目的 探讨结直肠癌细胞在三维(3D)与二维(2D)培养环境下增殖能力的变化及机制。方法 SW480结直肠癌细胞购自上海细胞库。将SW480结直肠癌细胞分别进行壳聚糖-胶原水凝胶3D培养与细胞培养皿2D培养。光学显微镜观察细胞形态；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况；Western blot法检测3D与2D培养环境OTUB2与PCNA蛋白表达；比较转染前后SW480细胞OTUB2、PCNA基因和蛋白表达、细胞增殖速率。结果 SW480结肠癌细胞在2D环境培养24 h后可圆形或卵圆形细胞贴壁，7 d后已贴壁的细胞慢慢伸展，呈短杆状；SW480结肠癌细胞在壳聚糖-胶原水凝胶3D培养24 h后呈3D球状生长，培养7 d后可见细胞数量增多，细胞球变大。3D培养环境SW480细胞增殖速率低于2D培养环境，差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测结果显示，与2D培养比较，3D培养环境培养后结直肠癌细胞系中OTUB2、PCNA蛋白表达均低于2D培养环境，差VP-16溶解度异均有统计学意义(P<food microbiology0.05)。转染后SW48PLX5622小鼠0细胞OTUB2、PCNA基因和蛋白表达、细胞增殖速率均高于转染前，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 壳聚糖-胶原水凝胶3D培养条件下结直肠癌细胞增殖速率减慢，其机制与调控OTUB2、PCNA表达有关。