加味三仁汤对脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响

目的:观察加味三仁汤对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/核转录因子-κB(selleckchemNF-κB)信号通路的干预作用,探讨其改善免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠炎症病变的相关机制。方法:采用血清药理学方法,将大鼠分为加味三仁汤高、低剂量组,给药剂量分别为20.70,10.35 g·kg~(-1)·d~(-1),分别灌胃5 d后,采血制取含药血清。采用大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1),分为正常组,模型组(10 mg·L~(-1)脂多糖),贝那普利组(50 μmol·L~(-1)),加味三仁汤高、低剂量组。釆用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各组细胞培养上清液中IV型胶原(Col IV)的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Remedical grade honeyal-time PCR)法分别检测PI3K/Akt/NF-κB通路相关蛋白表达量和mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组肾小球系膜细胞增殖明显(P<0.01),Col IV分泌显著增多(P<0.01),p-Akt,p-p65蛋白表达增加(P<0.0selleck HPLC1);与模型组比较,加味三仁汤明显抑制细胞增殖(P<0.01)和Col IV分泌(P<0.01),影响Akt磷酸化水平(P<0.01),降低NF-κB p65阳性表达(P<0.01)。结论:加味三仁汤能够抑制脂多糖诱导的HBZY-1细胞增殖,降低Col IV蛋白含量,可能与其抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活密切相关。