二尖梅奇酵母拮抗菌和抑菌中药筛选及抑菌机理研究

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是中国特有的淡水螯蟹,其具有高经济价值。但近年来,中华绒螯蟹“牛奶病”在全国范围内大面积爆发,东北地区尤为严重,这已经给养殖户带来了巨大的经济损失。现已确定该病的病原为二尖梅奇酵母(Metschnikowia bicuspidata),而其爆发原因尚不明确,可能与环境因素、饲料管理以及遗传因素等有关。目前,水产养殖业中对抗菌类药物的使用面临着严格的管控,且尚未开发出专门用于高效防治酵母菌感染的抗菌药物,因此我们需要积极寻找能安全有效地预防和治疗此病的方法。为了解决这一问题,本研究对二尖梅奇酵母的拮抗菌以及抑菌中药进行了筛选,并探究了抑菌中药黄连的主要活性成分小檗碱对其的抑制效果及抑菌机制。在二尖梅奇酵母的拮抗菌筛选方面spine oncology,本研究的筛选种类主要为芽孢杆菌类,通过点种法和牛津杯法对各种样品中的菌株进行筛选,并对筛选出的拮抗菌ATMB-1进行菌种鉴定。经初步鉴定,ATMB-1为Lysinibacillus fusiformis种菌株。在抑菌中药的筛选实验中,本研究在对一些具有抗真菌效果的中药进行了以二尖梅奇酵母为指示菌的药敏实验后,发现黄连的抑菌效果良好,因此,进一步对黄连成分中主要的生物碱——小檗碱进行了抑菌机制的研究。本文通过检测SOD活性、MDA含量、GST活性、GSH含量以及转录组学分析对小檗碱的抑菌机制进行了探究,得到主要研究结果及推论如下:小檗碱可以刺激二尖梅奇酵母细胞内解毒物质(如GSH)含量的增多,以此来应答小檗碱对于细胞的胁迫作用;小檗碱处理前后Protein Tyrosine Kinase抑制剂,二尖梅奇酵母中的差异表达基因(DEGs)数量为2109个,selleck抑制剂其中表达量上调基因1207个,下调基因902个;注释到KEGG数据库的DEGs共625个,其中影响到代谢途径的有313个,占比达到注释基因总数的50.8%;注释到GO数据库的DEGs共1369个,该结果反应出小檗碱对细胞各类成分均有不同程度的影响;注释到KOG数据库的DEGs共1143个,其中较多为核酸转录相关和代谢相关的基因。综上,本研究推测小檗碱可以作用于二尖梅奇酵母中的多个靶点,以发挥其抑制活性。