目的:本研究通过建立敲入人源化M型磷脂酶A2受体1(PLA2R1)基因片段的大鼠模型,探究PLA2R1对肾脏形态和功能的影响,以期为进一步研究膜性肾病的发病机制及开发新的治疗方案开辟一条新的道路。方法:通过CRISPR/Cas9技术以及同源互补配对方法构建敲入人源化的PLA2R1基因片段的大鼠模型,利用PCR技术验证模型构建情况。将大鼠分为KI组和WT组,KI组为成功敲入人源化的PLA2R1基因片段的纯合子(KI鼠),WT组为野生型SD大鼠,每组6只,共12只,通过生化分析仪进行尿蛋白浓度和24 h尿蛋白含量测定,血清肌酐、尿酸、白蛋白、甘油三酯、胆固醇生化指标检测,采用HE染色、PAS染色、Masson染色观察肾组织病理表现,利用免疫荧光技术观察肾小球上Ig G、C3的免疫沉积及Nephrin的表达情况,通过电镜观察肾小球超微结构的改变,计量资料采用非参数检验进行统计学分析,来探讨PLA2R1基因片段对大鼠肾脏形态和功能的影响。结果:利用PCR技术成功筛选出敲入人源化PLA2R1基因片段的纯合子。WT组尿蛋白浓度中位数为51.5 mg/d L,KI组尿蛋白浓度中位数为14.95 mg/d L;WT组24 h尿蛋白含量中位数为10.637 mg,KI组24 h尿蛋vaginal microbiome白含量中位数为5.195 mg,KI组的尿蛋白浓度和24 寻找更多h尿蛋白含量均明显低于WT组,差异有统计学意义(P<0.05)。在血清学检测中,WT组与KI组甘油三酯中位数分别为2.02 mmol/L和1.46 mmol/L,两组胆固醇中位数分别为3.17 mmol/L和3.17 mmol/L,两组总蛋白中位数分别为69.1g/L和71.8 g/L,两组白蛋白中位数分别为34.8 g/L和35.3 g/L,两组尿素中位数分别为6.5 mmol/L和6.53 mmol/L,两组肌酐中位数分别为34μmol/L和37μmol/L,两组血清学生化指标检测相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HE、PAS、Masson染色两组均未出现炎症细胞的聚集,无糖原沉积,无纤维化形成。免疫荧光观察肾脏中补体C3和Ig G沉积,两组相比差异无统计学意义(P>0.05),KI组足细胞标志蛋白Nephrin表达量虽然与WT组差异无统计学意义(P>0.05),但分布方式更为聚集。电镜显示足突及裂缝膈膜形态MK-2206体内实验剂量正常,与WT组无明显差异。结论:通过在大鼠体内敲入部分人源化PLA2R1基因片段,大鼠尿蛋白水平较低,足细胞标志蛋白Nephrin表达聚集增强。该基因片段并未对大鼠肾脏功能产生有害影响,似乎有一定的保护作用,但具体机制仍需进一步实验验证。