目的:采用实时荧光PCR技术对循环游离DNA(circulating cell-free DNA,cf-DNA)进行定量,观察初诊弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患者化学治疗前后cf-DNA浓度和完整性的变化,分析cf-DNA水平与患者疗效的关系。并探讨年龄、性别、IPI评分、NCCN-IPI评分、Ann Arbor分期、有无全身症状、ECOG体能状态评分、乳酸脱氢酶水平、Hans免疫分型及结外累及数等临床特征与cf-DNA浓度和完整性之间的相关性。方法:对收集的40例初诊DLBCL患者的血浆样本进行分析,血浆cf-DNA通过扩增ALU序列进行定量PCR(q PCR)测定,计算cf-DNA完整性为q PCR结果的比值(ALU247/115)。29例患者的中期疗效评估进行分组分析,再对末次疗效评估时收集到的9例患者进行分组分析,监测其治疗疗效与血浆cf-DNA浓度及完整性的相关性。结果:1.缓解组治疗前后cf-DNA浓度和完整性的变化:按照中期疗效评估(3～4个疗程)结果将29例DLBCL患者进行分组分析。17例缓解患者,治疗后ALU247片段浓度的中位值为61.44ng/ml,较治疗前76.76ng/ml降低,差异无统计学意义;治疗后ALU115片段浓度的中位值为95.49ng/ml,较治疗前91.21ng/ml升高,差异无统计学意义;治疗后cf-DNA完整性的中位值为0.62,较治疗前0.77降低,差异有统计学意义(P=0.015<0.05)。2.难治组治疗前后cf-DNA浓度和完整性的变化:按照中期疗效评估(3～4个疗程)结果将29例DLBCL患者进行分组分析。12例难治组患者,治疗后ALU247片段浓度的中位值为96.10ng/ml,较治疗前78.98ng/ml升高,差异无统计学意义;治疗后ALU115片段浓度的中位值为116.00ng/ml,较治疗前141.86ng/ml降低,差异无统计学意义;治疗后cf-DNA完整性的中位值为0.71,较治疗前0.56升高,差异有统计学意义(P=0.009<0.05)。3.缓解组中期评估与末次化疗评估cf-DNA浓度和完整性变化:中期评估时3名PR患者和2名CR患者,在经过末次评估时(6～8个疗程),这5名患者均达到CR。ALU247片段浓度的中位值由55.42ng/ml升高至177.52ng/ml,差异无统计学意义;ALU115片段浓度的中位值由70.57ng/ml升高至206.43ng/ml,差异无统计学意义;cf-DNA完整性的中位值由0.79ng/ml降低至0.74ng/ml,差异有统计学意义(P=0.043<0.05)。4.难治组中期评估较与末次化疗评估cf-DNA浓度和完整性变化:3～4个疗程后,评估疗效为难治的3名PD和1名CR患者,在经过6～8个疗程治疗后再次疗效评估时,这4名患者疾病仍进展或复发。ALU247片段浓度的中位值由97.81ng/ml升高至104.29ng/ml,差异无统计学意义;ALU115片段浓度的中位值由92.26ng/ml降至77.19ng/ml,差异无统计学意义;cf-DNA完整性的中位值由0.78ng/ml升高至1.00ng/ml,差异无统计学意义。5.无论缓解组或难治组,ALU247及ALU115浓度在患者治疗全程中无明显规律变化。治疗全程呈现疾病缓解的患者cf-DNA完整性降低,但末次化疗降低程度较中期时幅度减弱,基本维持残留水平;治疗全程呈现疾病进展的患者cf-DNA完整性持续升高。6.患者cf-DNA浓度及完整性与临床特征的相关性:将DLBCL患者按临床特征进行分组分析,结果显示,ALU247片段浓度与DLBCL患者的其他临床特征之间均无明显相关性。ALU115片段浓度与IPI评分系统和NCCN-IPI评分系统相关(P均<0.05)。cf-DNA完整性与DLBCL患者的性别、疾病分期、IPI评分系统、NCCN-IPI评分系统相关(PTalazoparib试剂均<0.05)。7.患者cf-DNA浓度及完整性与免疫组化的相关性:患者免疫组化包括有BCL-2、BCL-6、Ki-67、MUM-1,其结果与患者ALU247、ALU115浓度及完整性均无明显相关性(P均>0.05)。结论:1.DLBCL患者的cf-DNA完整性变化与中期疗效评估结果一致,疾病缓解者(包括CR/PR)cf-DNA完整性降低,难治者(包括SD/PD)cf-DNA完整性升高;这表明cf-DNA完整性可以作为患者治疗评估的指标。2.已达疾病缓解(包括CR/PLaduviglusibR)的DLBCL患者,在末次疗效评估进一步缓解时,cf-DNA完整性降低,但基本维持残留水平;疾病难治(包括SD/PD)的DLBCL患者在末次疗效评估仍表现为进展者,cf-DNA完整性再次明显升高。表明,cf-DNA完整性与基于PET-CT等传统影像学检查在临床疗效评估中的一致性。3.ALU247浓度与DLBCL患者的临床特征之间无明显相关性,而ALU115(cf-DNA实际浓度)与IPI评分系统、NCCN-IPI评分系统相关。ALU247/115(cf-DNA完整性)与DLBCL患者的性别、疾病wrist biomechanics分期、IPI评分系统、NCCN-IPI评分系统相关。4.cf-DNA完整性水平变化与疗效评估具有一致性,而cf-DNA实际浓度在IPI和NCCN-IPI等预后相关评分系统中较cf-DNA完整性具有强相关性。表明cf-DNA浓度和完整性的综合使用可以提高对疾病预后预测准确率。