紫檀芪通过调控氧化应激和NLRP3炎症小体抑制肝癌增殖迁移

目的 探讨紫檀芪(PTE)对肝细胞癌(HCC)的增殖和迁移能力的影响及其可能的机制。方法 培养人HCC细胞Hep3B、HepG2、Bel-7404、Bel-7402及永生化人肝细胞LO2,观察PTE对细胞生长能力的影响。MTT、平板克隆、EdU实验和Western-blot实验观察PTE对细胞增殖能力的影响。细胞划痕实验、Transwell实验和Western-blot实验检测细胞迁移能力的改变。应用过氧化氢(H_2O_2)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18试剂盒分别检测H_2O_2、IL-1β和IL-18的表达水平。采用2,7-双乙酸二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针孵育细胞,应用荧光酶标仪法检测ROS的表达水平。qRT-PCR和/或Western-blot实验检测NOX4、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的表达水平。免疫荧光染色方法检测NLRP3炎症小体的组装效应。结果 MTT、单克隆形成、EdU和Western-blot实验结果表明,PTE抑制HCC的增殖能力(P<0.01)。划痕实验、Transwell和Western-blot实验结果表明,PTE显著降低HCC的迁移能力(P<0.01)。PTBLZ945体内实验剂量E抑制Hep3B细胞中NOX4、ROS和H_2O_2的水平,且结果呈剂量依赖性(P<0.01);予抗氧化剂NAC或NOX4抑制剂VAS2870处理后,细胞中ROS和H_2O_2水平进一步被抑制(P<0.01)。PTE呈剂量依赖性抑制Hep3B细胞中NLRP3炎症小体复合物组分NLRP3、ASProbiotic bacteriaC、Caspase-1及IL-1β的含量(P<0.01);予LPS或Trichostatin AH_2O_2刺激后,Hep3B细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达水平增加(P<0.01),但上述结果可被PTE抑制(P<0.01)。免疫荧光结果表明,PTE抑制LPS诱导Hep3B细胞内NLRP3炎症小体的组装活化水平。MTT和Transwell实验结果表明,予LPS或H_2O_2刺激后Hep3B细胞增殖和迁移能力明显增加(P<0.05),但上述结果可被PTE抑制(P<0.05)。结论 PTE通过抑制氧化应激和NLRP3炎症小体进而抑制HCC的增殖和迁移。