黄芩苷通过FOXO3/CCL22信号通路调控结外NK/T细胞淋巴瘤细胞生长的机制研究

目的:探讨黄芩苷对结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)细胞生长的影响及相关机制。方法:培养正常NK细胞及人ENKTCL细胞株SNK-6和YTS,分别采用5、10、20μmol/L的黄芩苷处理SNK-6和YTS细胞并设置对照,EdU法检测细胞增殖,FCM法检测细胞凋亡,Western blot检测BCL-medical birth registry2、Bax、FOXO3和CCL22蛋GSK J4 IC50白的表达;设计并合成干扰质粒,采用PEI转染试剂对FOXO3 siRNA干扰质粒和CCL22 pcDNA过表达质粒进行转染,建立动物模型并进行验证。结果:对照组和5、10、20μmol/L黄芩苷处理组SNK-6细胞的增殖率分别为(56.17±2.96)%Vorinostat、(51.92±4.63)%、(36.42±1.58)%、(14.60±2.81)%,各组YTS细胞的增殖率分别为(58.85±2.98)%、(51.38±1.32)%、(34.75±1.09)%、(15.45±1.10)%,各组SNK-6细胞的凋亡率分别为(5.93±0.74)%、(11.78±0.34)%、(28.46±0.44)%、(32.40±0.37)%,各组YTS细胞的凋亡率分别为(7.93±0.69)%、(16.29±1.35)%、(33.91±1.56)%、(36.27±1.06)%。与对照组相比,SNK-6和YTS细胞中BCL-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.001),仅在黄芩苷浓度为20μmol/L时SNK-6细胞中Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.001),而YTS细胞经不同浓度(5,10,20μmol/L)黄芩苷处理后Bax蛋白表达水平均明显升高(P<0.001)。ENKTCL细胞系SNK-6、YTS细胞较人NK细胞中FOXO3蛋白表达降低,CCL22蛋白表达升高(P<0.001),经黄芩苷处理后细胞中FOXO3蛋白表达增高(P<0.01),CCL22蛋白表达下降(P<0.001)。动物实验结果显示,黄芩苷处理可抑制肿瘤的生长,经黄芩苷处理的裸鼠ENKTCL组织中CCL22蛋白的表达水平较对照组下降(P<0.01),而FOXO3蛋白的表达水平较对照组上升(P<0.05)。此外,FOXO3沉默会导致FOXO3蛋白表达下降和CCL22蛋白表达增高(P<0.01,P<0.001)。结论:黄芩苷对ENKTCL细胞株SNK-6和YTS有抑制增殖、促进凋亡的作用,可上调Bax蛋白表达,下调BCL-2蛋白表达,且可通过FOXO3介导下调CCL22表达;动物实验发现黄芩苷可抑制肿瘤生长;黄芩苷可通过FOXO3/CCL22信号通路调控抑制ENKTCL细胞的生长并诱导其凋亡。