载PRF的肝素化GelMA水凝胶预防药物相关性颌骨坏死的体外研究

目的:药物相关性颌骨坏死(Medication-related osteonecrosis of the jaw,MRONJ)的发生是由于患者服用了以双磷酸盐类(Bisphosphates,BPs)药物为主的抗骨吸收或抗血管生成药物所引发的一类疾病,该病主要临床特征为颌面部死骨暴露、软组织难以愈合、病理性骨折等。难愈的软组织和暴露的死骨使得患者痛苦不堪、生活质量较差。现今临床常用于治疗MRONJ的方法主要有手术和非手术的保守治疗。但手术治疗效果较差、复发率高,非手术治疗只能起到缓解症状的效果。因此如何从根源入手对该病的发生进行selleck HPLC预防,是当前临床工作中亟待解决的问题。而该病的发生往往是由于患者在服用或注射药物期间进行了拔牙、种牙等临床外科操作,这些局部危险因素的存在使得MRONJ发病的概率大幅提高。若能将某种能够预防MRONJ的支架材料植入到相应的口腔组织破损处,则可能达到预防MRONJ发生的效果。因此,本研究欲通过甲基丙烯酰化明胶(Gelatin methacryloyl,GelMA)和甲基丙烯酰化肝素(Methacrylamide heparin,Hep MA)的共价结合,构建可承载生长因子的水凝胶支架,并将富血小板纤维蛋白(Plateletrich fibrin,PRF)负载于其上,最终制备出能够缓释生长因子的光交联PRF-Hep MA/GelMA水凝胶。通过体外实验检测并评估该水凝胶作为预防MRONJ的组织工程支架材料的可行性。研究方法:1、制备PRF-Hep MA/GelMA水凝胶前体溶液,通过紫外光(405 nm)照射交联固化成胶。2、通过CCK-8、活死细胞染色技术评估PRF-Hep MA/GelMA水凝胶的生物相容性。3、通过CCK-8对ZOL的药物浓度进行筛选。通过CCK-8、活死细胞染色、ALP染色、茜素红染色、q RT-PCR检测PRF-Hep MA/GelMA水凝胶是否能够一定程度上逆转ZOL对MC3T3Personality pathology-E1细胞增殖及成骨分化的负面影响。研究结果:1、成功构建PRF-Hep MA/GelMA水凝胶,MC3T3-E1细胞与GelMA,Hep MA/GelMA,PRF/GelMA和PRF-Hep MA/GelMA 4组水凝胶共培养后,CCK-8和活死细胞染色进行检测,实验结果表明各组水凝胶均具有良好的生物相容性,其中PRF-Hep MA/GelMA组促细胞增殖的能力最佳。2、通过CCK-8筛选ZOL的药物浓度,分析显示:2μmol/L ZOL在第5天显著抑制了MC3T3-E1细胞的增殖。细胞与2μmol/L ZOL和PRFHep MA/GelMA水凝胶共培养后,CCK-8、活死细胞染色结果说明PRFHep MA/GelMA水凝胶一定程度上能够逆转ZOL对MC3T3-E1细胞增殖的负面影响;ALP染色、茜素红染色、q RT-PCR购买Roxadustat结果分析表明PRF-Hep MA/GelMA水凝胶一定程度上能够逆转ZOL对MC3T3-E1细胞成骨分化的负面影响。研究结论:1、PRF-Hep MA/GelMA水凝胶具有优异的生物相容性。2、PRF-Hep MA/GelMA水凝胶一定程度上能够逆转ZOL对MC3T3-E1细胞增殖及成骨分化的抑制作用。因此认为PRF-Hep MA/GelMA水凝胶具备预防MRONJ的潜力。