桑黄是一类具有悠久历史的传统药用真菌。桑黄多糖具有多种药理活性,如:抗肿瘤、抗菌消炎和清除自由基等,目前关于桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)多糖的研究相对较少。本文通过比较热水浸提法与超声辅助提取法确定桑树桑黄多糖的最优提取工艺,并对桑树桑黄粗多糖进行了分离纯化,进一步对其纯化后的组分SSP1进行了结构鉴定。本文同时研究了桑树桑黄多糖对人肝癌细胞(Hep G2)、肺癌人类肺泡基底上皮细胞(A549)、人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、胃腺癌细胞(SGC-7901)、人结直肠腺癌细胞(HCT-116)和人前列腺癌细胞(PC3)的抑制作用,并采用网络药理学方法结合分子对接技术,探讨其作用机理。结果如下:(1)采用正交试验设计,确定了热水浸提桑树桑黄多糖的最佳工艺条件,即:提取温度100℃、提取时间10小时、料液比1:110(g/v),桑黄多糖的得率为0.65%。通过响应面实验设计,确定超声辅助法提取桑树桑黄多糖的最佳提取工艺为提取温度69℃,提取时间60 min,料液比1:21(g/v),多糖得率为0.30%。热水浸提多糖的得率明显高于超声辅助提取法。(2)采用聚酰胺层析法、三氯乙酸法和Sevage法对桑树桑黄粗多糖进行脱蛋白和脱色处理并对比效果,结果表明:聚酰胺层析法最佳,蛋白的脱除率为79.75%,多糖保留率为84.9CCRG 810456%。脱色率达到94.35%。经DEAE-52离子柱层析处理获得的去离子水洗脱组分命名为SSP1,纯化后多糖得率为53.24%。(3)经UV光谱分析,SSP1不含有任何蛋白,也不含有任何核酸。IR分析表明,SSP1中有多糖及糖醛酸的特征性吸收峰。离子色谱技术检测显示SSP1由8种单糖组成,SSP1中岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸的摩尔比为20.81:1.04:2.83:34.24:16.95:2.50:21.30:0.33。Inorganic medicine(4)体外细胞实验显示桑树桑黄粗多糖和SSP1均能抑制肿瘤细胞Hep G2、A549、MDA-MB-231、PC3、SGC-7901和HCT-116的增殖,SSP1的效果均好于粗多糖且差异显著(P<0.05)。20 mg/m L时SSP1对Hep G2、A5ABT-199核磁49和MDA-MB-231的抑制作用相对较好,抑制率分别达到72.54%、65.54%和48.33%。(5)利用网络药理学方法筛选出SSP1的潜在作用靶点138个,通过分析获得SSP1抑制肿瘤细胞Hep G2、A549和MDA-MB-231的核心靶点分别为18、18和20个。GO功能富集分析结果显示SSP1对Hep G2、A549和MDA-MB-231的作用机制涉及多个生物学过程,包括RNA相关酶的转录调控、细胞增殖的调控和基因表达的正向调控等通路。KEGG通路富集显示SSP1对Hep G2、A549和MDA-MB-231的作用可能通过癌症的途径、胰岛素抵抗和癌症中的micro RNAs等通路进行的。分子对接结果均具有较好的结合活性,其中葡萄糖醛酸和HSP90AA1分子亲和度最高。