痕实验表明DCP具有促细胞增殖和迁移的活性。采用薄膜水化法制备的DCP-LIP包封率为88.25±3.48%。在透射电镜下呈现均匀的球形,粒径在100 nm左右,PDI小于0.3,Zeta电位显示带负电荷;稳定性结果表明,DCP-LIP在4℃下具有良好的稳定性。采用扫描电镜观察制备的DCP-LIP-Gel,结果表明脂质体-水凝胶为较大空隙的三维多孔网状结构,脂质体均匀分布在水凝胶基质中;体外释放结果表明,DCP-LIP和DCP-LIP-Gel在24 h之内的累积释放率分别为35.80%和28.03%;体外皮肤渗透实验结果表明,DCP-LIP和DCP-LIP-Gel中DCP的累积透皮率分别为24.32%和21.97%;体外抗光老化结果表明DCP-LIP可以显著抑制细胞内ROS的产生;小鼠皮肤光老化结果表明DCP-LIP-Gel对光老化具有保护作用;稳定性实验结果表明,DCP-LIP-Gel有良好的物理稳定性、化学稳定性、耐热、耐寒和离心稳定性;安全性实验结果表明,DCP-LIP-Gel无急性经皮毒性、无刺激性、皮肤变态反应阴性。结论:成功提取了DC和DCP,具有较高的抗氧化活性和细胞增殖活性;成功制备了DCP-LIP,具有较高的包封率和载药量,具有较好的体外释放和良好的稳定性;成功制备了DCP-LIP-Gel,具有良好的皮肤渗透性和稳定性,对小鼠光老化具有较好的保护作用,并且具有良好的安全性。