补中益气汤联合顺铂通过调控Wnt/β-catenin信号通路改善A549/DDP细胞耐药性的分子机制

目的:探究补中益气汤联合顺铂通过调控Wnt/β-catenin信号通路改善A549/DDP细胞耐药性的分子机制。方法:培养A549/DDP细胞并制备补中益气汤含药血清。采用siRNA沉默GSK-3β表达,检测各组A549/DDP细胞中GSK-3β蛋白的相对表达Recipient-derived Immune Effector Cells量;Western blot检测沉默GSK-3β后各组A549/DDP细胞β-catenin和Survivin表达;MTT法检测GSK-3β受确认细节抑对各组A549/DDP细胞顺铂IC50的影响;采用Annexin V/PI染色法检测GSK-3β受抑对各组A549/DDP细胞凋亡的影响。结果:相较于空白对照组,siGSK-3β-592Microbiology抑制剂组对蛋白表达的抑制率达70%(P?0.05);RNAi技术沉默GSK-3β后,A549/DDP细胞中β-catenin和Survivin蛋白表达明显增加(P?0.05),单独顺铂治疗组与单独补中益气汤治疗组均可使β-catenin和Survivin蛋白表达明显下调(P?0.05),补中益气汤联合顺铂治疗组则可使β-catenin和Survivin蛋白表达下调更显著(P?0.05);RNAi技术沉默GSK-3β后,A549/DDP细胞顺铂IC_(50)显著升高(P?0.05),而补中益气汤仍可显著降低A549/DDP细胞的顺铂IC50(P?0.05);GSK-3β表达受抑后,A549/DDP细胞的顺铂诱导凋亡率明显受抑制(P?0.05),而补中益气汤仍可明显提高A549/DDP细胞的顺铂诱导凋亡率(P?0.05)。结论:上调A549/DDP细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性时,补中益气汤联合顺铂仍对A549/DDP细胞的顺铂耐药性有明显改善作用。