玉簪作为一种重要传统药材,对其研究限于生理药理方面,其花色花香作为园林绿化的重要性状,花色和花香作为由多基因控制的复杂性状,而玉簪中的花色仅有白色和紫色,也仅有部分品种具备浓郁的甜香,因此对其基因调控过程中的影响因素进行研究尤为重要。本实验以H.‘So Sweet’为实验材料,通过对转录组数据库进行数据分析,对得到的HsCYP81E8s基因序列的表达模式进行分析,并通过生物信息学分析对两条基因的异同进行比较。为探究HsCYP81E8s在花色及花香方面的功能,构建VIGS瞬时沉默载体和瞬时超表达载selleck NMR体,通过农杆菌介导的真空注射法侵染玉簪的花苞进行荧Disease genetics光定量PCR分析基因沉默及过表达对花色和花香的影响;为使基因避免瞬时转化的缺点,使用拟南芥进行异源转化以获得稳定转基因拟南芥遗传株系,继而探究HsCYP81E8s基因的过表达对花色及花香的影响。具体研究结果如下:1.HsCYP81E8s基因的表达模式分析发现在H.‘So Sweet’的盛花期的花中表达量最高。2.成功从H.‘So Sweet’中克隆了转录组数据库HsCYP81E8基因和HsCYP81E8基因的片段序列——HsCYP81E8-1,分别为1527 bp和1071 bp,编码508和356个氨基酸,并经过比对发现二者仅为5’端存在差异,且二者均是典型的CYP450家族蛋白。3.通过VIGS技术和瞬时超表达技术发现无论基因是沉默还是过表达均导致花青素合成的关键酶基因表达量下降,影响花青素的形成;而对萜类化合物的关键酶基因TPS的表达量则是出现协同作用,当HsCYP81E8和HsCYP81E8-1基因的表达量上升时TPS基因的表达量同样上升影响玉簪花香的合成。4.利用蘸花法异源转化模式植物拟JNJ-42756493小鼠南芥,获得了稳定转化的拟南芥转基因高表达株系,对其表型分析发现其两种转基因植物生长均比野生型旺盛表明基因可能参与调节植物的生长发育;通过荧光定量PCR技术发现两种基因的过表达均会使类黄酮代谢通路的ANS基因和萜烯代谢通路的TPS基因的表达量下降,说明其基因的过表达在拟南芥中抑制花色及花香的合成。