响应面试验优化酶解法制备鲣鱼活性肽及其对小鼠抗疲劳的影响

目的:研究鲣鱼活性肽酶解工艺,探讨鲣鱼活性肽对小鼠抗疲劳的影响。方法:以鲣鱼活性肽得率为评价指标,采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶对鲣鱼鱼糜最佳用酶进行筛选,考察料液比、加酶量、酶解时间和酶解温度对酶解工艺的影响,在单因素实验的基础上,结合响应面法进行AZD6738供应商优化设计,得到酶解鲣鱼活性肽的最佳工艺。构建递增负荷式游泳训练所致的疲劳小鼠模型,按体质量随机分为安静空白组、运动模型组、阳性对照组、鲣鱼活性肽低剂量组(200 mg/kg,简称低剂量组)、鲣鱼活性肽中剂量组(400 mg/kg,简称中剂量组)、鲣鱼活性肽高剂量组(800 mg/kg,简称高剂量组)。除安静空白组外,其余各组以训练时间为变量进行递增负荷式游泳训练。采用负重力竭游泳实验检测小鼠的负重游泳力竭时间;检测小鼠血清尿素氮(获悉更多BUN)含量、乳酸(LD)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及肝脏丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:(1)风味蛋白酶酶解鲣鱼活性肽得率均高于中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);在固定料液比1∶1(g/mL)的基础上,风味蛋白酶酶解优化条件为加酶量4 400 U/g,酶解时间6.5 h,酶解温度42℃;该条件下鲣鱼活性肽得率为33.166%。(2)运动模型组小鼠的BUN、LD、MDA含量和LDH、SOD活性均极显著高于安静空白组(P<0.01)。与运动模型组相比,阳性对照组及鲣鱼活性肽低、中、高剂量组均极显著延长小鼠力竭游泳时间(P<0.01),减少运动后小鼠血清BUN、LD和肝脏MDA含量及降低血清LDH活性(P均<0.01),提高肝脏SOD活性(P<0.01)。结论:通过响immune profile应面法优化风味蛋白酶酶解鲣鱼活性肽的工艺,验证了鲣鱼活性肽具有减轻力竭游泳小鼠疲劳的作用。