个体识别能够直接将犯罪现场和犯罪嫌疑人相关联,在法庭科学领域中占据非常重要的地位。毛干是案件现场最为常见的生物物证之一,由于核DNA含量少且降解严重,现有的DNA检验方法难以进行准确的个体识别。毛干中蛋白质含量丰富且稳定,蕴含着丰富的遗传信息。本研究以毛干蛋白为研究对象,建立并优化了毛干蛋白提取与质谱检测方法,构建了基于东亚人群的毛干蛋白单氨基酸多态性(single amino acid polymorphism,SAP)分析算法流程,获得了一系列毛干蛋白SAP位点信息,并计算随机匹配概率(random matching probability,RMP)尝试进行个体识别。主要研究内容如下:(1)考察了毛干蛋白离子液体提取法和PCT提取法两种前处理方法,在方法的稳定性和操作的便捷性上,离子液体提取法更有优势。建立了基于离子液体的毛干蛋白提取与质谱检测方法,优化了提取过程中的超声破碎时长。比较了同一毛干质谱重复、同一个体不同毛干与不同个体毛干在检出蛋白上的差异,发现在差异程度上同一毛干质谱重复<同一个体检测的不同毛干<不同个体检测的不同毛干,说明毛干蛋白数量、种类以及SAP存mindfulness meditation在个体间差异。固定了毛干蛋白检测的取样部位为近毛根端2 cm,排除了毛发直径对毛干蛋白检测的影响。(2)建立了毛干蛋白SAP分析算法,并在12份样本中分析了SAP的个体识别能力。自建了东亚人群SAP蛋白序列数据库,包含25万个SAP位点,并生成了单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分析算法流程与SAP对应注释表。使用离子液体法对12份2 cm长的毛干样本(6人,每人2根)进行前处理后,进行LC-MS/MS质谱检测,使用上述SAP蛋白序列数据库对质谱数据进行搜库分析,共获得321个SAP,每个样本平均为131±17个。依据SAP与SNP对应注释表信息,推导出SAP对应的SNP分型,与毛干来源同一个体的血液外显子组测序SNP结果比较从而验证SAP检测准确性,基Entinostat化学结构于SNP的群体频率进行RMP的计算。得到的RMP数值范围为1.4×10~(-4)至1.0×10~(-9),中位数为1.3×10~(-6)。(3)优化了毛干蛋白质组提取与检测方法。该方法对毛干进行3次提取,使毛干蛋白充分溶解,而且采用高p H反相液相色谱法将3次提取的混合物分成6个馏份上质谱检测,与最初的单次提取单次质谱检测的方法相比,新方法有效提升了质谱检测的覆盖度,可以鉴定出更多的低丰度蛋白质与多肽,而且在含有SAP位点的遗传突变肽段的数量上从99个增加到203个,SAP的数量从97个增加到179个。在10个个体的毛干中,使用新方法共鉴定出3957±943个多肽和632±243个蛋白,共获得321个SAP,平均每个个体SAP的检出数量为157±23个。计算得到的RMP值介于6.53×10~(-4)和3.10×10~(-14)之间(中位数=1.37×10~(-8))。毛干蛋白质组优化提取与检测方法能够提高毛干中SAP的检出数量,进而提升个体识别能力。(4)探索了RMP的不同算法及其个体识别能力,并考量了增加个体识别能力的其他参数。假设如下应用场景,现场物证为毛干,有N个嫌疑人的血液,检测毛干SAP,与嫌疑人血液外显子组中SNP进行比对分析,对嫌疑人进行排序。SAP到SNP的转换准确性经由外显子测序验证,统计准确与错误的SAP位点数量,并利用准确的SAP或者SNP计算RMP并排序。结果发现嫌疑人的不同数量会影响RMP排序结果,准确或错误的SAP位点数量在毛干与血液来源于同一个体的情况下最多或最少。该结果揭示了未来个体识别应用时可整合RMP值及排序、验证准确与错误的SAP位点数,但是由于样本量较小,需在后续研究中通过大批量数据验证进一步验证,建立更为全面的个体识别算法。综上,本文建立了毛干蛋白个体识别技术体系,覆盖了毛干蛋白的提取与质谱检测、SAP分型鉴定、随机匹配概率计算三Dorsomorphin IC50个方面,为毛干蛋白的个体识别应用奠定了坚实的技术基础。