目的 研究葫芦素B(cucurbitacin B,Cu B)对肝癌Huh-7细胞增殖的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度Cu BRAD001抑制剂对Huh-7细胞的存活率；葫芦素B(0.5、1、2μmol·L~(-1))作用于Huh-7细胞24 h, EdU染色检测细胞增殖；DCFH-DA,C11-BODIPY和FeRhonox-1荧光探针分别检测细胞内活性氧水平，细胞内脂质过氧化水平和细胞内Fe~(2+)浓度；谷胱甘肽(GSH)试剂盒和丙二醛(MDA)试剂盒分别检测细胞内GSH和MDA水平；Real-time PCR和Western blot分别检测SLC7A11、GPX4、SLC40A1、Transferrin、Nrf2、HO-1的mRNA水平和蛋白表达情况；免疫共沉淀法检测GPX4蛋白的泛素化。结果 与对照组比较，随Cu B药物浓度增大，Huh-7细胞存活率逐渐降低，其IC_(50)为0.96μmol·L~(-1);与对照组比较，不同剂量Cu B干预后，EdU阳性细胞明显减少(P<0.05);细胞内活性氧、脂质过氧化水平和Fe~(2+)浓度的荧光强度明显增强(P<0.05);同时细胞内脂质过氧化产物MDA的积累明显增多(P<0.05),而细胞内GSH水平明显下降(P<0.05);此外，不同剂量Cu B干预后selleckchem LGX818，GPX4的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P<Structuralization of medical report0.05);而且Nrf2和HO-1的蛋白水平明显降低(P<0.05)。免疫共沉淀分析显示，Cu B促进了GPX4的泛素化和降解。结论 Cu B可能通过促进GPX4泛素化和降解诱导细胞铁死亡抑制肝癌细胞Huh-7增殖。